鹽酸莫西沙星注射液雜質(zhì)含量測定

鹽酸莫西沙星注射液雜質(zhì)含量測定

鹽酸莫沙星注射液的有效成分是莫沙星，它是一種新型的第四代八-羥色胺類藥物。這是一種類似于抗炎藥的藥物之一，可以廣泛地用作抗菌譜。在已完成的20余項臨床實驗中,莫西沙星體現(xiàn)了良好的安全性和藥動力特性,具有口服吸收良好的特點,平均絕對生物利用度達(dá)到90%,血漿蛋白結(jié)合率則為50%,組織穿透性也較良好。在鹽酸莫西沙星原料的合成過程中會有相關(guān)物質(zhì)的引進(jìn),并且鹽酸莫西沙星注射液在配制和儲存的過程中可能有不同程度的降解,從而可能產(chǎn)生以下幾種雜質(zhì):雜質(zhì)A分子式為C20H21F2N3O3,分子量為389.40;雜質(zhì)B分子式為C22H27N3O5,分子量為413.47;雜質(zhì)C分子式為C22H26FN3O4,分子量為415.46;雜質(zhì)D分子式為C21H24FN3O4,分子量為401.43;雜質(zhì)E分子式為C20H22FN3O4,分子量為387.40。采用適當(dāng)?shù)姆治龇椒?實現(xiàn)對以上5種雜質(zhì)的分析檢測并進(jìn)行逐一控制,對鹽酸莫西沙星注射液在用藥過程中能發(fā)揮安全有效的作用具有重要意義。分析方法主要采用HPLC法,作者采用苯基硅烷鍵和硅膠作為填充劑HPLC方法,通過工藝調(diào)整,使得該方法易操作,以滿足莫西沙星供試樣測定使用。1材料和方法1.1莫西瓜星雜質(zhì)的制備鹽酸莫西沙星雜質(zhì)A(AUSPCertificate);鹽酸莫西沙星雜質(zhì)B,C,D,E(MolcavCorporation);莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)液,甲醇(色譜純,美國HONEYWELLB&J);水(二次蒸餾);四丁基硫酸氫銨,磷酸二氫鉀,磷酸,均為分析純。莫西沙星雜質(zhì)A儲備液:取莫西沙星雜質(zhì)A2.5mg,置于25mL容量瓶中,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻。莫西沙星雜質(zhì)A樣品:量取上述雜質(zhì)A儲備液1mL置于100mL容量瓶中,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻。雜質(zhì)B,C,D,E儲備液及樣品的配制同上。1.2紫外檢測儀器所使用的儀器主要有:高效液相色譜儀(LC-10ATVP溶劑輸送泵,CTO-10AVP柱溫箱,SPD-M10AVP紫外檢測器,CLASS-VP色譜工作站,均為日本島津公司產(chǎn)品;苯基硅烷鍵和硅膠色譜柱(天津博納艾杰爾科技有限公司),FA2004電子天平(上海天平儀器廠),PHS-3C=酸度計(上海佑科儀器儀表有限公司)。1.3丁基硫酸氫銨檢測條件色譜柱是苯基硅烷鍵和硅膠色譜柱,以甲醇∶混合液(0.5g/L四丁基硫酸氫銨,1.0g/L磷酸二氫鉀和3.4g/L磷酸等體積混合)=28:72(體積比)為流動相,檢測流速是1.3mL/min,波長293nm,柱溫是45℃。1.4關(guān)于雜質(zhì)的線性試驗方法1.5測定不同時間點點穩(wěn)定性分別將鹽酸莫西沙星雜質(zhì)樣品在室溫下放置,經(jīng)0,1,2,4,6,8h,在不同時間點分別取樣10μL,注入液相色譜儀,測定其峰面積,考查其穩(wěn)定性。1.6莫-沙星標(biāo)準(zhǔn)樣的取樣方法稱取5mg莫西沙星用流動相配制成5mL溶液,搖勻。量取10μL注入液相色譜儀,記錄相關(guān)數(shù)據(jù)。2結(jié)果與討論2.1雜質(zhì)的線性回歸分析以表1中的濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)(見圖1),再對標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行線性回歸分析,零點強制通過,可以得到線性回歸方程和相關(guān)系數(shù),由圖1中的曲線可以得到結(jié)論,在一定濃度范圍(0.6~1.4μg/mL)內(nèi),雜質(zhì)的線性關(guān)系良好,可以滿足鹽酸莫西沙星注射液對雜質(zhì)的線性要求。2.2測定峰面積、穩(wěn)定性分別將鹽酸莫西沙星雜質(zhì)樣品在室溫下放置,經(jīng)0h,1h,2h,4h,6h,8h,在不同時間點分別取樣10μL注入液相色譜儀,測定峰面積,考查其穩(wěn)定性,結(jié)果見表2。通過表2中的數(shù)據(jù)所得峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差s為0.29%~0.72%,而在1.3中規(guī)定的色譜條件下,峰面積s的正常波動范圍是在0.2%~0.9%之內(nèi),由此可知在室溫下放置8h后雜質(zhì)溶液仍然穩(wěn)定,能夠滿足鹽酸莫西沙星注射液對雜質(zhì)溶液穩(wěn)定性的要求。2.3雜質(zhì)的含量莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)品測試條件同2.1和2.2,結(jié)果如表2所示。由表2數(shù)據(jù)可知,雜質(zhì)A,B,C,D,E的含量均低于莫西沙星含量的0.15%,由線性試驗和穩(wěn)定性試驗可知,標(biāo)準(zhǔn)品雜質(zhì)濃度均在線性范圍內(nèi),且可穩(wěn)定存在,由保留時間可知,在所設(shè)置的測試條件下,峰分離度良好,可用于供試樣的測試。3莫沙地星標(biāo)準(zhǔn)品溶液在所設(shè)置的實驗條件下,當(dāng)雜質(zhì)濃度在0.6~1.4μg/mL時,雜質(zhì)的線性關(guān)系良好。在室溫下放置8h后雜質(zhì)溶液仍然穩(wěn)定。莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)品測試結(jié)果顯示,對于1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液,雜質(zhì)A,B,C,D,E的含量均低于莫西沙星含量的0.15%,穩(wěn)定性和線性均能滿足測試要求