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植物組織培育技術(shù)主要內(nèi)容植物組織的根本概念植物組織培育的過(guò)程植物組織培育影響要素植物組織培育實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置植物組織培育的根本概念(1)植物組織培育:在無(wú)菌培育的條件下,將離體的植物器官〔根,莖,葉,花,果實(shí)等〕、組織〔構(gòu)成層,花藥組織等〕、細(xì)胞〔體細(xì)胞,生殖細(xì)胞等〕以及原生質(zhì)體等培育在人工配制的培育基上,并給予適當(dāng)?shù)呐嘤龡l件,使其長(zhǎng)成完好植株的過(guò)程。
(2)外植體:從活體植株上切下的,用于組織培育的細(xì)胞、組織和器官。普通包括莖尖、根、莖、葉、花、種子等器官以及他們構(gòu)成的體細(xì)胞胚等資料。(3)脫分化:曾經(jīng)高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞,在切割損傷和培育物內(nèi)外要素的共同作用下,逐漸喪失原來(lái)的分化構(gòu)造和功能,最后構(gòu)成無(wú)組織的細(xì)胞團(tuán)或愈傷組織的過(guò)程。(4)愈傷組織:在人工培育基上由外植體脫分化構(gòu)成的一團(tuán)無(wú)序生長(zhǎng)的薄壁細(xì)胞?!簿哂屑?xì)胞分裂才干〕(5)胚狀體:在離體植物細(xì)胞、組織或器官培育過(guò)程中,由一個(gè)或一些體細(xì)胞,經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生和發(fā)育過(guò)程,構(gòu)成的與合子胚相類似的構(gòu)造。(6)再分化:曾經(jīng)脫分化的細(xì)胞在一定條件下,又可經(jīng)過(guò)愈傷組織或胚狀體,再分化出根和芽,構(gòu)成完好植株,這一過(guò)程叫作再分化。(7)不定芽:凡從葉、根、或莖節(jié)間等通常不構(gòu)成芽的部位生出的芽,那么統(tǒng)稱為不定芽(8)植物組織器官發(fā)生途徑〔見(jiàn)以下圖〕MS培育基的配制操作步驟〔1〕MS培育基母液的配制:MS培育基含有十幾多種化合物,配制不方便也難稱量準(zhǔn)確,可將培育基中的各種成分?jǐn)U展一定倍數(shù)分別稱量,配成濃縮液,這種濃縮液叫做培育基母液。(母液配制見(jiàn)下表)〔2〕MS培育基的配制:按比例分別取適量各種成分的母液,參與燒杯,稱取蔗糖30g,瓊脂7g,加水并加熱使瓊脂溶解,按照需求的濃度分別參與激素,用1mol/LNaOH和1mol/LHCl溶液調(diào)理pH至5.8~6.0。將配好的培育基迅速分裝至150ml組培瓶中,擰上蓋子,放入滅菌鍋121℃,滅菌20min。植物組培詳細(xì)操作步驟〔1〕取材:取菊花生長(zhǎng)旺盛的嫩枝(外植體不能太小,否那么會(huì)影響愈傷組織的構(gòu)成)。〔2〕消毒:①流水沖洗后,加少許洗衣粉刷洗,流水沖20分鐘;②放入75﹪酒精中搖動(dòng)2~3次,繼續(xù)30秒,無(wú)菌水沖洗2~3次,用無(wú)菌吸水紙吸干;③在2﹪~10%的次氯酸鈉溶液中消毒8~10分鐘,無(wú)菌水沖洗2~3次,無(wú)菌吸水紙吸干。〔3〕接種:常用滅菌劑運(yùn)用濃度及效果比較表植物組織培育消毒與接種表示圖無(wú)菌苗培育〔1〕愈傷組織與不定芽的誘導(dǎo)培育選用適宜的培育基分別對(duì)植物資料進(jìn)展愈傷組織和不定芽的誘導(dǎo)。〔2〕生根培育選用生根培育基對(duì)無(wú)菌苗進(jìn)展生根培育?!?〕資料的移栽及溫室培育:煉苗:先在外界環(huán)境閉瓶鍛煉3天,再開(kāi)瓶鍛煉3天〔以培育基上開(kāi)場(chǎng)長(zhǎng)出菌為宜〕。移栽:去凈培育基,可先在滅過(guò)菌的珍珠巖或蛭石上培育使根系興隆再轉(zhuǎn)移到土壤中。第五章影響植物組織培育的影響要素及本卷須知影響植物組織培育的幾個(gè)要素植物的資料
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