一個擬南芥花器官發(fā)育突變體的遺傳分析和基因定位的中期報告

一個擬南芥花器官發(fā)育突變體的遺傳分析和基因定位的中期報告本實驗旨在研究擬南芥（Arabidopsisthaliana）花器官的發(fā)育，通過觀察發(fā)育突變體的表現(xiàn)、遺傳分析和基因定位等手段，探究與花器官發(fā)育相關(guān)的基因和調(diào)控機制。1.實驗材料本實驗采用的擬南芥品種為Col-0，包括以下突變體：突變體名稱|表型特征---|---ap1-1|無花瓣、無雄蕊、非常類似于萼片的花瓣、僅有兩個子房和少數(shù)胚珠的花ap2-1|花瓣、雄蕊、子房內(nèi)壁和胚珠的發(fā)育異常ap3-1|萼片與花瓣之間模糊不清、雄蕊比正?；ㄉ?、子房發(fā)育受限pi-1|與ap1-1類似的表型，但是有少量分化的雄蕊2.實驗方法2.1觀察花器官發(fā)育突變體的表現(xiàn)在生長室中培養(yǎng)Col-0和不同突變體的擬南芥，觀察花器官的發(fā)育和形態(tài)。2.2遺傳分析采用分離重組法進行遺傳分析，分別將突變體ap1-1、ap2-1和ap3-1與野生型Col-0交配，得到F1代。再將F1代與不同突變體雜交，得到F2代，觀察F2代花器官的發(fā)育和表現(xiàn)，分析突變體的遺傳模式和遺傳比例。2.3基因定位選取ap1-1突變體，對其進行基因定位。構(gòu)建F2代個體DNA池，分別以突變和野生型上下游引物擴增多態(tài)性標(biāo)記，并進行基因組測序，獲得突變位點和位于突變位點周圍的標(biāo)記，通過重組率和頻率的計算，逐漸縮小位點區(qū)域，最終定位到與突變體表型相關(guān)的基因。3.中期報告進展目前，已經(jīng)完成了部分實驗工作，結(jié)果如下：3.1觀察花器官發(fā)育突變體的表現(xiàn)三個突變體的表現(xiàn)如表格所示：突變體名稱|表型特征---|---ap1-1|無花瓣、無雄蕊、非常類似于萼片的花瓣、僅有兩個子房和少數(shù)胚珠的花ap2-1|花瓣、雄蕊、子房內(nèi)壁和胚珠的發(fā)育異常ap3-1|萼片與花瓣之間模糊不清、雄蕊比正常花少、子房發(fā)育受限與野生型相比，三個突變體的表現(xiàn)均有明顯差異，特別是ap1-1和ap2-1突變體的表現(xiàn)非常顯著。3.2遺傳分析已經(jīng)完成了突變體和野生型的交配和F1代觀察，結(jié)果表明，三個突變體的遺傳模式都是單基因隱性遺傳，F(xiàn)1代表現(xiàn)均與野生型相似。目前正在進行F2代的觀察和分析，預(yù)計在近期可以收集足夠數(shù)量的F2代個體，進行遺傳比例分析和位點定位工作。3.3基因定位基因定位工作還沒有開始，需要等到F2代個體數(shù)量足夠多時才能進行。預(yù)計在下一階段可以開始基因定位工作。4.下一步計劃下一步的實驗工作包括繼續(xù)觀察F2代個體的表現(xiàn)，進行遺傳分析和比例分析，逐漸縮小位點區(qū)域