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文檔簡介
操作對象:早期胚胎和配子技術(shù)手段:胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細胞培養(yǎng)等理論根底:哺乳動物的受精卵和早期胚胎的發(fā)育規(guī)律胚胎工程的概念:1.胚胎工程的建立一.胚胎移植技術(shù)的研究胚胎移植技術(shù)成為許多胚胎工程不可缺少的根底環(huán)節(jié)。二.胚胎移植技術(shù)的成功和應(yīng)用帶動和加速了體外受精技術(shù)的研究。三.胚胎移植和體外受精使胚胎分割、性別鑒定、體細胞克隆、轉(zhuǎn)基因胚胎、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術(shù)應(yīng)運而生。2.知識網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建:胚胎工程胚胎工程的應(yīng)用胚胎移植胚胎分割根本程序移植的生理學根底體外受精和早期胚胎培養(yǎng)試管動物技術(shù)體外受精早期胚胎培養(yǎng)體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育精子的發(fā)生卵子的發(fā)生受精早期胚胎發(fā)育胚胎干細胞3.一、體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育〔一〕、精子和卵子的發(fā)生〔二〕、受精〔三〕、胚胎發(fā)育4.〔一〕1、精子的發(fā)生1〕、場所:2〕、時期:3〕、過程:睪丸〔的曲細精管〕從初情期開始直到生殖功能衰退發(fā)生的過程大體可分為三個階段5.精原細胞有絲分裂初級精母細胞次級精母細胞精子細胞精子MⅠ第一階段第二階段第三階段MⅡ精子發(fā)生的過程多個精原細胞染色體復(fù)制變形6.7.精子細胞變形中的主要變化:1.細胞核——2.高爾基體——3.中心體——4.線粒體——5.細胞內(nèi)其他物質(zhì)——精子頭的主要局部頭部的頂體精子的尾線粒體鞘(尾的基部)原生質(zhì)滴(球狀,最后脫落)8.2.卵子的發(fā)生1)發(fā)生部位:卵巢2)時間:胚胎性別分化以后直至生殖機能衰退減數(shù)第一次分裂在雌性動物排卵前后完成;減數(shù)第二次分裂在精子和卵子結(jié)合的過程中完成。9.卵泡=卵泡細胞+初級卵母細胞卵子=次〔初〕級卵母細胞+透明帶+放射冠排卵=卵子從卵泡中排出10.卵原細胞有絲分裂多個卵原細胞染色體復(fù)制初級卵母細胞MⅠ第一極體次級卵母細胞兩個第二極體第二極體卵子退化消失〔3、卵子發(fā)生過程MⅡ排卵前后完成在受精過程完成被卵泡細胞包圍,形成卵泡胎兒期完成11.誤點警示:1、一個卵泡中一般能形成一個成熟的卵子。2、排卵是指卵子從卵泡中排出而不是指卵泡從卵巢中排出。3、剛排出的卵子尚未完全成熟,一般僅完成減數(shù)第一次分裂,需要在輸卵管內(nèi)進一步成熟。12.〔二〕受精1、受精部位:2、受精標志:在卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個極體時。輸卵管13.受精階段:1)精子穿越放射冠和透明帶頂體反響使頂體內(nèi)的酶釋放出來并溶解放射冠內(nèi)的卵丘細胞透明帶反響是防止多精入卵受精的第一道屏障2)精子進入卵黃膜卵黃膜封閉作用是防止多精入卵受精的第二道屏障3)原核形成:雄原核形成和雌原核形成4)配子結(jié)合:雌雄原核融合形成合子(受精卵)14.3、過程受精前的準備階段受精階段精子獲能〔在雌性動物生殖道〕卵子獲能〔到達減數(shù)第二次分裂中期時才具備與精子受精的能力〕15.放射冠(卵丘細胞)透明帶卵黃膜細胞核第一極體發(fā)生頂體反響,穿越放射冠16.
穿過透明帶發(fā)生透明帶反響17.
精子進入卵子后,其細胞核變大到和卵子細胞核相似,精子細胞核(雄原核)和卵子細胞核(雌原核)同時向細胞中部靠攏,并相互融合成一個細胞核,這時稱受精卵。形成受精卵:18.精、卵相遇頂體反響頂體酶釋放頂體酶溶解透明帶接觸透明帶穿越放射冠溶解卵丘細胞〔放射冠〕穿越透明帶接觸卵黃膜產(chǎn)生透明帶反響形成第一道屏障〔作用〕精子被微絨毛抱合精子外膜與卵黃膜融合精子進入卵19.精子進入卵后變化①變化②變化③產(chǎn)生卵黃膜封閉作用形成第二道屏障〔作用〕尾部脫離核膜破裂形成雄原核形成雌原核激活卵子完成減數(shù)第二次分裂,排出第二極體發(fā)育移動接觸合并形成受精卵20.誤點警示:1、成熟的精子無受精能力,需要在生殖道內(nèi)獲能前方能受精。2、動物排出的卵子并未成熟,只有到達減數(shù)第二次分裂中期時,才具備受精能力。3、受精卵的遺傳物質(zhì)中,核遺傳物質(zhì)一半來自精子,一半來自卵子,質(zhì)遺傳物質(zhì)幾乎全來自卵子。21.4.意義
維持每種生物前后代體細胞中染色體數(shù)目的恒定;對于生物的遺傳和變異十分重要。22.〔三〕胚胎發(fā)育受精卵2細胞4細胞8細胞桑葚胚23.受精卵卵裂期桑椹胚囊胚〔內(nèi)含囊胚腔〕原腸胚〔內(nèi)含原腸腔〕胎兒形成由具有全能性細胞構(gòu)成,細胞數(shù)在32個左右,排列緊密,形似桑椹內(nèi)細胞團:發(fā)育成胎兒各組織滋養(yǎng)層細胞:發(fā)育成胎膜和胎盤:最初發(fā)育在輸卵管進行有絲分裂1、胚胎發(fā)育過程一孔:胚孔二腔:擴大的原腸腔,縮小的囊胚腔三胚層:外胚層,中胚層,內(nèi)胚層24.內(nèi)細胞團:發(fā)育成胎兒各組織滋養(yǎng)層細胞:發(fā)育成胎膜和胎盤囊胚〔內(nèi)含囊胚腔〕〔開始分化)25.一孔:胚孔二腔:擴大的原腸腔,縮小的囊胚腔三胚層:外胚層,中胚層,內(nèi)胚層原腸胚〔內(nèi)含原腸腔〕26.誤點警示:1、發(fā)育中的細胞分裂均為有絲分裂,原腸胚階段是個體發(fā)育中分化程度最高的階段,但要注意細胞分化貫穿整個個體發(fā)育過程中。2、桑椹胚以前的細胞均未分化,細胞全能性高,是胚胎分割的最正確時期3、桑椹胚到囊胚的發(fā)育過程中,細胞開始分化,但其全能性仍很高,也可用于胚胎分割27.例:研究說明,大多數(shù)動物如蛙的受精卵在卵裂期隨著卵裂的進行胚胎的體積并不增大,但胚胎細胞核的總質(zhì)量與細胞質(zhì)的總質(zhì)量〔核/質(zhì)〕比值卻發(fā)生變化。以下符合卵裂期核質(zhì)質(zhì)量比值變化趨勢的示意圖是()ACDBACDA28.二、體外受精和早期胚胎培養(yǎng)〔一〕、試管動物技術(shù)〔二〕、體外受精〔三〕、早期胚胎培養(yǎng)29.
是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)?!惨弧吃嚬軇游锛夹g(shù)30.1982年世界首例試管牛犢問世實現(xiàn)良種??焖俅罅糠敝呈紫纫龅氖?/p>
和
的培養(yǎng)。體外受精早期胚胎31.1.卵母細胞的采集和培養(yǎng)〔1〕卵細胞的采集:a小型動物如小鼠、兔,以及家畜豬、羊等注射促性腺激素,使其超數(shù)排卵,從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。b大家畜或大型動物,如牛,采用的主要方法:從屠宰場已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞,也可以借助超聲波(B超)探測儀、內(nèi)窺鏡或腹腔鏡等工具確定卵泡位置,直接從活體動物中吸取泡卵液〔連同卵母細胞〕取出,在體外進行人工培養(yǎng),使其成熟。32.2.精子的收集和獲能收集精子的方法有:假陰道法手握法電刺激法33.在體外受精前,要對精子進行獲能處理。通常采用的體外獲能方法有培養(yǎng)法和化學誘導(dǎo)法兩種。對于嚙齒動物、家兔和豬的精子,一般采用培養(yǎng)法;對于牛、羊等家畜的精子常用化學法。培養(yǎng)法:精子在獲能液中獲能。化學誘導(dǎo)法:精子一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中,用化學藥物誘導(dǎo)獲能。34.3.受精獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子,一般情況下在獲能溶液或?qū)S檬芫芤褐型瓿墒芫^程。35.發(fā)育培養(yǎng)液:(兩鹽、兩素、兩酸、水和血清等〕無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及水、動物血清等?!踩场⑴咛サ脑缙谂囵B(yǎng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時,可取出向受體移植或冷凍保存36.試管動物與克隆動物的區(qū)別試管動物克隆動物生殖方式技術(shù)手段遺傳規(guī)律有性生殖無性生殖試管動物技術(shù)動物細胞核移植技術(shù)遵循不遵循37.三、胚胎工程的應(yīng)用及前景〔一〕、胚胎移植〔二〕、胚胎分割〔三〕、胚胎干細胞的培養(yǎng)38.〔一〕、胚胎移植1、概念:將雌性動物的早期胚胎,或者通過其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個體的技術(shù)。2、胚胎移植的生理學根底1)供體和受體相同的生理環(huán)境2)早期胚胎處于游離狀態(tài),為胚胎的收集提供了可能3)受體對移入子宮的胚胎根本上不發(fā)生免疫排斥4)胚胎與受體建立正常的聯(lián)系,但遺傳物質(zhì)沒有改變39.選擇供體母牛受體母?!诎l(fā)情處理……超數(shù)排卵供體公牛配種沖卵質(zhì)量檢查、培養(yǎng)胚胎移植妊娠檢查分娩〔胚胎移植的犢?!?、胚胎移植的根本程序40.4、胚胎移植的條件和時間〔1〕胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌性供體和受體之間進行?!?〕進行胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要相同。5、胚胎移植的意義
可充分發(fā)揮優(yōu)秀個體的繁殖潛能,縮短繁殖周期,增加一生繁殖的后代數(shù)量41.1.概念:采用機械方法將早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。2.特點:后代具有相同的遺傳物質(zhì)〔無性繁殖或克隆〕3.選擇的胚胎:發(fā)育良好的,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。4.分割要求:內(nèi)細胞團均等分割5.存在的問題〔二〕、胚胎分割42.1.概念:簡稱ES或EK細胞,是由早期胚胎或原始性腺中別離出來的一類細胞?!踩?、胚胎干細胞的培養(yǎng)2.分類:全能干細胞、多能干細胞、專能干細胞43.4.主要用途(1)治療人類的某些頑癥(2)培育出人造組織器官,用于器官移植(3)是研究體外細胞分化的理想材料3.特點:1)形態(tài):體積小,細胞核大,核仁明顯。2)功能:具有發(fā)育的全能性??煞只癁槌赡陝游矬w內(nèi)任何一種組織細胞。3〕在體外培養(yǎng)的條件下,ES細胞可以增殖而不發(fā)生分化。對它可以進行冷凍保存,也可以進行遺傳改造。44.本專題中共涉及到了哪些培養(yǎng)液,它們的作用分別是什么?獲能溶液:使精子獲能或精卵結(jié)合完成受精作用一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液:使精子獲能專用的受精溶液:完成受精作用發(fā)育培養(yǎng)液:檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力動物細胞培養(yǎng)液:培養(yǎng)動物細胞如卵
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