臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢

臨床微生物標(biāo)本

的采集與送檢1整理課件主要內(nèi)容1、標(biāo)本采集的意義和原那么2、標(biāo)本的運(yùn)送與拒收原那么3、各種標(biāo)本的采集血液、骨髓標(biāo)本尿液糞便痰及上呼吸道標(biāo)本穿刺液標(biāo)本〔腦脊液、膽汁、胸腹水等〕膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本2整理課件標(biāo)本采集是指采集患者體內(nèi)的一小局部血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細(xì)胞等標(biāo)本進(jìn)行檢驗，以反映機(jī)體正常的生理現(xiàn)象和病理改變。

標(biāo)本采集3整理課件

標(biāo)本采集60%以上的實驗誤差發(fā)生在分析前！標(biāo)本采集正確與否與檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性有密切的關(guān)系!因此，我們應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法。4整理課件標(biāo)本采集的意義正確的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提5整理課件掌握正確的標(biāo)本采集方法

為保證標(biāo)本的質(zhì)量，獲得陽性結(jié)果，應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法、采集量和采集時間并應(yīng)及時送檢，特殊標(biāo)本還需注明采集時間。6整理課件根本原那么1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.混有正常菌群標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)6.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。7.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康?整理課件標(biāo)本的運(yùn)送原那么1、所有的標(biāo)本都必須立即送往實驗室，最好在2h內(nèi),保存時間不應(yīng)超過24h.2、最正確的臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本的量.量少的標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.3、對環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌〔對低溫敏感〕應(yīng)立即處理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本。8整理課件標(biāo)本的拒收原那么無標(biāo)簽、無檢驗單不檢測，并與送檢的醫(yī)生和護(hù)士聯(lián)系。送檢延誤不接收，提醒送檢者，要求重新采集。送檢容器不當(dāng)或滲漏不接收，告知送檢者，要求重新采集。標(biāo)本不符合要求不接收，聯(lián)系送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗要求的標(biāo)本.9整理課件臨床微生物檢驗常見標(biāo)本血液、骨髓標(biāo)本尿液糞便痰及上呼吸道標(biāo)本穿刺液標(biāo)本〔腦脊液、膽汁、胸腹水等〕膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本10整理課件一、血培養(yǎng)標(biāo)本采集11整理課件血培養(yǎng)送檢指征病人出現(xiàn)以下臨床表現(xiàn)，或同時具備以下幾種臨床表現(xiàn)時應(yīng)采集血培養(yǎng)。1、發(fā)熱〔≥38℃〕或低溫〔≤36℃〕2、寒戰(zhàn)3、白細(xì)胞增多〔＞10×109/L，特別有“核左移〞時〕4、粒細(xì)胞減少〔成熟的多形核白細(xì)胞＜1×109/L〕5、血小板減少6、皮膚、粘膜出血7、昏迷8、多器官衰竭9、血壓降低10、呼吸加快11、特殊情況：可疑新生兒敗血癥時，除發(fā)熱或低溫外，很少培養(yǎng)出細(xì)菌，應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。12整理課件血培養(yǎng)采集須知應(yīng)在抗生素應(yīng)用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗生素，應(yīng)于下次抗生素應(yīng)用前采集！對疑心菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。必須同時或間隔短時間內(nèi)采集２套以上血培養(yǎng)標(biāo)本。13整理課件血培養(yǎng)采集容器法國梅里埃公司血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)瓶或安圖公司血培養(yǎng)瓶14整理課件血培養(yǎng)標(biāo)本采集方法1、皮膚消毒2、培養(yǎng)瓶消毒：(1)用75％酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。(2)酒精作用60s。(3)在血液注入血培養(yǎng)瓶之前，用無菌紗布或棉簽去除橡皮塞子外表剩余的酒精，然后注入血液。3、血液注入血培養(yǎng)瓶中，輕輕顛倒混勻，以防血液凝固。15整理課件血培養(yǎng)采集次數(shù)成年患者：推薦同時采集２－３套〔不同部位〕血培養(yǎng)標(biāo)本〔即雙瓶雙臂同時采集血培養(yǎng)標(biāo)本〕。嬰幼兒患者：推薦同時采集２次〔不同部位〕血培養(yǎng)標(biāo)本。原因：血培養(yǎng)做1套的檢出率為65%。做2套和3套檢出率的檢出率分別為80%和90%。單瓶的血培養(yǎng)檢出率不高，而且結(jié)果很難臨床解釋。在采取血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。兩個例外：細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和金黃色葡萄球菌菌血癥。16整理課件血培養(yǎng)采血量成年患者：推薦采血量每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者：兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml，推薦采血量每瓶不少于2ml?！采儆诓∪丝傃萘康?%〕17整理課件本卷須知1、嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗結(jié)果。〔最好在對側(cè)采集〕2、假設(shè)同時抽取幾個工程的血標(biāo)本，一般注入容器的順序為：血培養(yǎng)瓶→抗凝管→枯燥試管.動作要迅速準(zhǔn)確，防止溶血。注入標(biāo)本后的血培養(yǎng)瓶務(wù)必立即送至檢驗科細(xì)菌室3、每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保存〔15-30℃〕，切勿放冰箱保存。18整理課件骨髓標(biāo)本的微生物學(xué)檢查

采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標(biāo)本。

采集時間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期

當(dāng)骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng)

19整理課件二、尿液標(biāo)本的采集

20整理課件尿液標(biāo)本的送檢指征1有典型的尿路感染病癥；2肉眼膿尿或血尿；3尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細(xì)胞和/或亞硝酸鹽陽性；4不明原因的發(fā)熱，無其他局部病癥；5留置導(dǎo)尿管的病人出現(xiàn)發(fā)熱；6膀胱排空功能受損；7泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。21整理課件尿液標(biāo)本采集容器無菌試管或無菌尿液標(biāo)本留取容器22整理課件尿液標(biāo)本采集方法1、清潔中段尿標(biāo)本，囑咐患者睡前少飲水，清晨起床后用肥皂水清洗會陰部，女性應(yīng)用手分開大陰唇，男性應(yīng)翻上包皮，仔細(xì)清洗，再用清水沖洗尿道口周圍，開始排尿，將前段尿排去，插入性接取中段尿約10ml于無菌容器中，立即送檢，于一小時內(nèi)接種。該方法簡單、易行，是最常用的尿培養(yǎng)標(biāo)本收集方法，但很容易受到會陰部細(xì)菌污染，應(yīng)由醫(yī)護(hù)人員采集或在醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)下由患者正確留取。23整理課件尿液標(biāo)本采集方法2、恥骨上膀胱穿刺：使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮穿入膀胱吸取尿液，是評估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)〞方法，但有一定的痛苦，病人難以接受。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集24整理課件尿液標(biāo)本采集方法3、直接導(dǎo)尿：按常規(guī)方法對會陰部進(jìn)行清洗消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液?？蓽p少尿液標(biāo)本的污染，準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道的細(xì)菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。

25整理課件尿液標(biāo)本采集方法4、小兒收集包：對于無控制能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液，這種裝置由于很難防止會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗結(jié)果為陰性時才有意義。如果檢驗結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行分析，必要時可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M(jìn)行復(fù)查。26整理課件尿液標(biāo)本采集方法5、留置導(dǎo)尿管收集尿液：利用留置導(dǎo)尿管采集標(biāo)本時，應(yīng)先消毒導(dǎo)尿管外部，按無菌操作方法用注射器穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液，操作時應(yīng)防止混入消毒劑，不能從收集袋中采集尿液。長期留置導(dǎo)尿患者，應(yīng)在更換新尿管時留取尿標(biāo)本。

27整理課件本卷須知嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，因為尿液標(biāo)本的采集和培養(yǎng)中最大的問題是污染雜菌

通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢

多數(shù)藥物均通過尿液排泄，因此采集尿液應(yīng)在用藥前進(jìn)行

28整理課件三、糞便標(biāo)本的采集

29整理課件糞便標(biāo)本的送檢指征1急性腹瀉：大便次數(shù)明顯增多，腹痛，里急后重，往往伴有發(fā)熱，大便性狀為粘液便或膿血便。2慢性腹瀉：大便次數(shù)多，多為稀便，伴有全身乏力等病癥。3無痛性大量水樣便或米泔樣稀便。4先吐后瀉：惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。有集體發(fā)病史，多為細(xì)菌性食物中毒所致。5抗生素治療后腹瀉：常發(fā)生于長期抗生素治療后，糊狀便，排便次數(shù)增加。6高熱驚厥：通常為中毒性痢疾，多見于嬰幼兒和小兒。30整理課件糞便標(biāo)本的采集容器一次性無菌便盒

31整理課件糞便標(biāo)本采集時間1．采樣原那么腹瀉病人應(yīng)在急性期采集〔3天以內(nèi)〕，以提高檢出率，亦最好在用藥之前。2．沙門菌感染腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便32整理課件糞便標(biāo)本采集方法

自然排便采集法自然排便后，挑取其膿血、粘液局部2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保存液中送檢直腸拭子方法如不易獲得糞便時，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤后，插入肛門內(nèi)4-5cm〔幼兒2-3cm〕輕輕轉(zhuǎn)動取出，插入無菌試管內(nèi)送檢。33整理課件本卷須知雖糞便含有多種雜菌，但應(yīng)盡量采用無菌容器〔一次性無菌平皿〕。為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、粘液局部。34整理課件四、痰及上呼吸道標(biāo)本的采集

35整理課件痰標(biāo)本送檢指征1咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。

2咯血：肺結(jié)核病人常痰中帶血。

3呼吸困難4發(fā)熱5胸痛：當(dāng)炎癥病變累及壁層胸膜時，會發(fā)生胸痛。*肺部感染的患者有25～50％可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時作血培養(yǎng)。36整理課件上呼吸道標(biāo)本送檢指征1病毒性普通感冒伴有明顯咽痛時，疑心為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細(xì)菌培養(yǎng)。2細(xì)菌性咽－扁桃體炎：明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱，體溫可達(dá)39℃以上。3上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管－支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。37整理課件痰標(biāo)本和上呼吸道標(biāo)本采集容器一次性無菌留痰盒咽拭子或鼻咽拭子38整理課件痰及上呼吸道標(biāo)本采集時間痰：一般以晨痰為好；支氣管擴(kuò)張癥患者，清晨起床后進(jìn)行體位引流，可采集大量痰標(biāo)本。咽拭標(biāo)本：時間上雖無嚴(yán)格限制，但應(yīng)于抗菌藥物治療前為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜

39整理課件痰標(biāo)本采集方法：

自然咳痰法：患者清晨起床后，先用漱口水漱口，再以開水或生理鹽水漱口，以減少口腔常居菌群的污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內(nèi)送檢

小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢

40整理課件上呼吸道標(biāo)本〔咽拭子〕采集方法：采集上呼吸道標(biāo)本通常采用無菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開水或生理鹽水反復(fù)漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要防止接觸口腔和舌粘膜41整理課件本卷須知1．

采集標(biāo)本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。2．

做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標(biāo)本假設(shè)不能及時送檢，應(yīng)放4℃冰箱保存，以免雜菌生長。3．

作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時痰液，以提高陽性檢出率。42整理課件五、穿刺液標(biāo)本43整理課件穿刺液標(biāo)本

采集時間：當(dāng)疑心感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，一般在患者使用抗菌藥物之前或停止用藥后1-2日采集采集容器：無菌容器采集方法：采用無菌方法用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位的液體，注入無菌試管立即送檢44整理課件本卷須知：如果用于檢測細(xì)菌，收集腦脊液后，最好能在常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿。腦脊液標(biāo)本不可置冰箱保存，否那么會使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌〔能產(chǎn)生自溶素迅速自溶〕、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。45整理課件本卷須知：如果只采集了一管腦脊液，應(yīng)先送細(xì)菌室做細(xì)菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢查穿刺時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作

作腦脊液培養(yǎng)時，建議同時作血培養(yǎng)

46整理課件本卷須知：為了防止穿刺液的凝固，最好在無菌試管中預(yù)先參加滅菌肝素，再注入穿刺液盡可能采集更多的液體，至少1ml47整理課件六、膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本

48整理課件膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本采集開放性膿腫和膿性分泌物先以無菌鹽水沖洗潰瘍外表，用2支無菌棉拭子拭取潰瘍深處的分泌物后插入無菌試管送檢。一支為涂片檢查用，另一支作培養(yǎng)用大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物用無菌棉拭子取多部位創(chuàng)面的膿液或分泌物，置無菌試管內(nèi)送檢封閉性膿腫消毒局部皮膚或粘膜外表后，用注射器抽取，將膿液注入無菌試管內(nèi)送檢49整理課件本卷須知：不能立即送檢的標(biāo)本，應(yīng)放4℃保存；培養(yǎng)淋球菌、腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本除外

用藥前采集標(biāo)本，嚴(yán)格無菌采樣

50整理課件七、生殖道標(biāo)本51整理課件生殖道標(biāo)本檢驗生殖道標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、結(jié)核菌培養(yǎng)；解脲支原體、沙眼衣原體、淋菌的培養(yǎng)；淋菌涂片；細(xì)菌性陰道病相關(guān)檢測、真菌涂片

52整理課件生殖道標(biāo)本送檢指征1皮膚黏膜損害：原發(fā)損害可有斑疹、丘疹、結(jié)節(jié)、水皰、囊腫、糜爛、潰瘍等。繼發(fā)損害由原發(fā)損害演變而來，有萎縮或斑痕等，患者可出現(xiàn)疼痛或瘙癢病癥。2全身病癥：多數(shù)無全身病癥。偶有發(fā)熱、乏力、食欲不振等。3男性生殖系統(tǒng)表現(xiàn)4女性生殖系統(tǒng)表現(xiàn)5疑為以下疾病時需送檢標(biāo)本：前庭大腺膿腫、外陰陰道念珠菌病、細(xì)菌性陰道病、急性子宮頸炎、急性盆腔炎、急性尿道炎、急性膀胱炎、羊膜腔感染、產(chǎn)褥期感染。53整理課件生殖道標(biāo)本采集容器無菌試管、男性拭子、女性拭子

54整理課件生殖道標(biāo)本采集方法1尿道分泌物①男性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，采取從尿道口溢出的膿性分泌物或用無菌男性拭子插入尿道內(nèi)2～4厘米取出分泌物。如無膿液溢出，可從陰莖的腹面向龜頭方向按摩，促使分泌物溢出。②女性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，然后從陰道內(nèi)診壓迫尿道，或從尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出。無肉眼可見的膿液，可用滅菌拭子輕輕深入前尿道內(nèi)，旋轉(zhuǎn)拭子，采集標(biāo)本。55整理課件生殖道標(biāo)本采集方法2巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后壓迫腺體，使分泌物溢出。3陰道分泌物：用窺器擴(kuò)張陰道，用滅菌女性拭子采取陰道口內(nèi)4厘米內(nèi)側(cè)壁或后穹隆處分泌物培養(yǎng)或涂片鏡檢。4宮頸分泌物：用窺器擴(kuò)張陰道，先用無菌棉球擦取宮頸口分泌物；用女性拭子插入宮頸管2厘米采取分泌物，轉(zhuǎn)動并停留10～20秒鐘，讓拭子充分吸附分泌物，或用去針頭的注射器吸取分泌物，