Neuro Oncol（IF=15.9）：質(zhì)譜流式（CyTOF）揭示免疫治療相關(guān)不良事件的細(xì)胞亞群標(biāo)志物VIP

部分患者在免疫檢查點(diǎn)抑制劑（ICI）治療后出產(chǎn)生嚴(yán)重副作用，例如神經(jīng)免疫相關(guān)不良事件（irAE-n）。為了克服診斷和治療挑戰(zhàn)，深入地了解irAE-n的發(fā)生機(jī)制至關(guān)重要。2023年10月12日，NeuroOncol（IF=15.9）雜志上發(fā)表了一篇題為“Immunesignaturesofcheckpointinhibitor-inducedautoimmunity-afocusonneurotoxicity”的文章，通過質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)（CyTOF）發(fā)現(xiàn)irAE-n患者存在特異性的免疫細(xì)胞失調(diào)，并通過Luminex芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)接受ICI治療的irAE-n患者出現(xiàn)炎癥因子和趨化因子的增加。通過建立診斷模型發(fā)現(xiàn)效應(yīng)記憶型CD8+

T細(xì)胞和CXCL10可作為診斷irAE-n的潛在標(biāo)志物。

研究設(shè)計(jì)為了尋找irAE-n的癌癥患者中的特異性免疫細(xì)胞亞群，研究人員通過質(zhì)譜流式（CyTOF）分析來自34例irAE-n患者和49名沒有irAE-n的對照患者的外周血樣本，總共檢測分析了48個蛋白靶標(biāo)。并使用多重細(xì)胞因子測定（Luminex）進(jìn)行血清細(xì)胞因子檢測。圖1研究設(shè)計(jì)研究結(jié)果1、CyTOF發(fā)現(xiàn)與irAE-n相關(guān)的T細(xì)胞譜、先天免疫亞群和B細(xì)胞譜考慮到ICI治療靶點(diǎn)主要表達(dá)在T細(xì)胞上，研究首先將CyTOF數(shù)據(jù)分析集中在T細(xì)胞亞群上。評估了每位參與者大約20000個外周血T細(xì)胞，并分析了50個不同簇中37個T細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)irAE-n患者的效應(yīng)記憶型CD8+

T細(xì)胞水平增加（圖1A）。由于早期臨床研究報(bào)告表明B細(xì)胞耗竭療法對irAE-n有益，研究人員分析了非T細(xì)胞免疫細(xì)胞群體的變化。評估了每個參與者大約50000個非T細(xì)胞，并分析了30個簇中21個白細(xì)胞標(biāo)記物，發(fā)現(xiàn)irAE-n患者與對照組相比CD11c+cDC減少，NK細(xì)胞減少，非經(jīng)典CD16+CD14-單核細(xì)胞減少，同時CD14+

CD11b+單核細(xì)胞增加（圖1B）。這些發(fā)現(xiàn)表明irAE-n患者的先天免疫細(xì)胞失調(diào)。此外，結(jié)合前期自身抗體數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)自身抗體陽性irAE-n患者存在特異性B細(xì)胞改變。圖2CyTOF發(fā)現(xiàn)與irAE-n相關(guān)的細(xì)胞亞群2、Luminex發(fā)現(xiàn)與irAE-n相關(guān)的細(xì)胞因子特征采用Luminex液相芯片檢測了血清樣本中45種細(xì)胞因子/趨化因子/生長因子。結(jié)果顯示介導(dǎo)免疫細(xì)胞運(yùn)輸?shù)内吇蜃语@著增加，如CXCL10、CCL3、CCL4、CCL5。此外，TNFα、IL-1R顯著增加。此外生長因子VEGF-α、PIGF-1、PDGF-BB、HGF在irAE-n中顯示出更高濃度?？傊?，這些結(jié)果表明，接受ICI治療的irAE-n患者出現(xiàn)炎癥并增強(qiáng)免疫細(xì)胞遷移（圖3）。圖3Luminex發(fā)現(xiàn)與irAE-n相關(guān)的細(xì)胞因子特征3、irAE-n的潛在外周血標(biāo)志物其他病因（例如感染等）可能會出現(xiàn)irAE-n類似的體征和癥狀。因此，鑒定ICI誘導(dǎo)的irAE-n自身免疫標(biāo)志物非常重要。研究人員使用多因素邏輯回歸研究了不同外周血免疫標(biāo)志物與irAE-n之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)具有較高的CD8+EM1T細(xì)胞比例（閾值=T細(xì)胞的7.2%）和較高的CXCL10濃度（閾值=49.5pg/ml）的患者出現(xiàn)irAE-n的可能性較高（圖4A、4B）。CD8+EM1T細(xì)胞比例和CXCL10濃度診斷irAE-n準(zhǔn)確度達(dá)到82.1%（圖4C）。CD8+EM1T細(xì)胞頻率和CXCL10水平的低相關(guān)性表明這些參數(shù)與irAE-n獨(dú)立相關(guān)（圖4D）?？傊?，研究結(jié)果表明CD8+EM1T細(xì)胞和CXCL10可能是ICI誘導(dǎo)的自身免疫的標(biāo)志物。圖4CD8+EM1T細(xì)胞和CXCL10可作為irAE-n外周血標(biāo)志物總結(jié)與討論本研究采用CyTOF發(fā)現(xiàn)神經(jīng)免疫相關(guān)不良事件（irAE-n）患者的特異性免疫細(xì)胞亞群，發(fā)現(xiàn)免疫細(xì)胞失調(diào)（T細(xì)胞亞群、先天免疫亞群和B細(xì)胞亞群），并通過Luminex芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)接受ICI治療的irAE-n患者出現(xiàn)炎癥并增強(qiáng)免疫細(xì)胞遷移。結(jié)合前期結(jié)合前期自身抗體數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)自身抗體陽性irAE-n患者存在特異性B細(xì)胞改變。最后通過建立診斷模型發(fā)現(xiàn)CD8+效應(yīng)記憶T細(xì)胞和CXCL10可作為診斷irAE-n的有潛力的標(biāo)記物?？傊芯客ㄟ^聯(lián)合CyTOF、Luminex和自身抗體分析，全面揭示了檢查點(diǎn)抑制劑誘導(dǎo)的自身免疫免疫特征。華盈生物：單細(xì)胞+空間+蛋白組系統(tǒng)性服務(wù)平臺1）“蛋白芯片”和“蛋白質(zhì)譜”雙平臺技術(shù)服務(wù)體系將完美助力于血液蛋白、細(xì)胞因子、外泌體蛋白標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)，雙管齊下，最大限度的不漏篩低豐度的血液蛋白，發(fā)現(xiàn)最具臨床意義的標(biāo)志物。2）包含大約2萬多種人類蛋白的“人類蛋白組芯片”，可用來全面篩選血液自身抗體，發(fā)現(xiàn)腫瘤、自身免疫疾病等新的自身抗體診斷標(biāo)志物。3）“ISOP單細(xì)胞功能蛋白組”可實(shí)現(xiàn)對單個細(xì)胞亞群分泌蛋白組的檢測，發(fā)現(xiàn)關(guān)鍵的多功能性細(xì)胞，作為腫瘤免疫治療、CAR-T細(xì)胞治療的預(yù)測標(biāo)志物。4）質(zhì)譜流式細(xì)胞術(shù)（CyTOF）可以支持全血樣本、組織樣本、單細(xì)胞懸液等多種樣本類型的分析，抗體庫包含常用的人源抗體500多種，鼠源抗體300多種，可以實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞亞型、細(xì)胞功能的精準(zhǔn)分析。5）空間單細(xì)胞蛋白組學(xué)（IMC+PCF）可獲得特定組織結(jié)構(gòu)中細(xì)胞亞群數(shù)量、細(xì)胞鄰域的關(guān)系圖譜、細(xì)胞通訊網(wǎng)絡(luò)、以及免疫檢查點(diǎn)等關(guān)鍵功能蛋白在單個細(xì)胞上的表達(dá)定位等深度空間信息，可用于疾病機(jī)制靶點(diǎn)和診斷、療效、預(yù)后等標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)。

業(yè)務(wù)咨詢400-869-2936微信同號）相關(guān)文獻(xiàn)Müller-JensenL,SchulzAR,MeiHE,etal.

Immunesignaturesofcheckpointinhibitor-inducedautoimmunity-afocusonneurotoxicity.

NeuroOncol.2023Oct12:noad198.doi:10.1093/neuonc/noad198.Epubaheadofprint.|工作郵箱：market@|官網(wǎng)鏈接：#

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#.>...上海華盈生物醫(yī)藥科技有限公司（以下簡稱“華盈生物”）成立于2012年，位于上海閔行區(qū)綠洲環(huán)路396弄5幢4層，是一家集產(chǎn)品研發(fā)—技術(shù)服務(wù)為一體的醫(yī)學(xué)生物技術(shù)領(lǐng)域的特色高科技企業(yè)。華盈生物作為專業(yè)的蛋白組學(xué)技術(shù)服務(wù)公司，充分利用核心團(tuán)隊(duì)的科學(xué)背景與資源優(yōu)勢，成功打造了“蛋白芯片”和“蛋白質(zhì)譜”雙平臺技術(shù)服務(wù)體系，形成1+1>2的獨(dú)特業(yè)務(wù)優(yōu)勢。經(jīng)過多年的穩(wěn)步發(fā)展，華盈生物在業(yè)界逐漸樹立了“科學(xué)家服務(wù)科學(xué)家”的良好口碑和形象，業(yè)務(wù)覆蓋“蛋白芯片”、“蛋白質(zhì)譜”、“外泌體研究”、“單細(xì)胞蛋白組”、“空間單細(xì)胞蛋白組”、“藥靶篩選”等領(lǐng)域，是國內(nèi)標(biāo)桿性的蛋白質(zhì)篩選與檢測系統(tǒng)性服務(wù)平臺。多年來華盈生物服務(wù)客戶已經(jīng)覆蓋國內(nèi)各大著名的高校院所和多位院士課題組。華盈的專業(yè)和專注也已獲得業(yè)界普遍認(rèn)可，合作者的科研成果也先后在CellResearch、CancerCell、EurHeartJ