歸脾湯治療抑郁癥的實驗研究

歸脾湯治療抑郁癥的實驗研究

抑郁是一種情緒障礙精神疾病，歷史悠久。心脾氣血兩虛。歸脾湯對治療效果準(zhǔn)確。本實驗通過慢性應(yīng)激和隔離孤養(yǎng)復(fù)制抑郁癥大鼠模型,探討歸脾湯治療抑郁癥的作用機(jī)制。1材料表面1.1實驗動物中心Wistar大鼠60只,雌雄各半,體質(zhì)量180~220g,黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心,合格證號:SCXK-(黑)2008-0003。1.2制備工藝及試劑歸脾湯由人參6g,木香6g,遠(yuǎn)志6g,黃芪12g,龍眼肉12g,炒酸棗仁12g,白術(shù)9g,茯神9g,當(dāng)歸9g,炙甘草3g組成,購于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院。將以上中藥以10倍量的水浸泡1h,水沸后用文火煎煮40min,過濾;第2次再以8倍量的水煎煮,水沸后用文火煎煮40min,過濾,合并濾液,常壓濃縮成每1mL藥液分別含0.4、0.8、1.6g原生藥材煎出物,冷卻后密封,4℃保存?zhèn)溆?。百?yōu)解(禮來蘇州制藥有限公司,批號:A212624)、T3放射免疫分析試劑盒(北京福瑞生物工程公司,批號:20081103)、T4放射免疫分析試劑盒(北京福瑞生物工程公司,批號:20081104)、TSH放射免疫分析試劑盒(北京福瑞生物工程公司,批號:20081012)。大鼠行為學(xué)觀察敞箱,低速自動平衡離心機(jī)LDZ-2型,恒溫冰箱,微量電子天平,手術(shù)器械。2方法2.1各組實驗結(jié)果適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,參考體質(zhì)量及Open-field評分,將大鼠隨機(jī)分為6組,每組10只。正常組(0.9%生理鹽水10mL/kg)、模型組(0.9%生理鹽水10mL/kg)、百優(yōu)解組(1.8mg/kg)、歸脾湯低劑量組(3.78g/kg)、歸脾湯中劑量組(7.56g/kg)、歸脾湯高劑量組(15.12g/kg)。各組每日灌胃1次,從第22天開始,連續(xù)21d。2.2文獻(xiàn)方法第20d正常對照組每籠飼養(yǎng)5只,在實驗中不接受任何刺激。按參考文獻(xiàn)方法其余各組每籠1只,在實驗的21d內(nèi),接受7種(電擊足底、冰水游泳、傾斜鼠籠、潮濕飼養(yǎng)、晝夜顛倒、禁水、禁食)不同的刺激,每日安排1種,同種刺激不連續(xù)出現(xiàn)。2.3測量的質(zhì)量2.4大鼠濃度和運動成績檢測箱自實驗開始的第0天、第21天和第42天,于大鼠測完體質(zhì)量后用Open-field法(敞箱實驗)進(jìn)行檢測。其檢測箱為一個長1m、寬1m、高0.5m的木箱,底部有25個20cm×20cm的小方格。水平運動得分以大鼠四肢共同處于1個方格內(nèi)為標(biāo)準(zhǔn),計1分;垂直運動得分以前肢抬起、后肢直立為標(biāo)準(zhǔn),計1分。檢測時將大鼠放置于箱子中心,分別統(tǒng)計3min內(nèi)大鼠水平和垂直運動得分。2.5血清厚度t4及血清tsh的測定在實驗第42天,從大鼠股動脈取血2mL,置于含肝素鈉40μL的試管中,混勻,4℃3000r/min離心10min,分離血清,放置-20℃冰箱保存,采用放射免疫分析法(RIA)測定T3、T4及TSH的含量。2.6統(tǒng)計處理數(shù)據(jù)均以ue0af±s表示,用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,組間比較用t檢驗。3結(jié)果3.1體質(zhì)量增長緩慢造模前,各組大鼠體質(zhì)量無明顯差異(P>0.05)。造模21天后,各造模組與正常組比較,大鼠體質(zhì)量增長緩慢(P<0.05)。給藥21天后,歸脾湯高、中、低劑量組及百優(yōu)解組與模型組比較,大鼠體質(zhì)量增長加快(P<0.01),歸脾湯高劑量組增長最快;歸脾湯高劑量組與百優(yōu)解組相比,大鼠體質(zhì)量增長顯著(P<0.05)。結(jié)果見表1。3.2各組大鼠運動情況實驗結(jié)果顯示,造模21d后,各造模組大鼠水平運動和垂直運動得分均低于正常組(P<0.01)。給藥21d后,歸脾湯高、中、低劑量組及百優(yōu)解組大鼠水平運動及垂直運動得分均高于模型組(P<0.01)。歸脾湯高劑量組水平運動得分最高,中劑量組垂直運動得分最高。結(jié)果見表2~3。3.3各組t4、tsh及歸脾湯水平比較實驗結(jié)果顯示,模型組大鼠血清中T3及TSH水平與正常組比較無顯著差異(P>0.05),T4水平低于正常組(P<0.01)。歸脾湯高、中、低劑量組及百優(yōu)解組T3及TSH水平與模型組比較,無顯著差異(P>0.05);給藥各組T4水平高于模型組,歸脾湯高、中劑量組與模型組比較差異極顯著(P<0.01),其中歸脾湯中劑量組提高最顯著。結(jié)果見表4。4增強(qiáng)中醫(yī)抗抑郁作用機(jī)制本實驗測定了各組血清T3、T4及TSH含量,結(jié)果顯示,T3及TSH水平無明顯改變,模型組大鼠血清T4的水平降低,歸脾湯各組T4水平升高,中劑量組提高最顯著。甲狀腺激素能調(diào)節(jié)腦中5-HT能神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng),中樞5-HT有促進(jìn)TSH分泌作用,在甲狀腺激素對TSH的反饋調(diào)節(jié)中,5-HT可能是中間環(huán)節(jié)。歸脾湯能提高T4水平,從而調(diào)節(jié)5-HT的釋放,這可能是歸脾湯抗抑郁的作用機(jī)制之一。抑郁癥發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,與社會心理因素、遺傳因素、生物學(xué)改變密切相關(guān)。神經(jīng)遞質(zhì)學(xué)說、神經(jīng)內(nèi)分泌功能改變學(xué)說及免疫