冬蟲夏草抗炎作用的電鏡觀察

冬蟲夏草抗炎作用的電鏡觀察

據(jù)報道，佛法對大鼠耳部炎、大鼠血清足腫脹和棉球骨腫的抗炎作用明顯。在這項工作中，我們還分析了牧草抗炎作用的機制。結(jié)果如下。實驗動物及方法冬蟲夏草為青海省玉樹州昂久縣出產(chǎn),用蒸餾水80℃±2℃提取2次,再煮沸提取一次,合并3次濾液,減壓過濾,在80℃下濃縮至1g/ml。瑞士種小鼠體重29—30g,雄性,36只隨機分成兩組,蟲草組按10g/kg灌胄,每天一次,連續(xù)7天,對照組給同體積蒸餾水,第8天取血,分離血漿供測定血漿皮質(zhì)醇與醛固酮。HilltopSprague-Dowley大鼠(簡稱SD大鼠)購自上海醫(yī)科大學實驗動物中心,體重253—297g,雄性,14只隨機分成兩組,蟲草組按3.0g/kg皮下注射,每天一次,連續(xù)9天,對照組給同體積生理鹽水,第10天股動脈放血,處死動物,取出腎上腺稱重,右側(cè)腎上腺供作組織學檢查、電鏡標本制備,左側(cè)腎上腺供腎上腺內(nèi)膽固醇含量測定(改良Zak法)。血漿皮質(zhì)醇與醛固酮用北京化工廠放射免疫測定藥盒按放射免疫法測定,透射電鏡標本按前文方法制備,在JEM—200CX透射電鏡下觀察攝片。為了比較激素合成運轉(zhuǎn)及分泌有關(guān)的脂滴、線粒體的體積改變,本實驗采用立體計量分析法,即將有規(guī)則的點、格(我們采用正方形的格子)疊加在束狀帶皮質(zhì)細胞的電鏡照片上,計數(shù)落在線粒體上的點數(shù)(Pm)和落在細胞質(zhì)上的總點數(shù)(Pc),最后按下列公式計算出細胞質(zhì)內(nèi)線粒體的體積密度Vm,。重復適當數(shù)量的電鏡照片,即可獲得比較真實的體積密度.用于實驗的照片,實驗組20張,對照組14張,用此法分別計算出線粒體的體積密度Vm和脂滴的體積密度V1。結(jié)果一、冬季生長對腎上腺重量和腎上腺膽固醇含量的影響實驗表明冬蟲夏草組動物的腎上腺重量及腎上腺內(nèi)膽固醇含量均較對照組明顯增加(表1)。二、干預昆蟲血漿皮質(zhì)醇和氯仿的含量實驗結(jié)果表明冬蟲夏草能使小鼠血漿皮質(zhì)醇、醛固酮含量明顯升高(表2)。三、核型細胞的發(fā)育對照組腎上腺體積較小,外有結(jié)締組織被膜,腎上腺由皮質(zhì)和髓質(zhì)兩部分構(gòu)成,皮質(zhì)厚度約550-720um,可分為三個帶:球狀帶、束狀帶和網(wǎng)狀帶。球狀帶較薄,細胞較小,呈球狀團塊排列,腺細胞核染色深,胞質(zhì)略呈嗜酸性,其中含少量脂滴。束狀帶系由多邊形細胞排列成行狀,有時可見雙核細胞,胞質(zhì)呈泡沫樣,內(nèi)含較多的脂滴。網(wǎng)狀帶細胞交叉吻合成網(wǎng)狀,可見明暗兩種細胞。冬蟲夏草組的腎上腺體積較大,腎上腺皮質(zhì)厚度較對照組增厚,約650—820um,其中以束狀帶增厚較為明顯,不僅細胞層增多,且細胞體積也較大,胞質(zhì)內(nèi)含有較多的脂滴,球狀帶和網(wǎng)狀帶也有輕度增厚。四、細胞吐el1.球狀帶:對照組球狀帶寬約50—70um,由不規(guī)則排列的細胞組成,細胞聚集成團,體積小呈低柱狀或多角形,胞核呈圓形或卵圓形,密度深,細胞表面微絨毛稀疏短小,細胞質(zhì)內(nèi)充滿線粒體、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、少量球形脂滴、高爾基復合體和核蛋白體。線粒體為卵園形或長桿狀,嵴呈管狀,系線粒體內(nèi)膜向內(nèi)的指狀突起。與其長軸相垂直,基質(zhì)致密。常見線粒體環(huán)繞大形脂滴周圍,兩者隔以狹縫。脂滴為卵圓形,由40埃厚的單膜所包圍,大小不等,密度不一。光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈泡狀或扁平短囊,分散在胞質(zhì)中。冬蟲夏草組球狀帶寬約70—90um,細胞數(shù)量和體積均較對照組增多、增大,細胞表面有較多的扁而短的微絨毛,胞質(zhì)內(nèi)線粒體、脂滴及光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)均較對照組豐富。2.束狀帶:對照組束狀帶寬約400—500um,細胞為多角形,比球狀帶細胞大,其微細結(jié)構(gòu)與球狀帶細胞相似,唯線粒體數(shù)量較多,線粒體嵴呈小泡狀,切面上可見圓形小泡漂浮在線粒體基質(zhì)內(nèi)。光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較多,常在線粒體和脂滴周圍排列成層,在切經(jīng)細胞中部的平面上約有40—60個脂滴。冬蟲夏草組束狀帶寬約520—640um,細胞數(shù)量和體積較對照組為多、增大,線粒體數(shù)量多且擴大,脂滴增多,光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜泡豐富,溶酶體密集,光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與脂滴緊密相貼。3.網(wǎng)狀帶:對照組網(wǎng)狀帶寬約100—150um,細胞體積較束狀帶細胞小。外形不規(guī)則,呈多邊形,核小,線粒體細長,嵴的形狀多變,呈小管狀或小泡狀。光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)以網(wǎng)狀帶最豐富,分布形式與束狀帶相似。脂滴數(shù)目少而恒定,密度較大,溶酶體較多,有單位膜包圍,形狀不規(guī)則,內(nèi)有異質(zhì)性物質(zhì),糖原豐富。冬蟲夏草組網(wǎng)狀帶寬約120—170nm,細胞體積較對照組大,線粒體、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、脂滴數(shù)量均較對照組增多。4.細胞分泌物的排出:皮質(zhì)激素最終在線粒體合成而分泌,沿胞膜下排列的線粒體,可見基質(zhì)內(nèi)邊緣小泡突出,伸入胞質(zhì),最后脫離線粒體形成密度較淺的球形分泌小泡,小泡聚集于胞膜下,逐漸向游離面移行,小泡界膜與胞膜相接、融合、破裂,分泌物排入細胞間隙,此即胞吐方式。此外,分泌小泡內(nèi)容物還可以擴散方式滲透入胞質(zhì)。激素合成的條件一般認為在腎上腺皮質(zhì)細胞內(nèi),脂滴、線粒體、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與類固醇激素的生物合成有密切關(guān)系。脂滴內(nèi)含有激素的前身物——80%膽固醇酯和20%游離膽固醇,脂滴內(nèi)膽固醇酯經(jīng)光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)酯酶水解后,輸入線粒體,受分裂酶作用轉(zhuǎn)化為妊烯醇酮,最終在線粒體合成皮質(zhì)酮及醛固酮。從本文研究可看出:首先,冬蟲夏草能明顯增加腎上腺的重量和腎上腺內(nèi)的膽固醇含量,這為合成皮質(zhì)激素提供了充分的原料和前提物。其次,從腎上腺皮質(zhì)超微結(jié)構(gòu)的形態(tài)和位置觀察發(fā)現(xiàn),冬蟲夏草組束狀帶明顯增寬,細胞數(shù)量增多,細胞體積增大,胞漿中線粒體、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及脂滴明顯增加,表明有利于皮質(zhì)激素合成,同時還見到線粒體、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)直接與脂滴貼近,提示它們皆參與激素合成過程,并主要以胞吐方式將激