離心機(jī)的原理和使用

離心機(jī)的原理和使用11/24/20232高速離心機(jī)2高速離心機(jī)1*104g～2.5*104r/min，R.C.F1*104g～105g用途：分離各種沉淀物、細(xì)胞碎片及較大的細(xì)胞器等高速冷凍離心機(jī)11/24/20235超速離心機(jī)2.5*104g～8*104r/min，R.C.F5*105g或更高結(jié)構(gòu)：離心管帽、冷凍裝置和溫控系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、安全保護(hù)系統(tǒng)、制動系統(tǒng)、指示儀表等。按用途分：制備用超速離心機(jī)：分離純化生物大分子、細(xì)胞器和病毒等分析用超速離心機(jī)：測定樣品純度（根據(jù)紫外吸收率或折光率等判斷）、沉降系數(shù)、相對分子量11/24/20236沉降系數(shù)S：單位離心力作用下粒子的沉降速度，以Svedberg表示，簡稱S。1S=1*10-13s11/24/20237沉降系數(shù)S與分子量M有對應(yīng)關(guān)系，測出離心機(jī)轉(zhuǎn)速、離心時(shí)間和粒子移動距離，可求出S，再得到M11/24/20238二離心方法的選擇對于常速和高速離心機(jī)，由于所分離的顆粒大小和密度相差較大，只要選擇好離心速度和時(shí)間，就能達(dá)到分離效果。超速離心的離心方法：差速離心、密度梯度離心和等密度梯度離心

11/24/202391差速離心采用不同的離心速度和離心時(shí)間，使沉降速度不同的顆粒分批分離的方法。主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。11/24/2023102密度梯度離心樣品在密度梯度介質(zhì)中進(jìn)行離心，使沉降系數(shù)比較接近的物質(zhì)得以分離的一種區(qū)帶分離方法。密度梯度系統(tǒng)：梯度介質(zhì)有足夠大的溶解度，不與分離組分反應(yīng)，不會引起分離組分的凝集、變性或失活。常用介質(zhì)：蔗糖、甘油等。樣品鋪在密度梯度溶液表面，離心后形成若干條界面清楚的不連續(xù)區(qū)帶。11/24/20231111/24/2023123等密度離心當(dāng)欲分離的不同顆粒的密度范圍在離心介質(zhì)的密度梯度范圍內(nèi)時(shí)，不同浮力密度的物質(zhì)顆粒在離心力作用下一直移動到與各自浮力密度相等的位置（等密度點(diǎn)），形成區(qū)帶。等密度離心常用的介質(zhì)：銫鹽，如CsCl，Cs2SO4，CsBr11/24/202313三離心條件的確定離心力（轉(zhuǎn)速）離心時(shí)間溫度pH值

真空11/24/202314思考題1名詞解釋離心分離相對離心力沉降系數(shù)2按離心機(jī)轉(zhuǎn)速分，離心機(jī)有哪些種類？各自的適用范圍是什么？3超