四螨嗪-聯(lián)苯肼酯液相色譜

四螨嗪·聯(lián)苯肼酯30%懸浮劑高效液相色譜分析(山東省農藥檢定所，山東濟南)AnalysisofClofentezineandBifenazate30%SCbyHPLCLiJing,ZhangXiaowan,DuanYuanhong,JiangShiju(InstitutefortheControlofAgrichemicalsofShandongProvince,ShandongJinan,HPLC,withmethanol-water(80:20V/V)asmobilephase,HypersilCig250×4.6(i.d)mm0.02,thevariationcoeff四螨嗪是一種新型高效殺螨劑，對葉螨的卵和幼、若螨觸殺效果好，不能觸殺成螨，但成螨觸藥后產卵量減少，卵的孵化也受到抑制；聯(lián)苯肼酯是一種新型選擇性葉面用噴霧藥劑，其對螨的各個生活階段有效，且持效期長。二者均為農業(yè)部2014年版《種植業(yè)生產使用低毒低殘留農藥主要品種名錄》中推廣使用的產品，發(fā)展前景較好，目前已有不少企業(yè)有兩種成分混劑的登記，但都是分別進行測定有效成分含量。為了提高檢測速度，拓寬分析方法，我們經過嚴格地分析條件篩選，采用高效液相色譜法對四螨嗪與聯(lián)苯肼酯混劑同時進行分離測定，方法簡便易行，適于生產質量控制。2試驗部分2.1試劑和溶液甲醇：HPLC級；水：新蒸二次蒸餾水；四螨嗪標準品：已知質量分數聯(lián)苯肼酯標準品：已知質量分數≥98.0%;30%四螨嗪·聯(lián)苯肼酯懸浮劑(由某企業(yè)提供)。2.2儀器高效液相色譜儀：島津20AT,具二極管陣列檢測器：色譜工作站；微量進樣器：2.3高效液相色譜操作條件流動相：甲醇+水=80+20(V+V),經濾膜過濾，并進行脫氣：4.0min,四螨嗪5.6min;以上操作參數是典型的，可根據不同儀器特點對給定操作參數作適當調整，以期獲得最佳效果。2.4測定步驟2.4.2試樣溶液的制備稱取試樣0.13g(精確至0.0002g),置于50mL容量瓶中，先加入少量水溶解，再加入甲醇稀釋，超聲振蕩10min冷卻至室溫后，用甲醇定容至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜過濾，備用。2.4.3測定在上述條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數針標樣溶液，計算各針響應值的重復性，待相鄰兩針的相對響應值變化<1.5%,按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。圖1四螨嗪和聯(lián)苯肼酯混劑液相色譜圖2.4.4計算將測得的2針試樣溶液及試樣前后2針標樣溶液中的四螨嗪和聯(lián)苯肼酯峰面積，按下式計算。式中：Ay—標樣溶液中四螨嗪(聯(lián)苯肼酯)的峰面積；A?—試樣溶液中四螨嗪(聯(lián)苯肼酯)的峰面積；P—標樣中四螨嗪(聯(lián)苯肼酯)的質量分數，%。3.1.1檢測波長的選擇利用二極管圖(圖2),從圖中可以看出四螨嗪在194nm,聯(lián)苯肼酯在200nm處有最大吸收，考慮到分離好、且避免溶劑及雜質干擾和峰面積、峰高的比例，故選用270nm作為檢測波長。3.1.2色譜柱和流動相的選擇分離柱采用常用的Cig柱，從分離時間和效果考慮，選定250mm×4.6mm(id)Cis不銹鋼柱。分別選用甲醇和水配成不同的流動相，反復篩選進樣，得到不同的分離效果圖。經過多種分離情況對比，選定流動相為甲醇+水=80+20(V+V),流速為1.0mL/min時，有效成分與雜質能夠互不干擾分離，峰形對稱，基線平穩(wěn)，保留時間3.2方法的線性相關性分別移取2.4.1中1、3、5、7、9mL標樣母液于10mL容量瓶中，用甲醇定容，搖勻，各自配成5個不同濃度的標準溶液，在選定的操作條件下進樣，分別積為縱坐標繪制標準曲線(圖3),得出四螨嗪線性回歸方程為y=2.4E+7x-27151,線性相關系數為0.9999,聯(lián)苯肼酯線性回歸方程為y=1.0E+7x+21127,線性相關系數為0.9998。濃度(mg/nL)3.3方法的精密度測定按上述處理方法，同樣的儀器條件，取同一樣品，進行5次平行測定，計算標準偏差和變異系數。結果統(tǒng)計四螨嗪和聯(lián)苯肼酯的標準偏差分變?yōu)?.01、0.02,變異系數分別為0.08%、0.15%(表1).表明該分析方法精密度良好。表1四螨嗪·聯(lián)苯肼酯30%懸浮劑精密度測定結果表編號12345變異系數聯(lián)苯肼酯3.4方法的準確度稱取已知含量的四螨嗪·聯(lián)苯肼酯30%懸浮劑樣品和已知量標準品配成5個已知樣品，按分析條件和操作方法進行定量回收率測定。測得四螨嗪和聯(lián)苯肼酯的平均回收率分別為99.8%和99.8%(表2)。組分樣品中有效成分質量(mg)加入標準品質量(mg)理論質量實測質量回收率平均回收率l四螨嗪23)45聯(lián)苯肼酯1234)