實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的研究方案進(jìn)展與應(yīng)用

摘要：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)通過檢測PCR產(chǎn)物中熒光訊號(hào)強(qiáng)度來到達(dá)定量的目的，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前已在動(dòng)植物基因工程，微生物和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。本文對(duì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的原理，檢測方法的原理、優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)展了評(píng)述，重點(diǎn)及創(chuàng)新點(diǎn)是對(duì)PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，食品行業(yè)，植物方面的應(yīng)用進(jìn)展了比較全面的綜述，并對(duì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的普及應(yīng)用及領(lǐng)域的前景做了進(jìn)一步的展望。關(guān)鍵詞：實(shí)時(shí)熒光定量PCR;應(yīng)用；展望AbstractRealtimePCRtechnologautomationhasbeenwidelyusemicrobesandmedicinefielindustryplantaspectsoftheappprospectsandrealtimePCRtechnology聚合酶鏈反響(PCR)技術(shù)自1985年問世以來，以其靈敏性高、特異性強(qiáng)和速度快在分子生物學(xué)等科研領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。但是，由于傳統(tǒng)的PCR技術(shù)不能準(zhǔn)確定量，在操作過程中易受污染而使假陽性率偏高；因此，使其應(yīng)用受到限制。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)擁有特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、定量準(zhǔn)確、速度快、全封閉反響等優(yōu)點(diǎn)，已成為了分子生物學(xué)研究的重要工具。文章對(duì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的原理、檢測方法、定量方法及其應(yīng)用進(jìn)展了綜述。設(shè)計(jì)出不同的molecularbeaconLightcycler(2)比較Ct值的相對(duì)定量法2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用.量檢測。趙衛(wèi)東等[26]通過熒光定量的方法對(duì)各細(xì)胞株的轉(zhuǎn)錄因子T-box作為相關(guān)食品法規(guī)的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。日本和美國等13個(gè)實(shí)驗(yàn)FQPCR本、樣品處理及多基因同時(shí)分析等問題。生物芯片技術(shù)與熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合將有助于上述問題的解決[321,屆時(shí)將大大推動(dòng)該技術(shù)在生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用普及，特別是臨床診斷領(lǐng)域的推廣。隨著科學(xué)技術(shù)與科學(xué)知識(shí)的增長，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)將繼續(xù)被改進(jìn)，新的問題被攻克，從而建設(shè)更新、更便捷、更完善的PCR體系，并應(yīng)用到更廣、更深的科學(xué)領(lǐng)域。evaluatinguncertaintyofabsoluterealtimePCRquspecificityofstructuredDNAprobesProcNatlAcadSciUpolymerasechainreactionforhepatitisBHollandPMAbramsonRDWachainreactionproductbyutilizingtheexonDNApolymerase.Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1991,88:727ofspecificDNAsequences.Biotechnology,1992,10:413.HiguchiRFocklerCetalKinhybridization.NationalBiotechnology,1996,14ofrapidcycleDNAamplifimultisamplefluorimeterwithrapidtemperaturecontroMayerZFrberPGeisenRMonitoringthemeasuringtheconcentratioanddetectionofgenepromoterhypermAndersenCLJeusenJLOrsets[J].CancerRes.,2004diseaseinacutepromyelocyticleukemiforthedetectionofminimalresijunct