單克隆抗體(經(jīng)典試講)課件

1單克隆抗體生物導彈3教學內(nèi)容單克隆抗體的發(fā)現(xiàn)單克隆抗體的概念單克隆抗體的制備單克隆抗體的應用4多克隆抗體的概念5

傳統(tǒng)抗血清的交叉反應專一性反應沒有反應交叉反應+-+123AgA

xyzAgB1’20AgA’1231231236單克隆抗體技術發(fā)現(xiàn)以及原理1975年Kohler和Milstein首先報道，用細胞雜交技術，使經(jīng)綿羊紅細胞(SRBC)免疫的小鼠的脾細胞，與小鼠的骨髓瘤細胞融合，并由此創(chuàng)建了第一個B細胞雜交瘤細胞株，獲得了抗SRBC的單克隆抗體。這是免疫學，乃至醫(yī)學史上的一個里程碑。概述2002年發(fā)明單克隆抗體技術NobelPrizein1984發(fā)明單克隆抗體技術NobelPrizein19842002年8單克隆抗體的相關概念雜交細胞：在誘導物的作用下同一細胞或不同細胞間的融合，融合的細胞具有雙親本細胞的染色體和全部或部分特性。雜交瘤細胞：B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后產(chǎn)生的雜交細胞。單克隆抗體單克隆抗體是將產(chǎn)生抗體的細胞與骨髓瘤細胞融合，通過有限稀釋法及克隆化使雜交瘤細胞成為純一的單克隆細胞系而生產(chǎn)的。由于這種抗體是針對一個抗原決定簇的抗體，又是單一的B淋巴細胞克隆產(chǎn)生的，因此稱為單克隆抗體。它是結(jié)構(gòu)和特異性完全相同的高純度抗體。

抗體-a-b-c-d-a-b-c-d抗原決定基BALB/cabbcd傳統(tǒng)抗體(抗血清)是所有抗體的混和

脾臟產(chǎn)生各種

B細胞免疫前要先把抗原作成乳劑免疫

抗原采血后可得傳統(tǒng)抗血清已建立之小鼠骨髓癌細胞株由脾臟收集B細胞抗原通常有多個抗原決定基免疫后的脾臟約在兩月內(nèi)注射五到八次AgX單克隆抗體的制備過程TK-HGPRT--d細胞融合-a-b-c-dAgXAgX’ELISAHAT篩選PEGCellfusionHybridomacells融合瘤細胞（Subcloning）

(確定只有一種細胞)d’dabcdabcd’+++++++-X-d-c-b-a+--dNS-1骨髓癌細胞Bcell脾細胞分株培養(yǎng)篩選篩選單抗傳統(tǒng)抗體(抗血清)試驗專一性對抗原的反應無法分辨完全不同d舊有抗原d’新的抗原單克隆抗體的制備過程單克隆抗體制備過程一、抗原與動物免疫二、細胞融合三、雜交瘤細胞的篩選四、特異抗體的篩選五、單克隆抗體的大量制備先免后合，兩篩兩得14優(yōu)點——和常規(guī)抗血清相比

1.特異性強：單克隆抗體是針對抗原分子表面抗原決定簇的，有人稱為“單特異性”。它是研究生物大分子和細胞表面細微結(jié)構(gòu)以及診斷治療疾病的有力工具。2.可大量生產(chǎn)，容易標準化：一旦獲得1株雜交瘤細胞株，就可以無限制地反復制備出相同特異性的單克隆抗體。由于來自同一株細胞，很容易標準化。3.用不純的抗原，可以制備出純的單克隆抗體。用這種抗體又可以提純抗原。

因為具有上述特點，單克隆抗體應用范圍很廣，幾乎滲透到生物醫(yī)學的每一個領域，在生物醫(yī)學研究，臨床醫(yī)學，軍事醫(yī)學和工業(yè)生產(chǎn)上都有重要的實用意義?？贵w是對其抗原有極強專一性的魔彈或巡弋飛彈研究 以免疫轉(zhuǎn)印法檢測

特定抗原，蛋白質(zhì)的提純檢驗 以ELISA偵測特定

病原體治療

以毒素連結(jié)抗體攻擊

病變細胞，腫瘤的導向治療，放射免疫顯像技術FDA批準了46種單克隆抗體藥物上市

2002年

29億美元

2011年500億美元

2015年680億美元思考題1.單克隆抗體是來自誰？如果直接給人注射，會有什么反應？2.查找出至少3種單克隆抗體藥物及其適應癥？參考資料