分子熒光光譜法實驗報告

3/4分子熒光光譜法試驗報告一、試驗?zāi)康陌盐諢晒夤舛扔嫷母驹砑笆褂谩Ａ私鉄晒夥止夤舛扔嫷臉?gòu)造和各組成局部的作用。把握分子熒光光度計分析物質(zhì)的特征熒光光譜：激發(fā)光譜、放射光譜的測定方法。了解影響熒光產(chǎn)生的幾個主要因素。學(xué)會運用分子熒光光譜法對物質(zhì)進(jìn)展定性和定量分析。原子外層電子吸取光子后，由基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，再回到較低能級或者基態(tài)時，放射出肯定波長的輻射，稱為原子熒光。對于分子的能級激發(fā)態(tài)稱為分子熒光，尋常所說的熒光指分子熒光。具有不飽和基團(tuán)的基態(tài)分子經(jīng)光照耀后，價電子躍遷產(chǎn)生熒光，是當(dāng)電子從第一激發(fā)單重態(tài)S1S0級所產(chǎn)生的光輻射。激發(fā)光譜是指發(fā)光的某一譜線或譜帶的強度隨激發(fā)光波長(或頻率)變化的曲線。橫坐標(biāo)為激發(fā)光波長，縱坐標(biāo)為發(fā)光相對強度。激發(fā)光譜反映不同波長的光激發(fā)材料產(chǎn)生發(fā)光的效果。即表示發(fā)的光譜。獲得方法：先把其次單色器的波長固定，使測定的λem不Iλex激發(fā)光譜，從曲線上找出ex放射光譜是指發(fā)光的能量按波長或頻率的分布。通常試驗測量的是發(fā)光的相對能量。放射光譜中，橫坐標(biāo)為波長，縱坐標(biāo)為發(fā)光相對強度。放射光譜常分為帶譜和線譜，有時也會消滅既有帶譜、又有線譜的狀況。放射光譜的獲得方法：先把第一單色器的波長固定，使激發(fā)的λex不變，轉(zhuǎn)變其次單色器波長，讓不同波長的光掃描，測定Iλem放射光譜;從曲線上找出最大的λem。熒光強度與熒光物質(zhì)濃度的關(guān)系用強度為I0熒光強度If(A試劑：羅丹明B乙醇溶液；1-萘酚乙醇溶液；3,3-Diethyloxadicarbocyanineiodide10μg/ml,20μg/ml,30μg/ml,40μg/ml醇。Fluoromax-41cmspectrofluorometer熒光器構(gòu)造：它主要由光源、單色器、液槽、檢測器和顯顯示器或打印機顯示和記錄被測樣品譜圖。四、試驗步驟3,3’-Diethyloxadicarbocyanine知濃度。翻開熒光分光光度計和電腦，預(yù)熱半個小時。翻開spectrofluorometer先檢測羅丹明B560nm，檢測并保541nm檢測羅丹明B1-3。3,3’-Diethyloxadicarbocyanineiodide210μg/ml,20μg/ml,30μg/ml,40μg/ml錄數(shù)據(jù)，繪制工作曲線。3,3’-Diethyloxadicarbocyanineiodide測，記錄數(shù)據(jù)，并依據(jù)工作曲線求