活血化瘀類方藥思路

活血化瘀類方藥

的研究思路與方法

2023.12傳統(tǒng)中醫(yī)理論對(duì)活血化瘀藥成效的描述活血化瘀藥是以疏通血脈、祛除瘀血為主要作用，臨床用于治療血瘀證的藥物。活血化瘀藥通過活血化瘀，產(chǎn)生止痛、調(diào)經(jīng)、破血消癥、療傷消腫、活血消癰等作用。其主治范圍較廣，如內(nèi)科之胸、腹、頭諸痛，而痛如針刺，痛處固定者；體內(nèi)之癥瘕積聚；中風(fēng)后半身不遂，肢體麻木；關(guān)節(jié)痹痛日久；血證之出血色紫，夾有血塊；外傷科之跌撲損傷，瘀腫疼痛，癰腫瘡瘍等。凡一切瘀血阻滯之證，均可用之。血瘀癥涉及的主要病種胸痹心痛癥，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的冠心病、心絞痛相關(guān)；中風(fēng)、半身不遂與腦堵塞、腦血管意外相關(guān)；腹內(nèi)腫塊，痛有定處，常屬血份，癥瘕積聚與體內(nèi)腫塊相關(guān)；外傷科之跌撲損傷，瘀腫疼痛等。血瘀癥的表現(xiàn)：血液流變學(xué)異常：血液有“濃、粘、凝、聚〞傾向。微循環(huán)障礙：通常指微動(dòng)脈與靜脈間的微血管血液循環(huán)障礙。包括：微血流緩慢和淤滯；微血管內(nèi)凝血；微血管變形；微血管縮窄和閉塞；微血管周圍水腫、瘀血和出血。血流動(dòng)力學(xué)異常：器官或組織的血流、血管阻力、血流循環(huán)障礙。一、活血化瘀方藥的研究思路1.改善高黏滯血癥高黏滯血癥〔bloodhypervisicocitysyndrome,BHS〕以血液流變學(xué)異常和微循環(huán)障礙為特征。表現(xiàn)為血沉和紅細(xì)胞壓積提高，紅細(xì)胞變形能力下降，纖維蛋白原含量增加，血小板黏附性、聚集性、血栓形成能力增高等。高黏滯血癥影響對(duì)組織器官的正常血液灌注，是機(jī)體血瘀的的病理表現(xiàn)，也是許多疾病發(fā)生、開展過程中的重要環(huán)節(jié)。高血脂患者往往具有高黏滯血癥。與高黏滯血癥相關(guān)的疾病冠心病、缺血性腦血管病、糖尿病、腎病綜合征、慢性肺源性心臟病等?；钛鏊幙刹煌潭鹊馗纳蒲毫髯儗W(xué)異常和微循環(huán)障礙，從而減輕高黏滯血癥，阻斷與其相關(guān)疾病的發(fā)生或開展。2．改善組織器官缺血組織器官缺血嚴(yán)重者可致組織梗死。心肌缺血缺血性腦卒中?；钛鏊幐纳平M織器官缺血的途徑：擴(kuò)張組織動(dòng)脈血管、改善血液流變性、改善微循環(huán)、改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能、去除氧自由基，減輕組織過氧化損傷等。3．對(duì)慢性器官功能減退性疾病的影響血液循環(huán)不良可引起組織功能障礙。改善對(duì)組織器官血液循環(huán)，是改善其功能障礙的有效手段之一。慢性腎衰患者常伴有血漿黏度及纖維蛋白原濃度升高。血漿黏度與尿素氮、血肌酐呈正相關(guān)。血漿黏度的提高影響血液的流動(dòng)性、導(dǎo)致血流緩慢、腎臟血流減少。慢性腎衰由于尿毒癥對(duì)紅細(xì)胞膜的損害，使紅細(xì)胞的變形能力降低，聚集性增強(qiáng)，難以通過微血管造成微循環(huán)障礙。中醫(yī)認(rèn)為“老年多瘀〞。老年往往存在動(dòng)脈粥樣硬化等退行性病變。凝血因子Ⅴ、Ⅵ、vWF和纖維蛋白原均隨年齡增加而有不同程度增高，使血液黏度增加?！瞯WF：馮維勒布蘭德因子，主要生理功能是促進(jìn)血小板在內(nèi)皮下黏附及保護(hù)血漿因子Ⅷ不被降解?！?．對(duì)血管痙攣性疾病的影響偏頭痛與腦血管痙攣有關(guān)，可能繼發(fā)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂。有人發(fā)現(xiàn)偏頭痛發(fā)作期患者血液黏度和血小板聚集率均增加。使用活血化瘀中藥有時(shí)可起到緩解作用。如川芎即為治療偏頭痛的常用藥物之一。雷諾氏病患者表現(xiàn)為肢端微循環(huán)障礙。有報(bào)道，在活血化瘀治法根底上加用其他藥物能使患者氣血調(diào)暢，病癥因此可得緩解。5．對(duì)慢性炎癥的影響上呼吸道慢性炎癥、慢性胃炎、慢性闌尾炎、盆腔炎等。這些疾病的始發(fā)因素雖然不一定是血液循環(huán)障礙，而多半是由于外邪反復(fù)感染所致。但由于致病過程較長，機(jī)體正氣多有衰減，經(jīng)脈氣血瘀阻為常見，甚至炎癥逐漸開展可伴有局部水腫、充血甚或可形成黏連、包塊〔如盆腔炎〕。以活血化瘀為主，采用綜合治療，以促進(jìn)組織血流通暢，改善組織營養(yǎng)，提高新陳代謝，降低毛細(xì)血管通透性，有利于去除余邪，即促進(jìn)炎癥感染過程的終止。許多活血化瘀藥具有抑制缺血組織或炎癥組織細(xì)胞間黏附分子表達(dá)上調(diào)、降低白細(xì)胞黏附率、抑制白細(xì)胞活化，抗氧自由基等作用，有利于改善炎癥對(duì)組織器官的損害。

6．對(duì)組織纖維化的影響組織纖維化往往是慢性炎癥反響的結(jié)果，如肺纖維化、肝纖維化、動(dòng)脈粥樣硬化、燒傷性角膜炎等。血管內(nèi)皮細(xì)胞和炎癥細(xì)胞的激活可分泌大量的氧自由基以及ET-1、TNF-α、IL-1β、IL-1、IL-6、TGF-β等，并引起病灶內(nèi)結(jié)締組織細(xì)胞增殖，Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原mRNA及蛋白表達(dá)水平增高?；钛龇剿幍难芯克悸犯爬?.改善高黏滯血癥2．改善組織器官缺血3．對(duì)慢性器官功能減退性疾病的影響4．對(duì)血管痙攣性疾病的影響5．對(duì)慢性炎癥的影響6．對(duì)組織纖維化的影響二、活血化瘀的常用觀察指標(biāo)1．血液流變性測(cè)定

實(shí)驗(yàn)觀察藥物能否改善血瘀模型動(dòng)物血液流變學(xué)異常。(1)紅細(xì)胞壓積測(cè)定：一定體積的血液中紅細(xì)胞體積除以血液的體積稱為紅細(xì)胞壓積或比積。紅細(xì)胞壓積增高，表示血液濃度增高。測(cè)定主要方法有文氏管壓積管法。通脈活血靈膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性高粘血癥家兔紅細(xì)胞壓積的影響〔x±s〕組別劑量（g/kg）動(dòng)物(只)紅細(xì)胞壓積正常對(duì)照

80.33±0.01高粘模型

80.43±0.02***通脈活血靈2.41.2880.36±0.01△△0.38±0.03△與正常對(duì)照組比：***P<0.001；與高粘模型組比：△P<0.05；

△△

P<0.01

高脂飲食造模，每日給予不同劑量的通脈活血靈連續(xù)8周。

〔2〕血液黏度測(cè)定：黏度是液體黏性的量度，黏度越高，流動(dòng)性越小，反之，越大。血液黏度隨隨切變速率變化而變化，切變率低時(shí)，血液黏度提高，切變率高時(shí)，黏度下降。切變速率的單位為S-1。根據(jù)公式Y(jié)=4×V〔平均流速〕/R〔半徑〕可求出毛細(xì)管斷面的切變速率值。一般規(guī)定，觀察藥物對(duì)血液黏度的影響，至少要測(cè)定由高到低2個(gè)以上不同切變速率下的黏度值。黏度單位為毫帕秒(mPa.s)。在200C時(shí),水的黏度定為1mPa.s。黏度測(cè)定分為全血比黏度和血漿比黏度。前者指全血黏度與水黏度的比值；后者指血漿黏度與水黏度的比值。血漿、血清黏度不隨切變率變化而變化。它取決于構(gòu)成血漿、血清的各種成分。影響血漿黏度的主要因素依次為：膽固醇>纖維蛋白原>甘油三脂>β脂蛋白>IgG，IgA>白蛋白。測(cè)定血漿、血清的黏度，分析血漿、血清中的各種蛋白成分變化，可分析、判斷患者血黏度異常的原因和藥物影響血液黏度的環(huán)節(jié)。絞股藍(lán)總皂甙對(duì)血液流變學(xué)的影響〔x±s〕組別動(dòng)物數(shù)（只）全血粘度(mpas)（200/s）全血粘度(mpas)（30/s）全血粘度(mpas)（3/s）血漿粘度(mpas)水對(duì)照組

102.62±0.21***3.42±0.39***7.68±1.20**1.43±0.22***模型組113.49±0.334.650.5814.3±3.152.62±0.50絞股藍(lán)總甙200g/kg113.09±0.30**4.09±0.48**10.78±2.34**2.26±0.48絞股藍(lán)總甙100mg/kg113.32±0.454.33±0.6511.19±2.70*2.42±0.35絞股藍(lán)總甙50mg/kg113.17±0.45**4.22±0.7011.70±2.57*2.13±0.32*川芎嗪注射液113.30±0.424.37±0.6910.94±2.74*2.60±0.36注：模型組高分子右旋糖苷0.5g/kg；與模型組比***p<0.001，**p<0.01，*p<0.05常用血黏度測(cè)定方法：毛細(xì)管測(cè)定法和旋轉(zhuǎn)測(cè)定法兩種。目前采用后種方法較多，已有專門的儀器。

毛細(xì)管測(cè)定法[原理]：一定量的血液〔Q〕在一定壓力差下〔P1-P2〕,沿著一定長度(L)和一定內(nèi)徑(R)的毛細(xì)管流動(dòng)時(shí)，其粘度(η)與流量Q成反比，而與流出時(shí)間〔t〕成正比。Q=旋轉(zhuǎn)測(cè)定法：原理：一個(gè)能以不同轉(zhuǎn)速主動(dòng)旋轉(zhuǎn)的物體，通過對(duì)具有粘度液體的作用，能帶動(dòng)與其具有同軸心的另一個(gè)物體的被動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)。只要知道一定幾何形狀主動(dòng)旋轉(zhuǎn)物體的旋轉(zhuǎn)速率，以及被動(dòng)旋轉(zhuǎn)物體所產(chǎn)生的扭矩大小，就可以計(jì)算出切變速率數(shù)值，及切變應(yīng)力和切變速率的關(guān)系曲線，并最后從中可求出欲測(cè)試液體的粘度值。即粘度等于切變應(yīng)力和切變速率的比值。η=(3)血漿纖維蛋白原含量測(cè)定：用不同稀釋度血漿測(cè)定其凝血酶時(shí)間，可反映纖維蛋白原含量。纖維蛋白原增加，血液粘度提高，血液凝固性增加，凝血加快。(4)紅細(xì)胞電泳時(shí)間：原理紅細(xì)胞的聚集和分散同其外表所帶的負(fù)電荷有關(guān)。提高紅細(xì)胞外表的負(fù)電荷密度，紅細(xì)胞之間的同種負(fù)電荷靜電排斥力增大，紅細(xì)胞處于分散狀態(tài)，并導(dǎo)致血液粘度下降。用細(xì)胞電泳儀測(cè)定紅細(xì)胞電泳速度，可反映血細(xì)胞的聚集性。測(cè)試方法人或動(dòng)物抗凝血液0.5～1.0ml,離心(150r/min,10min)別離出紅細(xì)胞后，再配成1～2%的紅細(xì)胞懸液〔一般多用自身血漿或血清配制〕，將方形玻璃管的一端浸入欲測(cè)試的紅細(xì)胞懸浮液中，借助毛細(xì)現(xiàn)象，紅細(xì)胞懸液迅速灌滿整個(gè)管腔。之后將已灌滿紅細(xì)胞懸液的方形毛細(xì)管放在一支架上，支架固定在顯微鏡載物臺(tái)上，方形玻璃管的兩端與電極相連，施以一定強(qiáng)度的電壓。紅細(xì)胞可以在玻璃管內(nèi)移動(dòng)，移動(dòng)的距離可通過顯微鏡觀察。紅細(xì)胞電泳技術(shù)一般要求測(cè)定20個(gè)細(xì)胞移動(dòng)一定距離所需時(shí)間的平均值。也可用電泳率表示，即細(xì)胞在單位電場強(qiáng)度〔V-1〕單位時(shí)間內(nèi)移動(dòng)的距離〔μm.S-1〕。電泳率單位：μm.S-1/v-1資料顯示：與健康人相比，缺血性中風(fēng)、冠心病、心肌梗死、系統(tǒng)紅斑狼瘡病人的平均紅細(xì)胞的電泳率顯著下降?！舱＃?.16+0.06心梗：1.07+0.07〕〔單位μm.s-1〕。電泳速度減慢，說明細(xì)胞膜上負(fù)電荷密度降低，細(xì)胞排斥力減弱，而易于聚集。(5)紅細(xì)胞(RBC)變形能力測(cè)定：紅細(xì)胞的變形能力反響紅細(xì)胞的柔順性和硬度。在一定壓力推動(dòng)下，紅細(xì)胞變形能力越強(qiáng)，通過口徑細(xì)小的毛細(xì)血管速度越快；反之，那么不易通過，從而影響微循環(huán)。紅細(xì)胞變形能力愈強(qiáng)，全血粘度愈低。以一定數(shù)量RBC通過篩孔濾膜所需時(shí)間或速度可反映RBC變形能力，通過的速度越快，變形能力愈好。核孔膜設(shè)定的孔徑為4～5μm，厚度為10μm，孔的密度為4x105/cm2〔6〕血小板聚集功測(cè)定：比濁法原理：血小板懸浮在血漿中時(shí)，具有一定的不透明度，即濁度。濁度與血小板數(shù)成正比。當(dāng)一束光線投射到富血小板血漿〔PRP〕時(shí)，透過光的減弱程度與血漿中的血小板數(shù)成比例。在不斷攪拌的情況下，向富血小板血漿參加可以引起血小板聚集的物質(zhì)如：ADP、膠原，花生四烯酸等時(shí)，血小板發(fā)生聚集，分散的血小板數(shù)減少，透光率增加，透過光的變化可以通過光電元件轉(zhuǎn)變?yōu)殡娏?，從而成為可以定量地和?dòng)態(tài)地顯示血小板的聚集程度和速度變化的客觀指標(biāo)。測(cè)試方法：取人或動(dòng)物的血3～5ml用3.8%枸櫞酸鈉溶液抗凝〔血液與抗凝液=9：1〕，1000r/min離心10min，取上層液即得富血小板血漿〔PRP〕，將下層剩余的血漿繼續(xù)以3000r/min離心10min～20min取上層清液得貧血小板血(PPP)。取一定量經(jīng)370C恒溫的PRP溶液參加測(cè)量杯內(nèi)，再放入磁性小棒一枚，因PRP含有大量血小板，呈渾濁狀。翻開光源，將通過PPP測(cè)量杯的透光度定為100%，再將通過PRP測(cè)量杯的透光度調(diào)節(jié)定為0，然后，在1000r/min的機(jī)械攪拌下，用微量注射器向PRP中參加一定量的致聚劑〔如：AA200μmol/L,膠原：40μg/L,ADP:4μmol/L〕血小板發(fā)生聚集，與此同時(shí)記錄儀將血小板的聚集曲線繪制出來。體外實(shí)驗(yàn)：在PRP測(cè)量杯中先參加一定量的藥液和對(duì)照液，恒溫5min～10min，參加同樣量的致聚劑：具有抑制血小板板聚集作用的藥物，在參加致聚劑后血小板聚集程度減小。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：先給動(dòng)物用藥或?qū)φ找?，間隔一段時(shí)間后取血制備PRP或PPP，此時(shí)要注意從給藥組及對(duì)照組動(dòng)物分別制備的PRP中血小板濃度要根本一致，如不一致，那么需用PPP調(diào)整至根本一致，否那么會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性?！惭“鍏⒖紳舛龋?x108/ml〕血液在抽取出體外后，實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在2h內(nèi)完成。(7)血栓形成測(cè)定：有體外血栓和體內(nèi)血栓形成測(cè)定法。以血栓形成時(shí)間、血栓長度、血栓重量為指標(biāo)，反映血凝狀態(tài)，觀察藥物抗血栓形成作用。

大鼠32只．雌雄各半，體重(24.4±1.3)g，分為4組。分別ig藁本、華法令或自來水，1次／d，連續(xù)3d，末次給藥后45min．在烏拉坦麻醉下，切開頸部皮膚，別離左頸總動(dòng)脈．將BT87－2型實(shí)驗(yàn)性體內(nèi)血栓形成測(cè)定儀的刺激電極和溫控探頭鉤掛于頸總動(dòng)脈．用2.0mA直流電刺激30s，溫度傳感器監(jiān)測(cè)血管外表溫度變化、當(dāng)動(dòng)脈內(nèi)血栓形成堵塞血流，引起血管遠(yuǎn)端溫度突降時(shí)、儀器報(bào)警，并自動(dòng)記錄時(shí)間。ig藁本75%醇提物對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性體內(nèi)血栓形成的影響劑量（g/kg）血栓形成時(shí)間（s，x±s）飲用水412±139華法令0.01>700**藁本3504±15510606±81**N=8，**p<0.01YLS-14B小動(dòng)物血栓生成儀

直流電刺激，損毀頸動(dòng)脈血管的內(nèi)皮細(xì)胞，從而激活凝血因子，啟動(dòng)凝血機(jī)制。紅外檢測(cè)血栓開始形成的時(shí)間，血栓阻塞血管的百分比的變化以及全部栓死的時(shí)間。2．微循環(huán)功能測(cè)定大多采用活體觀察法，如人體手指甲襞、眼球結(jié)膜、舌尖微循環(huán)觀察;家兔眼球結(jié)膜微循環(huán)，大鼠或家兔腸系膜、肝臟、腎臟、肺、軟腦膜等臟器微循環(huán)，小鼠耳廓微循環(huán)觀察等。通常在冷光源下觀察。常見觀察指標(biāo)有:

〔1〕微血管形態(tài)包括外形、管徑、毛細(xì)血管網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)。病理情況下，微血管會(huì)出現(xiàn)痙攣、淤張、膨大和扭曲等畸形表現(xiàn)，同時(shí)管徑縮小，單位面積毛細(xì)血管網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)減少。

用方格型目鏡測(cè)微器在觀察部位定出一定大小的正方格，觀察與其4邊相交的毛細(xì)血管數(shù)。

〔2〕微血流狀態(tài)：包括微血管中的血色、流態(tài)、流速。在微循環(huán)中，血色反映含氧程度。紅細(xì)胞流態(tài)最易觀察，并將它簡稱為流態(tài)。如應(yīng)用先進(jìn)的微循環(huán)觀察儀器或熒光微血管造影技術(shù)，那么在微動(dòng)脈和微靜脈中能看清血細(xì)胞軸流和血漿邊流的變化。紅細(xì)胞的流態(tài)分為四級(jí)：在正常情況下，呈0級(jí)或0～I(xiàn)級(jí)。在微循環(huán)障礙時(shí)，流態(tài)出現(xiàn)I～I(xiàn)II級(jí)，并可見白細(xì)胞貼壁翻滾、白色微小血栓。流速主要測(cè)定的是紅細(xì)胞流速。毛細(xì)血管滴注丹參、生理鹽水對(duì)微動(dòng)脈口徑、流速、流量的影響(

s)滴藥后與滴NA后10min自身比較，P<0.05，P<0.01；滴藥后與滴生理鹽水同一時(shí)間比較，*P<0.05。時(shí)間(min)口徑(

m)流速(

m/s)

10-1流量(

m3/s)104丹參生理鹽水丹參生理鹽水丹參生理鹽水藥前對(duì)照36

833

366

1365

1473

1654

13滴NA后1015

1412

920

1710

1110

112

2滴藥后130

9*14

833

16*12

925

19**3

2滴藥后535

9*17

933

1413

1131

17*6

6滴藥后1034

9*19

6

44

17*14

11

43

27*6

7滴藥后2031

8*30

5

48

1717

12

37

20*13

11田鼠，先于頰囊局部滴注去甲腎上腺素(NA)50

l(5

g／100

l)，使微血管收縮，血流減慢。在滴NA前及后觀察微循環(huán)變化。然后，于同一部位分別滴注丹參或生理鹽水各50

l。在滴藥后觀察微循環(huán)變化。

〔3〕微血管周圍變化：包括有無滲出、有無出血。微血管通透性正常時(shí)，周圍無明顯滲出現(xiàn)象；在病理情況下，微血管壁通透性可升高，導(dǎo)致血管內(nèi)液體滲漏到組織間隙，從而使微血管輪廓變得模糊。如果微血管壁完整性受到破壞，損傷較嚴(yán)重可引起出血，在微血管周圍可直接見到紅細(xì)胞。熒光微血管造影(microangiography)技術(shù)不僅能觀察到普通顯微術(shù)能看到的微循環(huán)表現(xiàn)，如微血管的形態(tài)、口徑和長度，血細(xì)胞的流態(tài)和流速等，而且能觀察到普通顯微術(shù)不易或不能看到的現(xiàn)象，如血漿流態(tài)、微血管通透性、組織液流動(dòng)和淋巴循環(huán)等。此外，熒光微血管造影還可間接判斷局部組織或器官的血液灌流量。3．器官的血流量測(cè)定〔1〕電磁流量計(jì)測(cè)定法：器官的血流量測(cè)定目前最常用的是電磁流量計(jì)。通常，先要?jiǎng)e離向器官供血的動(dòng)脈，如向心肌供血的冠狀動(dòng)脈、向腦組織供血的頸總動(dòng)脈〔頸內(nèi)動(dòng)脈〕或椎動(dòng)脈等。選擇大小匹配的電磁流量計(jì)探頭，將其安在血管上。經(jīng)動(dòng)脈流入器官的血液流量即會(huì)被記錄下來。〔2〕氫去除技術(shù)測(cè)定法：利用無活性擴(kuò)散性的H2，用呼吸或其他方法，將H2〔如在動(dòng)脈內(nèi)注入含H2溶液〕輸入體內(nèi)?；谘旱牧鲃?dòng)性，使體內(nèi)各組織的H2達(dá)一定濃度的飽和狀態(tài)，然后停止輸入H2，組織中的H2逐漸減少。用探測(cè)電極連續(xù)記錄、分析此廓清過程，可推算所在組織的血流量。用氫去除率法測(cè)定器官血流量的優(yōu)點(diǎn)是不需別離動(dòng)脈，測(cè)定部位的組織損害輕微，能用數(shù)量表示器管血流量在各層組織的分布。蕓香苷口服對(duì)大鼠應(yīng)激后胃黏膜血流量的影響

組

別劑量動(dòng)物數(shù)胃黏膜血流量ml/min﹒kg－1mg/kg（n）胃竇

胃體正

常

81112.9+110.2**818.0+99.9**模

型

8628.3+117.2395.4+122.1模型+蕓香苷58753.4+102.6*583.6+79.1**模型+蕓香苷208883.4+113.6**592.6+62.8**與正常組比較，*P<0.05,**P<0.01。大鼠，分別灌胃給予蕓香苷5mg/kg及20mg/kg，對(duì)照組灌胃給予同體積生理鹽水，連續(xù)給藥5日，每日2次，最后1次給藥后1h，放入4oC冰箱內(nèi)應(yīng)激，3h后從冰箱取出，測(cè)定胃竇和胃體黏膜血流量。應(yīng)激前，動(dòng)物禁食24h。

〔3〕激光多普勒血流量有些臟器的血流量包括微循環(huán)血流量可采用激光多普勒血流量儀測(cè)定。如肝外表血流量測(cè)定，用激光多普勒儀的氦氖光束透照到肝外表，從不動(dòng)組織和活動(dòng)的紅細(xì)胞反射回來形成的參考光束和多普勒轉(zhuǎn)換光束，通過將兩者頻率的改變比照轉(zhuǎn)換，可測(cè)出肝外表微循環(huán)血流量。4．抗動(dòng)脈粥樣硬化作用觀察動(dòng)脈粥樣硬化〔AS〕模型的制備：〔1〕高脂膳食喂養(yǎng)法：常以高脂膳食喂養(yǎng)家兔、鵪鶉、雞而形成AS。主動(dòng)脈與冠狀動(dòng)脈的病變一般與血漿膽固醇〔Ch〕濃度呈正相關(guān)，采用高脂膳食喂養(yǎng)動(dòng)物或同時(shí)參加膽酸鹽、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、煙堿等以促進(jìn)外源性脂質(zhì)吸收，使其超過機(jī)體需要和去除能力，造成動(dòng)物脂質(zhì)代謝紊亂?！?〕動(dòng)脈內(nèi)皮損傷：又分①化學(xué)性損傷法：家兔或大鼠灌服維生素D，結(jié)合高脂膳食喂養(yǎng)，一般21日后可快速誘發(fā)AS。②機(jī)械損傷法：家兔用充氣導(dǎo)管進(jìn)行主動(dòng)脈內(nèi)皮剝脫，結(jié)合高脂膳食喂養(yǎng)。血管成形術(shù)支架③免疫性損傷法：機(jī)體對(duì)抗原物質(zhì)，如生物性抗原、疫苗、抗生素及組織自身抗原的免疫反響形成免疫復(fù)合物在血管壁上沉積，引起補(bǔ)體系統(tǒng)的激活，繼而引起動(dòng)脈內(nèi)彈力膜的增殖性變化，在此病變的根底上，如果發(fā)生脂質(zhì)沉積，即可構(gòu)成比較典型的AS病變。方法：家兔注射馬血清每次10ml/kg，或家兔靜脈注射牛血清白蛋白每次250mg/kg，共4次，每次間隔17日，結(jié)合高脂膳食，可形成AS病變。防治AS療效的觀察指標(biāo)通常涉及形態(tài)學(xué)檢查和脂質(zhì)代謝水平兩方面。形態(tài)學(xué)檢查：①主動(dòng)脈粥樣斑塊病變分級(jí)程度，或用圖像分析儀記錄斑塊面積及所占動(dòng)脈壁的百分率；②冠狀動(dòng)脈或腸系膜動(dòng)脈等的病變分級(jí)可用光鏡和電鏡檢測(cè)病變的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)和定量觀測(cè)血管內(nèi)膜及中膜厚度的比值、內(nèi)膜泡沫細(xì)胞數(shù)及中膜完整平滑肌層數(shù)等。形態(tài)學(xué)檢查分級(jí)參考0級(jí)內(nèi)膜外表光滑，無斑塊；0.5級(jí)內(nèi)膜有廣泛奶油色或乳白色變化，但無凸出于外表的斑塊；1級(jí)有明顯的奶油色凸起斑塊，面積小于3mm2；2級(jí)斑塊面積大于3mm2；3級(jí)有許多大小不等的斑塊，有的融合，大斑塊面積超過3mm2；4級(jí)動(dòng)脈內(nèi)膜外表幾乎全為融合斑塊覆蓋。百分率法：用圖像分析儀記錄斑塊面積及所占動(dòng)脈壁的百分率。

冠狀動(dòng)脈內(nèi)膜脂質(zhì)浸潤厚度新西蘭兔一次性靜注牛血清白蛋白250mg/kg，加每天喂高膽固醇飼料，造模60日后均停止高脂飼料，分別喂含1號(hào)方、2號(hào)方飼料，空白組喂普通飼料，90日處死，取主動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈染色后進(jìn)行病變程度分級(jí)與空白組比較,△P＜0.05〔下同〕。

組別動(dòng)物數(shù)0~0.5級(jí)1級(jí)2級(jí)3級(jí)4級(jí)空白組6022111號(hào)方組△8610102號(hào)方組511210

動(dòng)脈粥樣斑脂質(zhì)代謝測(cè)定：病變組織或血清中脂質(zhì)〔TC、TG〕；脂蛋白〔HDL、LDL、VLDL〕、載脂蛋白〔apoAⅠ、apoB〕含量?！裁庖咄干浔葷岱y(cè)定apoAⅠ，apoB試劑盒。〕ApoA與ApoB

載脂蛋白A〔ApoA〕:目前發(fā)現(xiàn)三種亞組分，即ApoAI、ApoAII和ApoAIV。ApoAI是ApoA族最多的一種組份，ApoA族主要存在于HDL中，研究說明它與冠心病呈負(fù)相關(guān);ApoB

是

LDL〔低密度脂蛋白〕

的主要蛋白質(zhì)，高

ApoB

是冠心病的危險(xiǎn)因素。理想的降脂治療在降低血清膽固醇(TC)和血清甘油三酯(TG)的同時(shí)，也應(yīng)降低ApoB，升高ApoA、及ApoA/ApoB比值。組別劑量（g/kg）TCTGLDL生理鹽水—0.59±0.410.79±0.150.16±0.14模型對(duì)照—13.05±1.11★★1.67±0.37★★12.37±1.19★★保心丸85.13±0.74△△0.77±0.39△△4.66±0.70△△諾衡0.0811.77±1.350.88±0.24△△11.07±1.43保心丸對(duì)實(shí)驗(yàn)性AS家兔的作用(x±s，g/L)日本大耳兔，高脂飼料連續(xù)60日制成AS模型并進(jìn)行試驗(yàn)。保心丸組給予保心丸8g〔生藥〕/kg，正常組和模型組給予生理鹽水，與正常組比較,★★P＜0.01；與模型組比較,△P＜0.05，△△P＜0.01。魚腥草素對(duì)模型大鼠血清ApoA1，ApoB,ApoA1/ApoB的影響〔χ±S〕組別N劑量（mg/kg）ApoA1/g/LApoB/g/LApoA1/ApoB正常10NS0.28±0.040.62±0.220.48±0.12模型9NS0.46±0.172.12±0.76△△0.22±0.05△△魚腥草素10450.39±0.100.73±0.17*0.54±0.12**魚腥草素10900.32±0.130.66±0.33**0.51±0.14**辛伐他汀1050.56±0.161.00±0.18*0.55±0.10**注：與正常組比較，△p<0.05，△△p<0.01；與模型組比較，*p<0.05，**p<0.01．5．與活血化瘀成效相關(guān)的體內(nèi)主要活性物質(zhì)測(cè)定血栓烷(TAX2)：主要在血小板內(nèi)合成，具有很強(qiáng)的促進(jìn)血小板聚集、血栓形成和收縮血管的作用。血管內(nèi)皮素(ET):又稱內(nèi)皮收縮因子，具有比TAX2更強(qiáng)的收縮血管作用。ET：有3種亞型，ET1主要由內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞生成；ET2主要在腎、腸生成；ET3在大腦的濃度最高。前列環(huán)素〔PGI2〕：在血管內(nèi)皮合成，與TAX2作用相反，具有很強(qiáng)的抑制血