病原生物學(xué)與免疫學(xué)課程螺形菌教學(xué)課件

螺形菌授課人：XXX病原生物學(xué)與免疫學(xué)教學(xué)課件目錄/CONTENTS01弧菌屬02空腸彎曲菌03幽門螺桿菌螺形菌（spiralbacterium）是一類菌體彎曲的細(xì)菌，包括弧菌屬、彎曲菌屬和螺桿菌屬。主要致病的有霍亂弧菌、空腸彎曲菌、幽門螺桿菌等。第一節(jié)弧菌屬霍亂弧菌副溶血性弧菌弧菌屬（Vibrio）細(xì)菌是一群短小、彎曲呈弧狀的革蘭氏陰性菌。本菌屬與腸桿菌科的主要不同點(diǎn)是氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性和有一根端生鞭毛?；【鷮?gòu)V泛分布于自然界，以水中最多。主要致病菌有霍亂弧菌和副溶血弧菌，以腸道致病為主，可引起霍亂和食源性疾病，偶爾引起淺部創(chuàng)傷感染。概述霍亂弧菌（V.cholerae）是烈性消化道傳染病——霍亂的病原菌。自1817年以來，曾發(fā)生過7次世界性霍亂大流行。前6次均由霍亂弧菌古典生物型引起，1961年的第7次世界大流行由埃爾托（ElTor）生物型引起。1992年，一個(gè)新的流行株O139（Bengal）在印度和孟加拉灣附近一些國(guó)家的城市出現(xiàn)，并很快在亞洲傳播，這是首次由非O1群霍亂弧菌引起的流行。一、霍亂弧菌（一）生物學(xué)特性1．形態(tài)與染色霍亂弧菌為革蘭氏陰性菌，呈弧狀或逗點(diǎn)狀，經(jīng)人工培養(yǎng)后，易失去弧形而呈桿狀。有端單鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，有菌毛，有些菌株有莢膜，無(wú)芽胞。一、霍亂弧菌（一）生物學(xué)特性2．培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)該菌兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高。耐堿不耐酸，在pH8.8～9.2的堿性蛋白胨水中生長(zhǎng)良好，常用于首次增菌培養(yǎng)?；魜y弧菌過氧化氫酶陽(yáng)性，氧化酶陽(yáng)性，能發(fā)酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇等，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；吲哚反應(yīng)陽(yáng)性，霍亂紅試驗(yàn)陽(yáng)性。一、霍亂弧菌（一）生物學(xué)特性3．抗原構(gòu)造與分型霍亂弧菌有耐熱的O抗原和不耐熱的H抗原。O抗原具有特異性，根據(jù)O抗原可將霍亂弧菌分為155個(gè)血清群，其中O1群和O139群引起霍亂，其余的血清群僅引起人類胃腸炎等疾病。一、霍亂弧菌（一）生物學(xué)特性3．抗原構(gòu)造與分型O1群霍亂弧菌的O抗原由A，B，C三種抗原因子組成，據(jù)此又可將其分為小川型、稻葉型和彥島型三個(gè)血清型。根據(jù)是否溶解羊紅細(xì)胞、凝集雞紅細(xì)胞及對(duì)多黏菌素和噬菌體的敏感性等表型差異，又可將每一個(gè)血清型分為兩個(gè)生物型，即古典生物型和ElTor生物型。一、霍亂弧菌（一）生物學(xué)特性4．抵抗力本菌對(duì)熱、干燥、日光、化學(xué)消毒劑和酸均很敏感，耐低溫，耐堿。100℃煮沸1～2分鐘即死亡；在正常胃酸中僅存活4分鐘；以1∶4漂白粉水溶液處理患者的排泄物或嘔吐物1小時(shí)可達(dá)到消毒目的。ElTor生物型在自然界的生存能力較古典型強(qiáng)，可在河水、井水、海水中存活1～3周，在鮮魚、貝殼類食物上可存活1～2周，對(duì)鏈霉素、氯霉素和四環(huán)素敏感。一、霍亂弧菌1．致病物質(zhì)霍亂弧菌的致病物質(zhì)主要是鞭毛、菌毛和霍亂腸毒素。（1）鞭毛和菌毛病菌經(jīng)胃到達(dá)小腸后，通過活潑的鞭毛運(yùn)動(dòng)，穿過腸黏膜表面黏液層，繼而以菌毛黏附于腸黏膜上皮細(xì)胞表面定居增殖。（二）致病性與免疫性一、霍亂弧菌（2）霍亂腸毒素（choleraicenterotoxin，CE）該毒素由A與B兩個(gè)亞單位組成。一個(gè)完整的CE分子由1個(gè)A亞單位和4～6個(gè)B亞單位構(gòu)成。A亞單位又分為A1與A2兩個(gè)部分，A1是CE的毒性成分。B亞單位能與小腸黏膜上皮細(xì)胞上的神經(jīng)節(jié)苷脂受體結(jié)合，使CE分子變構(gòu)，A亞單位則脫離B亞單位進(jìn)入細(xì)胞膜。A1作用于腺苷酸環(huán)化酶，使細(xì)胞內(nèi)ATP轉(zhuǎn)變?yōu)閏AMP。cAMP水平升高后，促進(jìn)腸黏膜細(xì)胞主動(dòng)分泌Na+、K+、HCO3-和水，造成腸液大量分泌，導(dǎo)致嚴(yán)重的腹瀉和嘔吐。（二）致病性與免疫性一、霍亂弧菌2．所致疾病霍亂的傳染源是患者和帶菌者，主要通過污染的水源或食品經(jīng)消化道感染。在正常胃酸條件下需大量細(xì)菌進(jìn)入方可感染，當(dāng)胃酸低時(shí)，少量細(xì)菌即可感染?；颊弑憩F(xiàn)為劇烈的腹瀉和嘔吐，腹瀉物如米泔水樣，導(dǎo)致機(jī)體脫水、酸堿和電解質(zhì)平衡功能紊亂及微循環(huán)功能障礙，發(fā)生代謝性酸中毒、低容量性休克及腎衰竭，如未及時(shí)治療，死亡率可達(dá)60%。病愈后，一些患者可短期帶菌，一般不超過兩周，少數(shù)ElTor型帶菌者時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)數(shù)月或數(shù)年。一、霍亂弧菌3．免疫性病后可獲得牢固免疫力，主要是體液免疫，包括腸毒素抗體、抗菌抗體和腸道黏膜表面的SIgA的中和作用，再感染者少見。以前感染O1群獲得的免疫對(duì)O139群感染無(wú)交叉免疫。一、霍亂弧菌（三）微生物學(xué)檢查霍亂是烈性傳染病，對(duì)首例患者的病原學(xué)診斷應(yīng)快速、準(zhǔn)確并及時(shí)報(bào)告疫情。取患者米泔水樣糞便或嘔吐物，嚴(yán)密包裝，專人送檢。一、霍亂弧菌（三）微生物學(xué)檢查1．直接鏡檢取標(biāo)本做懸滴法檢查，以觀察是否有魚樣穿梭運(yùn)動(dòng)的弧菌。涂片進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，如發(fā)現(xiàn)魚群狀排列的革蘭氏陰性弧菌，可初步診斷。一、霍亂弧菌（三）微生物學(xué)檢查2．分離培養(yǎng)與鑒定將標(biāo)本接種至堿性蛋白胨水增菌或TCBS選擇培養(yǎng)基上，霍亂弧菌因分解蔗糖呈黃色菌落，挑選可疑菌落進(jìn)行生化和血清學(xué)反應(yīng)進(jìn)行鑒定。此外，也可采用熒光抗體法或SPA協(xié)同試驗(yàn)進(jìn)行診斷。一、霍亂弧菌（四）防治原則加強(qiáng)飲水消毒和食品衛(wèi)生管理、加強(qiáng)檢疫、及時(shí)確診上報(bào)，并嚴(yán)格隔離治療及采取嚴(yán)格消毒措施。傳統(tǒng)的注射用霍亂疫苗因保護(hù)效果差，現(xiàn)已不推薦使用。迄今為止可獲得三種口服霍亂疫苗，它們已顯示是安全的、具有免疫原性和有效的，這些疫苗已在一些國(guó)家獲得許可并且主要用于旅行者。一、霍亂弧菌（四）防治原則及時(shí)補(bǔ)充液體和電解質(zhì)是治療霍亂的關(guān)鍵。使用四環(huán)素、鏈霉素、多西環(huán)素、呋喃唑酮、氯霉素等抗生素可殺死霍亂弧菌，減少外毒素的產(chǎn)生。由于體液療法及抗生素在治療霍亂方面的應(yīng)用，目前，霍亂治愈率較高，死亡率不斷降低。一、霍亂弧菌副溶血性弧菌（V.parahemolyticus）是一種嗜鹽性弧菌，主要存在于海水、海底沉積物及魚、貝等海產(chǎn)品中。該菌是我國(guó)沿海地區(qū)引起食物中毒最常見的病原菌之一。二、副溶血性弧菌（一）生物學(xué)特性本菌革蘭氏染色陰性，呈弧形、桿狀、絲狀及球狀等多種形態(tài)，有單端鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑。其營(yíng)養(yǎng)要求不高，但具有嗜鹽性，生長(zhǎng)最適NaCl濃度為35g/L，無(wú)鹽則不能生長(zhǎng)。該菌生長(zhǎng)所需pH為7.0～9.5，最適pH為7.7。本菌抵抗力弱，不耐熱，不耐冷，不耐酸，對(duì)常用消毒劑抵抗力弱。二、副溶血性弧菌（二）致病性該菌引起的食源性疾病系經(jīng)烹飪不當(dāng)?shù)暮．a(chǎn)品或鹽腌制品傳播，常見的為海蜇、海魚、海蝦及各種貝類。致病因素可能與其產(chǎn)生的溶血素有關(guān)。該病常年均可發(fā)生，多發(fā)生在夏秋季，主要癥狀是腹痛、腹瀉、嘔吐、脫水和發(fā)熱。二、副溶血性弧菌實(shí)驗(yàn)室檢查時(shí)取患者糞便、肛拭子或剩余食物，分離培養(yǎng)于SS瓊脂平板或嗜鹽菌選擇平板。如出現(xiàn)可疑菌落，進(jìn)一步做嗜鹽性試驗(yàn)與生化反應(yīng)，最后用血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行鑒定?？捎没蛱结樆騊CR等直接檢測(cè)食物標(biāo)本或腹瀉標(biāo)本中耐熱毒素基因進(jìn)行快速診斷。治療可用抗菌藥物，如慶大霉素、阿米卡星、諾氟沙星等，嚴(yán)重者需輸液和補(bǔ)充電解質(zhì)。（三）微生物學(xué)檢查與防治二、副溶血性弧菌第二節(jié)空腸彎曲菌生物學(xué)特性致病性與免疫性微生物學(xué)檢查防治原則空腸彎曲菌屬（C.jejuni）屬于彎曲菌屬（campylobacter），彎曲菌屬是一種形態(tài)呈弧形或“S”形的革蘭氏陰性細(xì)菌，廣泛分布于動(dòng)物界。對(duì)人類有致病力的主要是空腸彎曲菌和胎兒彎曲菌中的胎兒亞種，前者引起人類急性腹瀉，后者在機(jī)體免疫功能低下時(shí)可引起敗血癥等。概述.空腸彎曲菌菌體輕度彎曲似逗點(diǎn)狀、弧形、“S”狀、螺旋形或海鷗展翅狀。一端或兩端有單鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，呈直線或螺旋形運(yùn)動(dòng)。無(wú)芽胞，無(wú)莢膜，革蘭氏染色陰性。一、生物學(xué)特性.本菌為微需氧菌，在含5%O2、10%CO2和85%N2的環(huán)境中生長(zhǎng)最好，最適生長(zhǎng)溫度為42℃，在正常大氣或無(wú)氧環(huán)境中均不能生長(zhǎng)。該菌營(yíng)養(yǎng)要求高，在普通培養(yǎng)基上難以生長(zhǎng)。其生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類，不分解尿素，甲基紅和VP試驗(yàn)陰性，可還原硝酸鹽，氧化酶陽(yáng)性，馬尿酸鹽分解試驗(yàn)陽(yáng)性。一、生物學(xué)特性.本菌有O抗原和H抗原。根據(jù)O抗原不同可將空腸彎曲菌分成45個(gè)以上的血清型。本菌抵抗力弱，易被直射陽(yáng)光、干燥和一般消毒劑殺滅；56℃經(jīng)5分鐘即被殺死；對(duì)紅霉素、新霉素、慶大霉素、四環(huán)素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感。一、生物學(xué)特性空腸彎曲菌是禽類腸道正常寄生菌，人通過接觸某些禽類和患者糞便，或通過其污染的食物和水源傳播。人群普遍易感，5歲以下兒童的發(fā)病率最高，夏秋季多見?？漳c彎曲菌能產(chǎn)生霍亂樣腸毒素，主要引起嬰兒急性腸炎，可暴發(fā)流行或集體食源性疾病。臨床表現(xiàn)為痙攣性腹痛、腹瀉、血便或果醬樣便，量多；伴有頭痛、全身不適、發(fā)熱，偶有嘔吐和脫水。本病具有自限性，自然病程1周左右。該菌可通過腸黏膜進(jìn)入血液引起敗血癥或其他器官感染，如腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、腎盂腎炎等。孕婦感染本菌可導(dǎo)致流產(chǎn)或早產(chǎn)，而且可使新生兒受感染。（一）致病性二、致病性與免疫性機(jī)體感染空腸彎曲菌后，體內(nèi)可產(chǎn)生特異性抗體，能通過調(diào)理作用和激活補(bǔ)體等作用增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬功能。目前尚未檢測(cè)到腸道局部SIgA抗體。（二）免疫性二、致病性與免疫性微生物學(xué)檢查可用糞便、剩余食物等標(biāo)本涂片、鏡檢，查找弧菌或海鷗狀彎曲菌。分離培養(yǎng)可直接用選擇性培養(yǎng)基，在42℃的微需氧環(huán)境下培養(yǎng)，按其生物學(xué)性狀進(jìn)行鑒定。目前，鑒定主要根據(jù)馬尿酸水解試驗(yàn)、醋酸吲哚酚水解試驗(yàn)等生化反應(yīng)，以及PCR法直接檢出糞便中的彎曲菌。發(fā)病1周后，血清中可出現(xiàn)抗體，主要為IgM，可用間接血凝試驗(yàn)及間接免疫熒光試驗(yàn)等檢測(cè)特異性抗體效價(jià)。三、微生物學(xué)檢查防治原則目前尚無(wú)特異性疫苗。預(yù)防主要是注意飲水和食品衛(wèi)生，加強(qiáng)對(duì)人、畜、禽類糞便管理，及時(shí)診斷和治療患者，以免傳播。本菌對(duì)多種抗生素敏感，治療常用紅霉素、氯霉素、四環(huán)素、氨基糖苷類抗生素等。四、防治原則第三節(jié)幽門螺桿菌生物學(xué)特性致病性與免疫性微生物學(xué)檢查防治原則幽門螺桿菌（Helicobacterpylori，Hp）是螺桿菌屬的代表菌種，由Warren于1983年首次從胃黏膜標(biāo)本中分離培養(yǎng)成功。幽門螺桿菌與慢性胃炎、胃和十二指腸潰瘍有密切關(guān)系，并可能與胃癌和胃黏膜相關(guān)B細(xì)胞淋巴瘤的發(fā)生有關(guān)。概述幽門螺桿菌革蘭氏染色陰性，菌體彎曲呈弧形、螺旋狀、“U”形、“S”形及“W”形等多種形態(tài)。單端或兩端有2～6根鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑。本菌為微需氧菌，營(yíng)養(yǎng)要求高，需在含血液或血清等的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。37℃培養(yǎng)3～4天后才見針尖狀、圓形、光滑、半透明無(wú)色菌落。本菌生化反應(yīng)不活潑，不分解糖類，氧化酶和過氧化氫酶均陽(yáng)性。尿素酶試驗(yàn)呈強(qiáng)陽(yáng)性，是區(qū)別于其他彎曲菌的重要依據(jù)之一。.一、生物學(xué)特性幽門螺桿菌與慢性胃炎、胃和十二指腸潰瘍的關(guān)系密切。幽門螺桿菌的傳染源主要是人，傳播途徑主要是糞-口途徑。目前認(rèn)為本菌的黏附物質(zhì)、尿素酶和細(xì)胞毒等作用可能與致病有關(guān)。.二、致病性與免疫性微生物學(xué)檢查微生物學(xué)檢查時(shí)可用纖維胃鏡采集胃、十二指腸處黏膜組織標(biāo)本，直接涂片并進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，鏡下查到形態(tài)典型的細(xì)長(zhǎng)彎曲菌即可初步診斷。檢測(cè)尿素酶活性可直接用臨床活檢標(biāo)本或分離培養(yǎng)物。三、微生物學(xué)檢查防治原則治療本菌感染主要用多種抗菌藥物與膠體鉍制劑及抑酸劑聯(lián)用。四、防治原則螺形菌是一類菌體彎曲的細(xì)菌，包括弧菌屬、彎曲菌屬和螺桿菌屬，主要致病菌有霍亂弧菌、空腸彎曲菌、幽門螺桿菌等。本章小結(jié)霍亂弧菌是霍亂的病原菌，致病物質(zhì)主要包括鞭毛、菌毛和霍亂腸毒素。