2024版高考生物一輪總復習第10單元生物技術與工程第36課微生物的培養(yǎng)技術及應用教師用書

第36課微生物的培養(yǎng)技術及應用?學業(yè)質(zhì)量水平要求?1．通過分析培養(yǎng)基各成分在微生物培養(yǎng)中的作用，得出可以通過調(diào)整培養(yǎng)基的配方，有目的地培養(yǎng)某種微生物的結論。(科學思維)2．通過分析選擇培養(yǎng)基的原理，理解適者生存的含義。(生命觀念)3．通過微生物的相關實驗，學會培養(yǎng)、分離微生物以及微生物計數(shù)的實驗設計。(科學探究)考點一微生物的基本培養(yǎng)技術1．培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。(2)種類①按物理狀態(tài)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。②按功能可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。(3)成分：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。2．無菌技術(1)含義：在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。(2)常用方法3．微生物的純培養(yǎng)(1)概念：由單一個體繁殖所獲得的微生物群體是純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。(2)過程：包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。(3)常用接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。(4)實例——酵母菌的純培養(yǎng)1．培養(yǎng)基只能用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物，不能用以積累其代謝物。 (×)2．由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。 (√)3．經(jīng)高壓蒸汽滅菌后的培養(yǎng)基，要冷卻至50℃左右時，才能在酒精燈火焰附近倒平板。 (√)4．平板劃線時要注意將最后一次的劃線與第一次的劃線相連。 (×)【教材細節(jié)命題】(選擇性必修3P12～13旁欄思考)(1)在未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長？沒有。如果有，說明了培養(yǎng)基被雜菌污染。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上，如果你觀察到了不同形態(tài)的菌落，你能分析出可能是由什么引起的嗎？如果觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是接種的菌種不純或者無菌操作不規(guī)范等引起的。1．常見物品的消毒或滅菌方法(1)消毒方法及適用對象(2)滅菌方法及適用對象2．平板劃線操作的注意事項(1)灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。(2)第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落。(3)劃線時最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。(4)劃線時用力大小要適當，防止用力過大將培養(yǎng)基表面劃破。(5)操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要對接種環(huán)進行火焰灼燒滅菌，劃線操作結束時，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的如下表：項目第一次操作每次劃線之前劃線結束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目依次減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者考向1|培養(yǎng)基的成分與功能的分析1．下列有關培養(yǎng)基的敘述，正確的是()A．培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B．培養(yǎng)基中都只含有碳源、氮源、水和無機鹽C．固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D．微生物在固體培養(yǎng)基表面生長，可形成肉眼可見的單個細菌繁殖而來的菌落A解析：培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供碳源、氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)的基質(zhì)，A正確；微生物培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、氮源、水和無機鹽等，有的還需要生長因子等特殊的營養(yǎng)，固體和半固體培養(yǎng)基需要瓊脂，液體培養(yǎng)基不需要瓊脂，B錯誤；液體培養(yǎng)基中加入瓊脂可制成固體培養(yǎng)基，C錯誤；微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的菌落，但不一定是單個細菌繁殖而來的，D錯誤。2．已知某種細菌以CO2為唯一碳源，下列相關敘述正確的是()A．可推測該細菌的代謝類型為自養(yǎng)需氧型B．無機鹽是該細菌不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)C．培養(yǎng)過程中碳源同時充當該細菌的能源物質(zhì)D．培養(yǎng)該細菌的培養(yǎng)基中不需要添加氮源B解析：該細菌以CO2為唯一碳源，可推測該細菌的代謝類型為自養(yǎng)型，但不能確定是不是需氧型，A錯誤；微生物生長一般需要水、碳源、氮源和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，B正確；CO2不能為微生物提供能量，C錯誤；氮源是微生物必需的營養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)該細菌的培養(yǎng)基中需添加氮源，D錯誤?？枷?|無菌技術的辨析3．(2021·北京卷)人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學擬從中分離出葡萄球菌。下述操作錯誤的是()A．對配制的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌B．使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣C．用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基上涂布D．觀察菌落的形態(tài)和顏色等進行初步判斷C解析：為避免雜菌污染干擾，需對配制的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌，A正確；葡萄球菌需從人體皮膚的微生物中分離，為避免雜菌污染，故需要使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣，B正確；棉拭子上的微生物需要用平板劃線法在培養(yǎng)基上進行接種，C錯誤；根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進行鑒別，D正確。4．(2022·湖北卷改編)滅菌、消毒、無菌操作是生物學實驗中常見的操作。下列敘述正確的是()A．動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行B．微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用高壓蒸汽滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌D．可用高壓蒸汽滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌D解析：動、植物細胞DNA的提取不需要在無菌條件下進行，A錯誤；動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素，B錯誤；一般用高壓蒸汽滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌，以防止雜菌污染，C錯誤；可用高壓蒸汽滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌，以防止雜菌污染，D正確。【易錯提醒】把握選擇無菌技術的原則(1)考慮無菌技術的效果：滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能消毒，而不能滅菌?？枷?|微生物的純化方法及過程的分析5．下圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯誤的是()A．①步驟使用的培養(yǎng)基是已經(jīng)調(diào)節(jié)過pH并滅菌的培養(yǎng)基B．①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行C．③到④的過程中，接種環(huán)共灼燒了5次D．④步驟操作時，不能將第1次和第5次的劃線相連C解析：①步驟表示倒平板，在倒平板之前培養(yǎng)基已經(jīng)調(diào)節(jié)過pH并滅過菌，A正確。①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行，防止雜菌污染，B正確。接種環(huán)在每次接種前和接種結束后都要通過灼燒來滅菌，所以③到④的過程中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見，③到④的過程中共需灼燒接種環(huán)6次，C錯誤。④步驟操作時，不能將第1區(qū)和第5區(qū)的劃線相連，D正確。【易錯分析】培養(yǎng)物、純培養(yǎng)物、純培養(yǎng)的辨析考點二微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)1．微生物的選擇培養(yǎng)(1)選擇培養(yǎng)基：將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。(2)稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋后，將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進行培養(yǎng)。①系列稀釋操作系列稀釋：移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時，試管口和移液管應離火焰1～2cm。操作過程如下：②涂布平板操作序號圖示操作1取0.1mL菌液，滴加到培養(yǎng)基表面2將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中3將沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼燒，待酒精燃盡后，冷卻8～10s4用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使菌液涂布均勻③培養(yǎng)：待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板倒置，放入30～37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1～2d。2．微生物的數(shù)量測定(1)稀釋涂布平板法①計數(shù)原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②計數(shù)標準：為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進行計數(shù)。③計數(shù)方法：通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)為30～300、適于計數(shù)的平板。在同一稀釋度下，至少應對3個平板進行重復計數(shù)，然后求出平均值。④統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此統(tǒng)計結果一般用菌落數(shù)表示。(2)顯微鏡直接計數(shù)法①計數(shù)原理：利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下觀察、計數(shù)，然后再計算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量。②優(yōu)點：是一種常用的、快速直觀的測定微生物數(shù)量的方法。③缺點：統(tǒng)計的結果一般是死菌數(shù)和活菌數(shù)的總和。3．土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1．利用稀釋涂布平板法和平板劃線法均可實現(xiàn)細菌的分離和計數(shù)。 (×)2．培養(yǎng)分解尿素的細菌，培養(yǎng)基的pH會增大。 (√)3．篩選分解尿素的細菌的培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，且為液體培養(yǎng)基。 (×)4．利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時，統(tǒng)計的菌落數(shù)就是活菌的實際數(shù)。 (×)5．統(tǒng)計菌落數(shù)目時為保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)目最多的平板進行統(tǒng)計。 (×)6．利用顯微鏡直接計數(shù)法統(tǒng)計的細菌數(shù)量就是活菌的數(shù)量。 (×)【教材細節(jié)命題】1．(選擇性必修3P16思考·討論)(1)如果讓你配制一種培養(yǎng)基，將土壤稀釋液中能分解尿素的細菌分離出來，培養(yǎng)基的配方該如何設計？設計一種選擇培養(yǎng)基，用尿素作為唯一氮源，可以將分解尿素的細菌分離出來。(2)該培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基有哪些共同點和不同點？與普通培養(yǎng)基相比，這種培養(yǎng)基只是用尿素作為唯一氮源，培養(yǎng)基的其他營養(yǎng)成分基本相同。2．(選擇性必修3P16思考·討論)結合對照組，分析培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出一些菌落。如果沒有接種的培養(yǎng)基上沒有菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。如果接種后的完全培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，說明選擇培養(yǎng)基篩選出了一些尿素分解菌。1．常見選擇培養(yǎng)基的設計原理與應用實例選擇培養(yǎng)基設計原理應用實例具體處理分離菌種依據(jù)營養(yǎng)需求不添加碳源自養(yǎng)微生物(硝化細菌等)不添加氮源固氮微生物(根瘤菌等)以尿素為唯一氮源能分解尿素的微生物以石油為唯一碳源能分解石油的微生物加入某種化學物質(zhì)，其不作為營養(yǎng)物質(zhì)，對目標微生物無害，但會抑制或殺死其他微生物加入青霉素、四環(huán)素或鏈霉素抑制細菌和放線菌生長→分離酵母菌、霉菌等加入10%的酚抑制細菌和霉菌生長→分離放線菌利用特殊環(huán)境置于無氧條件下厭氧型和兼性厭氧型微生物置于高鹽環(huán)境中其他菌在高鹽環(huán)境中易失水而不能生存→分離金黃色葡萄球菌置于高溫環(huán)境中其他微生物因酶失活而無法生存→分離耐高溫微生物2．平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較項目平板劃線法稀釋涂布平板法圖示過程用接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線，將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)優(yōu)點可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離可以計數(shù)，可以觀察菌落特征相同點都使用固體培養(yǎng)基，若沒有特殊要求，兩種方法都可以用來分離微生物3．兩種微生物計數(shù)方法的比較項目間接計數(shù)法(稀釋涂布平板法)直接計數(shù)法(顯微計數(shù)法)原理當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量公式每克樣品中的菌落數(shù)＝(C/V)×MC：稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)；V：涂布平板時所用的稀釋液的體積/mL；M：稀釋倍數(shù)每毫升原液所含細菌數(shù)＝每小格內(nèi)平均細菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)缺點當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落不能區(qū)分活菌和死菌結果比實際值小比實際值大4．微生物的篩選與鑒別方法(1)微生物的篩選方法單菌落挑取法利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物選擇培養(yǎng)法利用選擇培養(yǎng)基對微生物進行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物鑒定培養(yǎng)法利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物(2)微生物的鑒別方法菌落特征鑒別法根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進行鑒別指示劑鑒別法在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基變紅，說明該種微生物能夠分解尿素透明圈鑒別法為了篩選出高效降解淀粉菌種，該培養(yǎng)基應以可溶性淀粉為唯一碳源，由于培養(yǎng)基中含有淀粉，而以淀粉為唯一碳源的微生物能產(chǎn)生淀粉酶分解淀粉，淀粉被分解后遇碘液不呈現(xiàn)藍色，因而隨著淀粉被分解，藍色褪去，出現(xiàn)透明圈5．對土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗的結果分析與評價內(nèi)容現(xiàn)象結論有無雜菌污染的判斷對照的培養(yǎng)皿中無菌落生長未被雜菌污染培養(yǎng)物中菌落數(shù)偏高可能被雜菌污染菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高培養(yǎng)物中混入其他氮源選擇培養(yǎng)基的篩選作用牛肉膏培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目大于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目選擇培養(yǎng)基具篩選作用樣品的稀釋操作得到2個或2個以上菌落數(shù)目在30～300的平板操作成功重復組的結果若選取同一種土樣，統(tǒng)計結果應接近考向1|選擇培養(yǎng)基成分與功能的分析1．下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是()A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、蒸餾水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、瓊脂、蒸餾水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、瓊脂、蒸餾水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、蒸餾水A解析：在A項的培養(yǎng)基中既有尿素作為唯一氮源，又有其他各種成分，可以選擇出分解尿素的細菌；而B項中無尿素作氮源，C項中缺少碳源，D項中有牛肉膏、蛋白胨可提供氮源的成分。2．物質(zhì)W是一種含氮有機物，W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌，結果如下圖。下列說法錯誤的是()A．透明圈的形成是因為W物質(zhì)被分解B．所用的選擇培養(yǎng)基應該是以物質(zhì)W為唯一氮源C．甲菌落中的細菌可能是利用空氣中的氮氣作為氮源D．乙菌落中的細菌都能降解W，不需要進一步純化D解析：W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明，因此透明圈的形成是因為W物質(zhì)被分解，A正確；要篩選出能降解W的細菌，所用的選擇培養(yǎng)基應該是以物質(zhì)W為唯一氮源，B正確；該培養(yǎng)基以W物質(zhì)為唯一氮源，而甲菌落周圍未出現(xiàn)透明圈，因此甲菌落中的細菌可能是利用空氣中的氮氣作為氮源，C正確；乙菌落中的細菌不一定都能降解W，因此仍需要進一步純化，D錯誤?！疽族e提醒】能夠在選擇培養(yǎng)基上生長的不一定都是目的菌株原則上選擇培養(yǎng)基只能允許特定種類的微生物生長，但實際上，微生物的培養(yǎng)是一個非常復雜的問題，有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長繁殖，因此，能夠在選擇培養(yǎng)基上生長的不一定都是目的菌株?？枷?|微生物選擇培養(yǎng)方法的辨析3．(2022·江蘇卷)下列是某同學分離高產(chǎn)脲酶菌的實驗設計，不合理的是()A．選擇農(nóng)田或公園土壤作為樣品分離目的菌株B．在選擇培養(yǎng)基中需添加尿素作為唯一氮源C．適當稀釋樣品是為了在平板上形成單菌落D．可分解酚紅指示劑使其褪色的菌株是產(chǎn)脲酶菌D解析：農(nóng)田或公園土壤中含有較多的含脲酶的微生物，A正確；為了篩選可分解尿素的細菌，配制的培養(yǎng)基應選擇尿素作為唯一氮源，含脲酶的微生物在該培養(yǎng)基上能生長，B正確；當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，C正確；在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高，酚紅指示劑將變紅，因此在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，能對分離的菌種做進一步鑒定，D錯誤。4．(2022·全國乙卷)化合物S被廣泛應用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)。用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關系密切。為此，某小組通過實驗比較不同碳源對菌體生長和S產(chǎn)量的影響，結果見表。碳源細胞干重/(g·L-1)S產(chǎn)量/(g·L-1)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18回答下列問題：(1)通常在實驗室培養(yǎng)微生物時，需要對所需的玻璃器皿進行滅菌，滅菌的方法有_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2點即可)。(2)由實驗結果可知，菌株C生長的最適碳源是______________；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是____________。菌株C的生長除需要碳源外，還需要____________________(答出2點即可)等營養(yǎng)物質(zhì)。(3)由實驗結果可知，碳源為淀粉時菌株C不能生長，其原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)若以制糖廢液作為碳源，為進一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學進行了相關實驗。請簡要寫出實驗思路：_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實現(xiàn)廢物利用，其意義是__________(答出1點即可)。解析：(1)通常在實驗室培養(yǎng)微生物時，為防止實驗用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培養(yǎng)物，需要使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細胞、芽孢和孢子，即對所需的玻璃器皿進行滅菌，玻璃器皿常用的滅菌方法有干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等。(2)由實驗結果可知，以葡萄糖為碳源時菌株C的細胞干重最大，說明最適于菌株C生長的碳源是葡萄糖；而以制糖廢液為碳源時，用菌株C生產(chǎn)S的產(chǎn)量高于以葡萄糖為碳源時的產(chǎn)量，說明最適于生產(chǎn)S的碳源是制糖廢液。微生物的生長一般都需要水、碳源、氮源和無機鹽，還需要滿足微生物生長對pH、氧氣以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求，故菌株C的生長除需要碳源外，還需要氮源、無機鹽、水等營養(yǎng)物質(zhì)。(3)分析題中表格可以看出，在以淀粉為碳源的培養(yǎng)基中，菌株C不能生長，原因可能是菌株C中缺少分解淀粉的酶，不能利用淀粉。(4)若以制糖廢液作為碳源，為進一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，實驗自變量為制糖廢液的濃度，可分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)菌株C，其他條件相同且適宜，一段時間后，測定并比較不同濃度制糖廢液中S的產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時對應的制糖廢液濃度，即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實現(xiàn)廢物利用，既有利于減少污染、節(jié)省原料，又能降低生產(chǎn)成本。答案：(1)高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌(2)葡萄糖制糖廢液氮源、無機鹽、水(3)不能合成淀粉酶(4)配制等量的一系列不同濃度的制糖廢液分別接種等量的菌株C，其他條件相同且適宜，培養(yǎng)一段時間后，測定不同濃度制糖廢液中S產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時對應的制糖廢液濃度為生產(chǎn)S的最適碳源濃度(5)減少污染、節(jié)省原料、降低生產(chǎn)成本考向3|微生物數(shù)量測定的方法5．土壤中有豐富的微生物，若利用其中某種微生物，則需要進行菌種的分離和純化，過程如下圖。下列相關敘述錯誤的是()A．若目的是篩選分解尿素[CO(NH2)2]的細菌，則尿素可以作為該菌的氮源和碳源B．3號試管的稀釋倍數(shù)為1×104，理論上3號試管的活菌數(shù)應是4號試管的10倍C．4號試管的結果表明每克土壤中的活菌數(shù)約為1.1×108個D．該種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)比活菌的實際數(shù)目少A解析：若目的是篩選分解尿素[CO(NH2)2]的細菌，則尿素可以作為該菌的氮源，不能作為碳源，A錯誤；由樣品稀釋示意圖分析可知，3號試管的稀釋倍數(shù)為1×104倍，3號試管中的活菌數(shù)應是4號試管的10倍，B正確；4號試管進行稀釋涂布平板法計數(shù)的結果表明每克土壤中的菌株數(shù)為(110＋108＋112)÷3×10×105＝1.1×108(個)，C正確；稀釋涂布平板得到的菌落可能是由兩個或多個細菌細胞長成的，故該實驗方法統(tǒng)計得到的結果往往會比實際活菌數(shù)目要低，D正確。6．(2023·廣東汕頭一模)熱纖梭菌是一種能高效降解纖維素的嗜熱厭氧細菌，可分泌一種多酶復合體將纖維素水解為可溶性糖，在農(nóng)林廢棄物的轉(zhuǎn)化利用中具有應用價值。下圖是篩選該菌的過程，相關敘述錯誤的是()A．從牛糞堆的深層取樣比從表層取樣更加合理B．甲、丙都是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基C．用平板乙統(tǒng)計菌落數(shù)可準確反映該菌的真實數(shù)量D．丙中纖維素的殘留量可反映該菌降解纖維素的能力C解析：熱纖梭菌是一種嗜熱厭氧細菌，牛糞堆的深層比表層氧氣含量更低，溫度更高，更適合熱纖梭菌生存，因此從牛糞堆的深層取樣比從表層取樣更加合理，A正確；題圖是篩選能高效降解纖維素的嗜熱厭氧細菌，因此甲、丙都是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，B正確；根據(jù)圖乙中平板上菌落分布均勻可知，其為稀釋涂布平板法接種的菌種，由于當兩個或多個菌體連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落，因此用該方法統(tǒng)計的菌體數(shù)量會比活菌的實際數(shù)量少，C錯誤；熱纖梭菌可分泌一種多酶復合體將纖維素水解為可溶性糖，因此丙中纖維素的殘留量可反映該菌降解纖維素的能力，D正確?！久}動態(tài)】針對人類生產(chǎn)或生活的某一需求，或結合生活或生產(chǎn)實例，考查微生物的營養(yǎng)要求，微生物的消毒與滅菌技術、微生物的選擇培養(yǎng)、微生物分離與計數(shù)的原理及操作過程的分析。呈現(xiàn)形式一般以選擇題為主，難度中檔。1．(2021·山東卷)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍色，乙菌菌落周圍不變色。下列說法錯誤的是()A．甲菌屬于解脂菌B．實驗中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C．可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進行對比D．該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力[思維培養(yǎng)]B解析：根據(jù)題干信息“甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍色”，說明甲菌可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色，因此甲菌屬于解脂菌，A正確；乙菌菌落周圍沒有出現(xiàn)深藍色，說明乙菌不能產(chǎn)生脂肪酶，不能利用脂肪為其供能，但乙菌也可以在培養(yǎng)基上生存，說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B錯誤；可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進行對比，更加直觀，C正確；可以根據(jù)平板中菌落周圍深藍色的面積大小來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力，D正確。[技法總結]選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較項目選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基制備方法培養(yǎng)基中加入或減少某些化學物質(zhì)培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品原理依據(jù)某些微生物對某些物質(zhì)或環(huán)境條件的嗜好或抗性而設計產(chǎn)生特定的顏色或其他變化用途從眾多微生物中分離出所需的微生物鑒別不同種類的微生物2．(2022·廣東卷)研究深海獨特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學號”考察船對南中國?？瓶贾?，中國科學家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進一步研究了其生物學特性?；卮鹣铝袉栴}：(1)研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)，除了稀釋涂布平板法，還可采用________________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以__________為碳源時生長狀況最好。(2)研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測其原因可能是______________________________________(答一點即可)。(3)藻類細胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有___________________________________________________________________________________________________。解析：(1)培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌?？梢圆捎孟♂屚坎计桨宸ɑ蚱桨鍎澗€法，將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)得到單菌落，從而獲得純凈培養(yǎng)物。分析題圖可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細胞數(shù)量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源時生長狀況最好。(2)深海冷泉中可能存在某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質(zhì)才能生存(或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活)，故將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍可能有很多微生物不能被分離篩選出來。(3)擬桿菌為異養(yǎng)生物，作為該生態(tài)系統(tǒng)的分解者，能將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無機物，歸還到無機環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進行。(4)深海冷泉溫度和氧含量均較低，故生活在其中的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，應具有耐低溫、耐低氧的特性，才能高效降解多糖，保證擬桿菌在極端環(huán)境條件下進行正常生命活動。答案：(1)高壓蒸汽滅菌平板劃線纖維素(2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)才能生存(或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活)(3)擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無機物，歸還到無機環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進行(4)耐低溫、耐低氧等(極端環(huán)境耐受性)1．(科學實驗和探究情境)為了分離和純化高效分解石油的細菌，科研人員用被石油污染過的土壤進行如圖A所示的實驗。同學甲進行過程④的操作，其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示。下列敘述錯誤的是()A．步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源B．步驟⑤振蕩培養(yǎng)的目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時使菌體與培養(yǎng)液充分接觸C．圖B培養(yǎng)基的結果可能是由于涂布不均勻造成的D．步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是篩選出能分解石油的細菌D解析：該實驗的目的是為了分離和純化高效分解石油的細菌，因此步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分相比，最大的區(qū)別是石油是唯一碳源，A正確；步驟⑤需要振蕩培養(yǎng)，原因是提高培養(yǎng)液中(溶解)氧的含量，通過振蕩可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，B正確；圖B采用的接種方法是稀釋涂布平板法，出現(xiàn)圖B結果(菌落分布不均勻)可能的操作是涂布不均勻，C正確；步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最強的細菌，D錯誤。2．(生活、學習和實踐情境)塑料(聚乙烯)在自然界中很難降解，俗稱“白色污染”，某大學教授偶然發(fā)現(xiàn)裝米的塑料袋上有許多孔洞，還有黃粉蟲幼蟲和成蟲爬出。帶著這些疑問，他對黃粉蟲幼蟲消化道的微生物進行分離，在幼蟲腸道中成功分離出塑料降解菌——微小桿菌YT2。下列有關敘述錯誤的是()A．要觀察塑料降解菌的菌落，需用固體培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)B．實驗室分離塑料降解菌時應在培養(yǎng)基中加入葡萄糖作為碳源C．采用平板劃線法分離微小桿菌YT2時，劃線時總是從上一次劃線的末端開始劃線D．若殺死微小桿菌YT2，黃粉蟲無法消化塑料，推測該菌和黃粉蟲幼蟲的種間關系是互利共生B解析：固體培養(yǎng)基上能長出菌落，要觀察塑料降解菌的菌落，需用固體培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，A正確；實驗室分離塑料降解菌時應在培養(yǎng)基中加入塑料作為唯一碳源，B錯誤；采用平板劃線法分離微小桿菌YT2時，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是將聚集的微生物逐步稀釋，以便獲得單個菌落，C正確；微小桿菌YT2生活在黃粉蟲的消化道內(nèi)，若殺死微小桿菌YT2，黃粉蟲無法消化塑料，可推測該菌和黃粉蟲幼蟲的種間關系是互利共生，D正確。課時質(zhì)量評價(三十六)(建議用時：40分鐘)一、選擇題：每小題給出的四個選項中只有一個符合題目要求。1．藝術不只存在于紙筆之間，我們可以用培養(yǎng)皿當紙，接種環(huán)當筆，各種形態(tài)、顏色的細菌和真菌當顏料，畫出別具風格的作品。如在下列作品培養(yǎng)過程中，白色霉菌帶有毛茸茸的感覺，可描繪大熊貓的皮毛，紅色大腸桿菌可以描繪鵝嘴，假單胞桿菌可以描繪水波。下列說法錯誤的是()A．制備培養(yǎng)基時要經(jīng)過計算→稱量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板等步驟B．圖甲作品培養(yǎng)基的pH需為酸性，圖乙作品培養(yǎng)基的pH則需為中性或微堿性C．使用接種環(huán)接種時，取菌種前和接種后都需將接種環(huán)進行干熱滅菌D．培養(yǎng)成型的作品應低溫保存，以免菌株瘋長影響整體效果C解析：培養(yǎng)基配制過程要經(jīng)過稱量→溶化→滅菌→倒平板，滅菌之前需要調(diào)節(jié)pH到適宜范圍以利于真菌或細菌的繁殖，A正確；不同微生物培養(yǎng)時對pH的要求往往不同，培養(yǎng)真菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，B正確；每次使用接種環(huán)前后都要進行灼燒滅菌，灼燒待冷卻后，才能置于菌液中使用，C錯誤；低溫保存可抑制菌株的生長，以免菌株瘋長影響整體效果，D正確。2．(2022·福建漳州一模)關于下列生產(chǎn)生活實例中生物學原理的分析，錯誤的是()選項生產(chǎn)生活實例生物學原理A不宜食用長時間存放的剩菜剩菜容易滋生細菌，易產(chǎn)生亞硝酸鹽B用巴氏消毒法對牛奶消毒殺死牛奶中全部微生物，且不破壞牛奶中的營養(yǎng)成分CDNA指紋技術用于偵破案件不同人體內(nèi)的DNA所含的脫氧核苷酸序列不同D輪換種植不同農(nóng)作物不同農(nóng)作物對礦質(zhì)元素的吸收具有選擇性B解析：剩菜容易滋生細菌，細菌代謝產(chǎn)生亞硝酸鹽，人體攝入過多亞硝酸鹽不利于健康，A正確；巴氏消毒不能殺死全部微生物，B錯誤；DNA指紋技術的原理是不同人體內(nèi)的DNA所含的脫氧核苷酸序列不同，C正確；不同植物對礦質(zhì)元素的吸收具有選擇性，輪種可以恢復及提高土壤的肥力，D正確。3．巴氏殺菌乳是以生牛(羊)乳為原料，經(jīng)巴氏殺菌等工序制得的液體產(chǎn)品，殺滅了牛奶中有害菌群的同時保存了牛奶的營養(yǎng)物質(zhì)和純正口感。據(jù)國家標準每毫升合格巴氏殺菌乳中細菌總數(shù)不得超過50000個。某興趣小組進行了新鮮牛奶合適的消毒溫度的探究，下列相關實驗操作不合理的是()A．配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基并在121℃、100kPa條件下處理15～30minB．將等量的新鮮牛奶分別置于60℃、70℃、80℃、90℃恒溫水浴鍋中處理30minC．對處理后的牛奶進行梯度稀釋后，利用涂布法接種平板并在37℃下培養(yǎng)24hD．統(tǒng)計培養(yǎng)基上全部菌落數(shù)，以菌落數(shù)最少組的處理溫度作為牛奶最適消毒溫度D解析：配制的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基需使用高壓蒸汽滅菌法滅菌，即在121℃、100kPa條件下處理15～30min，將培養(yǎng)基徹底滅菌，以避免培養(yǎng)基上的微生物影響實驗結果，A正確；新鮮牛奶應使用巴氏消毒法消毒，為了探究新鮮牛奶合適的消毒溫度，可將等量的新鮮牛奶分別置于60℃、70℃、80℃、90℃恒溫水浴鍋中處理30min，并通過檢測不同溫度處理下的牛奶中微生物的數(shù)量進行比較，B正確；若要統(tǒng)計消毒后的牛奶中微生物的數(shù)量，可用稀釋涂布平板法接種，所以可對處理后的牛奶進行梯度稀釋后，利用涂布法接種平板并在37℃下培養(yǎng)24h，C正確；由于溫度過高會破壞牛奶中的營養(yǎng)成分，所以菌落數(shù)最少的組對應的溫度不一定是最適的消毒溫度，因為還需要考慮牛奶的營養(yǎng)價值不被破壞，D錯誤。4．(2023·山東濰坊模擬)某興趣小組為研究“使用公筷對餐后菜品細菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤，一盤取樣冷藏，一盤使用公筷，一盤不用公筷，實驗過程如下圖。下列相關操作或敘述正確的是()A．配制培養(yǎng)基X并在121℃、100kPa條件下處理15～30minB．固體培養(yǎng)基X對菜品中的細菌有選擇性C．在固體培養(yǎng)基X上可用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種細菌D．根據(jù)菌落的特征可以準確判斷細菌的種類A解析：配制好的培養(yǎng)基需要采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，即在121℃、100kPa條件下處理15～30min，A正確；固體培養(yǎng)基沒有做任何處理，所以對菜品中的細菌沒有選擇性，B錯誤；據(jù)題意可知，在固體培養(yǎng)基X上接種后還需進行計數(shù)，故只能用稀釋涂布平板法接種而不能用平板劃線法，C錯誤；在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征，可以初步區(qū)分出不同種微生物，但不能準確判斷，D錯誤。5．(2022·山東日照三模)金黃色葡萄球菌(可產(chǎn)生色素使菌落呈金黃色)可以產(chǎn)生溶血素，因而在血瓊脂平板(加入了脫纖維羊血)上生長時，菌落周圍會出現(xiàn)透明溶血環(huán)。金黃色葡萄球菌對高鹽環(huán)境有一定耐受能力。下列敘述正確的是()A．血瓊脂平板配制時需要在加入血液后進行高壓蒸汽滅菌B．在平板中加入脫纖維羊血的目的是為該菌的生長提供碳源和氮源C．培養(yǎng)基中加入較高濃度的NaCl溶液有利于對金黃色葡萄球菌的篩選D．無法在血瓊脂平板上區(qū)分金黃色葡萄球菌和也能形成溶血環(huán)的溶血性鏈球菌C解析：高壓蒸汽滅菌會破壞脫纖維羊血，添加脫纖維羊血需在高壓蒸汽滅菌后，A錯誤；在平板中加入脫纖維羊血的目的是通過觀察在金黃色葡萄球菌菌落周圍是否出現(xiàn)透明溶血環(huán)，從而檢測菌落是否是金黃色葡萄球菌，B錯誤；由于金黃色葡萄球菌具有高度耐鹽性，較高濃度NaCl不影響金黃色葡萄球菌的生長，但是能抑制其他菌的生長，因此，金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基中加入較高濃度NaCl溶液有利于對金黃色葡萄球菌的篩選，C正確；可以根據(jù)菌落的特征，如菌落的形狀、大小、隆起程度、顏色區(qū)分金黃色葡萄球菌和溶血性鏈球菌，D錯誤。6．土壤中的溶磷菌能夠把難溶態(tài)的磷轉(zhuǎn)化為可被植物直接利用的可溶性磷，從土壤中篩選出溶磷能力強的溶磷菌制成菌肥，有利于植物對磷元素的吸收。下列有關操作和分析錯誤的是()A．土壤取樣、稱取土壤、稀釋樣品都在酒精燈火焰旁進行B．需要用含難溶態(tài)磷的固體培養(yǎng)基進行目的菌株的分離C．推測難溶態(tài)磷的分解可能與溶磷菌分泌的代謝產(chǎn)物有關D．實驗組與對照組可溶性磷含量差值最大的菌株適合制成菌肥A解析：土壤是土壤微生物的培養(yǎng)基，土壤取樣時不需要在酒精燈火焰旁操作，A錯誤；分離菌株需用固態(tài)的選擇培養(yǎng)基，土壤中的溶磷菌能夠把難溶態(tài)的磷轉(zhuǎn)化為可被植物直接利用的可溶性磷，而其他微生物不能在此環(huán)境中生長，所以要用含難溶態(tài)磷的固體培養(yǎng)基進行目的菌株的分離，B正確；土壤中的溶磷菌能夠把難溶態(tài)的磷轉(zhuǎn)化為可被植物直接利用的可溶性磷，說明難溶態(tài)磷的分解可能與溶磷菌分泌的代謝產(chǎn)物有關，C正確；實驗組與對照組可溶性磷含量差值最大說明菌株把難溶態(tài)的磷轉(zhuǎn)化為可被植物直接利用的可溶性磷的能力較強，適合制成菌肥，D正確。7．菜籽粕含有35%～45%的蛋白質(zhì)，是畜禽飼料的重要原料，但其中的單寧等抗營養(yǎng)因子限制了菜籽粕的應用。研究者將不同菌種接種到菜籽粕與麩皮制成的固體培養(yǎng)基中發(fā)酵48h，測定菜籽粕中單寧的含量，結果如下圖。下列相關敘述錯誤的是()A．菜籽粕與麩皮為微生物提供碳源和氮源B．接種后需對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌C．黑曲霉菌對單寧的去除效果最為理想D．對照組為不接種微生物的固體培養(yǎng)基B解析：菜籽粕含有35%～45%的蛋白質(zhì)，麩皮富含纖維素，菜籽粕與麩皮可為微生物提供碳源和氮源，A正確；對培養(yǎng)基滅菌應在接種前，接種后再滅菌，菌種將被全部殺死，B錯誤；據(jù)圖可知，與對照組相比，黑曲霉菌發(fā)酵菜籽粕中單寧含量最低，說明黑曲霉菌對單寧的去除效果最為理想，C正確；對照組為不接種微生物的固體培養(yǎng)基，目的是作為對照，說明微生物去除單寧的作用，D正確。8．(2023·廣東深圳模擬)金黃色葡萄球菌是一種耐高鹽的食源性致病微生物。哥倫比亞血平板是含無菌脫纖維羊血等成分的固體培養(yǎng)基，生長在該培養(yǎng)基上的金黃色葡萄球菌菌落能破壞其周圍的紅細胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。下圖為檢測某種飲料是否被金黃色葡萄球菌污染的操作流程，據(jù)此分析不正確的是()A．7.5%的NaCl肉湯培養(yǎng)基從功能角度劃分屬于選擇培養(yǎng)基B．振蕩培養(yǎng)后培養(yǎng)基變渾濁是耐高鹽的微生物數(shù)量增多所致C．若最終長出的菌落周圍出現(xiàn)透明的溶血圈，則說明該飲料被金黃色葡萄球菌污染D．若取菌種后的接種方法為稀釋涂布平板法，則可對待測飲料中金黃色葡萄球菌計數(shù)D解析：金黃色葡萄球菌是一種耐高鹽的食源性致病微生物，因此7.5%的NaCl肉湯培養(yǎng)基從功能角度劃分屬于選擇培養(yǎng)基，A正確；7.5%的NaCl肉湯培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)后培養(yǎng)基變渾濁是由于耐高鹽的微生物數(shù)量增多所致，B正確；金黃色葡萄球菌可破壞菌落周圍的紅細胞，產(chǎn)生透明的溶血圈，若最終長出的菌落周圍出現(xiàn)透明的溶血圈，則說明該飲料被金黃色葡萄球菌污染，C正確；因為接種的菌種經(jīng)7.5%的NaCl肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)過，因此用稀釋涂布平板法也不能對待測飲料中金黃色葡萄球菌進行計數(shù)，D錯誤。9．有機磷農(nóng)藥(如對硫磷，俗稱1605)一般都具有很強的毒性，且結構穩(wěn)定，難以清除，易在土壤、果蔬中殘留，會對人體造成潛在的危害。為了獲得高效降解有機磷農(nóng)藥的微生物，研究人員設計了下圖所示的實驗方案。下列有關敘述正確的是()A．選取的土壤樣品需進行滅菌處理B．該方案中的CNFM是選擇培養(yǎng)基C．平板培養(yǎng)的目的是為了加速微生物生長D．根據(jù)檢測結果，選出對硫磷濃度最低的錐形瓶內(nèi)的微生物D解析：本實驗是要從土壤樣品中獲得能降解有機磷農(nóng)藥的微生物，土壤樣品不需要滅菌，如果滅菌樣品中可能就沒有微生物了，A錯誤；該方案中的CNFM只含生長因子、無機鹽和水，不屬于培養(yǎng)基，B錯誤；平板培養(yǎng)的目的是為了篩選和分離微生物，C錯誤；對硫磷濃度越低，說明分解越多，說明降解有機磷農(nóng)藥的微生物最多，根據(jù)檢測結果，選出對硫磷濃度最低的錐形瓶內(nèi)的微生物，D正確。10．一次性口罩的主要成分為聚丙烯纖維(PP)，某科研團隊準備從土壤中篩選出高效降解一次性口罩的細菌。圖甲表示PP分解菌分離與計數(shù)的過程，6號試管涂布的三個平板的菌落數(shù)為550、601、688；7號試管涂布的三個平板的菌落數(shù)為58、73、97；8號試管涂布的三個平板的菌落數(shù)為8、15、28。圖乙表示在培養(yǎng)基中加入能與PP結合而顯色的染色劑，目的菌落周圍出現(xiàn)透明圈的情況。下列說法錯誤的是()A．圖甲、圖乙所用培養(yǎng)基分別為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，都以PP作為唯一碳源B．圖甲、圖乙所用接種方法分別為稀釋涂布平板法和平板劃線法，都需在酒精燈火焰旁進行C．1g土壤樣品中含有PP分解菌的估算數(shù)目是7.6×1010個，此數(shù)值一般偏小D．可選擇圖乙培養(yǎng)基中D/d比值大的PP分解菌作為目的菌種推廣使用B解析：圖甲是篩選PP分解菌的過程，培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，圖乙表示在培養(yǎng)基中加入能與PP結合而顯色的染色劑，鑒別PP分解菌的過程，所以圖乙所用培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，都以PP為唯一碳源，A正確；圖甲、圖乙所用接種方法都為稀釋涂布平板法，都需在酒精燈火焰旁進行，B錯誤；由于平板計數(shù)范圍為30～300，故取7號試管中的菌落數(shù)，7號試管的稀釋倍數(shù)為1×108，則1g土壤樣品中含有PP分解菌的估算數(shù)目是[(58＋73＋97)÷3]÷0.1×108＝7.6×1010(個)，此數(shù)值一般偏小，因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，C正確；可選擇圖乙培養(yǎng)基中D/d較大的菌株，因為這一指標越大說明單個菌株分解PP的能力越強，所以可作為目的菌種推廣使用，D正確。二、非選擇題11．為獲得高效產(chǎn)酸的醋酸菌用于果醋制作，某興趣小組以蘋果皮為材料，進行實驗，實驗流程如下，回答下列相關問題。培養(yǎng)基：米曲汁乙醇碳酸鈣培養(yǎng)基——米曲汁1000mL，CaCO310g，95%乙醇30mL(滅菌后加入)。在該培養(yǎng)基上，醋酸菌菌落周圍會形成透明圈。(1)微生物的培養(yǎng)、分離必須嚴格無菌操作處理，培養(yǎng)基無菌處理的方法是________________，培養(yǎng)皿、錐形瓶的無菌處理方法是______________，上述______________不能進行無菌處理。(2)①過程通常需在________℃進行________(填“靜置”或“振蕩”)培養(yǎng)，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________