分子生物學-試題及答案

PAGE分子生物學試題（四）注名詞解釋（14）1.DNA的半不連續(xù)復制2.聚合酶鏈式反應(yīng)3.核酸雜交4.增強子5.內(nèi)含子6.鋅指（zincfinger）7.轉(zhuǎn)座子8.擺動假說9.基因10.基因家族二、填空題（20）1.酵母DNA按摩爾計含有32.8%的T,則A為________,G為__________和C為____________.2.核酸變性后可發(fā)生___________效應(yīng).3.在真核生物中DNA復制的主要酶是____________5.操縱子包括_______,__________和__________.6.DNA合成儀合成DNA片斷時，用的原料是、、、、。7大腸桿菌DNA依賴的RNA聚合酶由α2ββ‘σ五個亞基組成，亞基與轉(zhuǎn)錄啟動有關(guān)。8.在瓊脂糖電泳中，DNA會向極移動。9.染色體包括、兩大部分。三、判斷題（10）1增強子的作用具有細胞或組織的特異性。2.由于密碼子存在搖擺性，使得一種tRNA分子常常能夠識別一種以上同一種氨基酸的密碼子。3.原核生物中封閉性啟動子復合物為二元復合物，開放性啟動子復合物為三元復合物。4.半保留復制是指有50%的基因是新合成的，另50%的基因是上一代的。5.基因組DNA復制時，先導鏈的引物是DNA，后隨鏈的引物是RNA()6.蛋白質(zhì)由二十種氨基酸組成，包括胱氨酸。(-)7.色氨酸操縱子（trpoperon）中含有衰減子序列（）8.對正調(diào)控和負調(diào)控操縱子而言，誘導物都能促進基因的轉(zhuǎn)錄（）四、問答題（16）1.簡述tRNA的結(jié)構(gòu)特征及其作用與作用機制。(8)2.比較原核生物與真核生物基因表達調(diào)控的異同點。（8）3.遺傳密碼的性質(zhì)（6）4.圖示大腸桿菌復制叉的結(jié)構(gòu)并標明各組分結(jié)構(gòu)（12）5.比較原核生物與真核生物基因組結(jié)構(gòu)的不同，并指出真核生物細胞的RNA內(nèi)含子剪接的主要方式（12）。五、實驗題1．PCR原理2．CTAB法提取總DNA原理分子生物學試題（四）參考答案名詞解釋（10′）1.RNA編輯（RNAediting）—是某些RNA，特別是mRMA的一種加工方式，它導致了DNA所編碼的遺傳信息的改變，是因為經(jīng)過編輯的mRNA序列發(fā)生了不同于模板DNA的變化。2.反密碼子—tRNA上能與密碼子以堿基互補方式配對的對應(yīng)堿基，一般具有“擺動性”。3.轉(zhuǎn)座子（transposon）—是存在于染色體DNA上可自主復制和位移的基本單位。4.基因（gene）—產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所必須的全部核苷酸序列。5.基因簇(genecluster)—真核生物中許多相關(guān)的基因常按功能成套組合，被稱為基因家族，同一家族的成員有時緊密的排列在一起，成為基因簇。二、填空題（每空1′共20′）1.增色效應(yīng)2.不重復序列、中度重復序列、高度重復序列3.調(diào)控基因、調(diào)控蛋白結(jié)合位點和結(jié)構(gòu)基因。4.變性、退火、延伸。5.α2ββ′ω，σ。6.肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌體感染大腸桿菌。7.螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋、鋅指、堿性-亮氨酸拉鏈。三、判斷題（每題2′，共10′）1.由于密碼子存在搖擺性，使得一種tRNA分子常常能夠識別一種以上同一種氨基酸的密碼子。（╳）答：是由于反密碼子具有搖擺性而不是密碼子，是由于密碼子具有簡并性。2.半保留復制是指有50%的基因是新合成的，另50%的基因是上一代的。（╳）答：半保留復制指的是復制時只能以一條鏈為模板，復制出新鏈，后代與前代有相同的遺傳信息。3.凝膠的分辨能力同凝膠的類型和濃度有關(guān)，濃度越低，分辨力越強。(╳)答：濃度越低，分辨力越弱。4.色氨酸操縱子中含有弱化子序列。（√）答：色氨酸操縱子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控除了阻遏系統(tǒng)外，還有弱化子系統(tǒng)。5.蛋白質(zhì)由二十種氨基酸組成，包括胱氨酸。(╳)答：不包括胱氨酸，蛋白質(zhì)中的胱氨酸是蛋白質(zhì)合成后通過個半胱氨酸的氧化作用形成的。四、問答題（26′）1.原核生物與真核生物啟動子的主要差別？（6′）答：原核生物真核生物TTGACATATAAT起始位點增強子GCCAATTATAA—5mGpp—起始位點35-10-110-70-252.利用雙脫氧末端終止法（Sanger法）測定DNA一級結(jié)構(gòu)的原理與方法。(10′)答：原理是：采用核苷酸鏈終止劑—2，，3，-雙脫氧核苷酸終止DNA的延長。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂鍵所需要的3-OH，一旦參入到DNA鏈中，此DNA鏈就不能進一步延長。根據(jù)堿基配對原則，每當DNA聚合酶需要dNMP參入到正常延長的DNA鏈中時，就有兩種可能性，一是參入ddNTP,結(jié)果導致脫氧核苷酸鏈延長的終止；二是參入dNTP,使DNA鏈仍可繼續(xù)延長，直至參入下一個ddNTP。根據(jù)這一方法，就可得到一組以ddNTP結(jié)尾的長短不一的DNA片段。方法是：分成四組分別為ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反應(yīng)后，聚丙烯酰胺凝膠電泳按泳帶可讀出DNA序列。3.圖示大腸桿菌復制叉的結(jié)構(gòu)并標明各組分結(jié)構(gòu)（10′）答：有：DNA解旋酶、DNA旋轉(zhuǎn)酶、DNA單鏈結(jié)合蛋白、RNA引物、DNA連接酶、DNA聚合酶、其它成分。圖略。五、論述題（兩題共24′）1.在轉(zhuǎn)錄與翻譯過程中，合成多肽鏈的正確性是如何保證的。（12′）答案要點：=1\*GB3①從轉(zhuǎn)錄過程中保證mRNA的正確性因素：如，正確的起始，加上正確的堿基，正確的終止位點的因子，轉(zhuǎn)錄后加工編輯；=2\*GB3②翻譯過程中保證加上正確氨基酸的機制，翻譯后加工等方面。2.比較原核生物與真核生物基因組結(jié)構(gòu)的不同，并指出真核生物細胞的RNA內(nèi)含子剪接的主要方式（12′）。答案要點：主要從重復序列情況，有無內(nèi)含子外顯子方面論述，剪接的主要方式指GU-AG和AU-AC類內(nèi)含子的間接以及=1\*ROMANI、=2\*ROMANII類內(nèi)含子的間接方式。六、實驗題（10′）（任選一題，全作該題不得分）1.CTAB法提取總DNA原理答案要點：基本原理是先用機械的方法使組織和細胞破碎，然后加入離子型表面活性劑，溶解細胞膜和核膜蛋白，是細胞膜和核膜破裂，進入細胞核內(nèi)的表面活性劑解聚核中的核蛋白并與蛋白質(zhì)形成混合物，再加入酚和氯仿等表面活性劑使蛋白質(zhì)變性；經(jīng)離心除去植物的組織和變性蛋白，上清中加入無水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得植物總DNA溶液。2.設(shè)計一個實驗證明DNA的復制是半保留復制。答案要點：先將大腸桿菌放在15NH4C1培養(yǎng)基中生長多代，使幾乎所有的DNA都被15N標記后，再將細菌移到只含有14NH4C1的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。隨后，在不同的時間取出樣品，用十二烷硫酸鈉(SDS)裂解細胞后，將裂解液放在CsC1溶液中進行密度梯度離心(140000g，20小時)。離心結(jié)束后，從管底到管口，溶液密度分布從高到低形成密度梯度。DNA分子就停留在與其相當?shù)腃sC1密度處，在紫外光下可以看到形成的區(qū)帶。14N-DNA分子密度較輕(1.7g/cm3)，停留在離管口這較近的位置;15N-DNA密度較大停留在較低的位置上。當含有15N-DNA的細胞在14NH4C1培養(yǎng)液中培養(yǎng)一代后，只有一條區(qū)帶介于14N-DNA與15N-DNA之間，這時