豬鏈球菌2型江蘇分離株溶血素基因缺失株的構(gòu)建及特性分析的開題報(bào)告

豬鏈球菌2型江蘇分離株溶血素基因缺失株的構(gòu)建及特性分析的開題報(bào)告論文題目：豬鏈球菌2型江蘇分離株溶血素基因缺失株的構(gòu)建及特性分析研究背景和意義：豬鏈球菌（Streptococcussuis）是一種重要的豬和人類病原菌，已被認(rèn)為是豬醫(yī)學(xué)和人醫(yī)學(xué)上的重要問(wèn)題。2型豬鏈球菌是具有較高致病性的亞型之一，已被廣泛研究。其中，溶血素成為2型豬鏈球菌致病性的重要因素之一。然而，近年來(lái)有越來(lái)越多的研究表明，溶血素缺失株也可以引起疾病。江蘇省作為我國(guó)重要的生豬養(yǎng)殖區(qū)之一，關(guān)于2型豬鏈球菌的研究較少，特別是缺失溶血素基因的疾病毒株的研究更少。因此，開展豬鏈球菌2型溶血素缺失株的構(gòu)建及特性分析研究，對(duì)于解析2型豬鏈球菌的致病機(jī)理及提供制備缺失溶血素基因的病毒株的技術(shù)手段等方面有重要意義。研究主要內(nèi)容和方法：本文擬通過(guò)以下方法完成研究：1.收集測(cè)序已知的2型豬鏈球菌的溶血素基因序列，對(duì)江蘇省分離的2型豬鏈球菌菌株進(jìn)行PCR檢測(cè)溶血素基因是否存在，并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行DNA測(cè)序驗(yàn)證。2.設(shè)計(jì)引物，構(gòu)建缺失溶血素基因的2型豬鏈球菌株，通過(guò)PCR擴(kuò)增、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)等方法，獲得多個(gè)單克隆菌株。3.對(duì)構(gòu)建的缺失溶血素基因的菌株進(jìn)行生物學(xué)特性和致病性的比較研究，如對(duì)細(xì)胞增殖的影響、可溶性蛋白質(zhì)的檢測(cè)等。研究預(yù)期結(jié)果：1.確認(rèn)江蘇分離的2型豬鏈球菌中溶血素基因是否存在，并對(duì)其序列進(jìn)行分析。2.構(gòu)建缺失溶血素基因的2型豬鏈球菌株，并鑒定其純度和穩(wěn)定性。3.通過(guò)生物學(xué)和致病性的比較研究，探討缺失溶血素基因的2型豬鏈球菌株的致病性和生長(zhǎng)特性等方面的影響。4.為探索豬鏈球菌致病機(jī)理以及提供缺失溶血素基因的2型豬鏈球菌株制備的技術(shù)手段等方面提供指導(dǎo)和依據(jù)。論文框架：第一章緒論1.1研究背景與意義1.2研究現(xiàn)狀及進(jìn)展1.3研究思路和方法1.4論文結(jié)構(gòu)與內(nèi)容安排第二章豬鏈球菌的溶血素基因2.1豬鏈球菌2.2豬鏈球菌的溶血素及其功能2.3菌株的溶血素基因差異分析第三章豬鏈球菌2型江蘇分離株的溶血素基因檢測(cè)及突變株的構(gòu)建3.1江蘇分離株的菌株鑒定及分離3.2溶血素基因的檢測(cè)及序列分析3.3基因敲除突變株的構(gòu)建3.4基因敲除突變株的驗(yàn)證第四章缺失溶血素基因的2型豬鏈球菌株的純化和鑒定4.1缺失溶血素基因的2型豬鏈球菌株的菌種保存及擴(kuò)增4.2純化和表型鑒定4.3PCR和Westernblot分析第五章生物學(xué)特性和致病性的比較研究5.1細(xì)胞增殖和溶血性的比較研究5.2可溶性蛋白質(zhì)濃