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文檔簡(jiǎn)介
農(nóng)藥殘留快速測(cè)試儀操作技能培訓(xùn)
2012.5.4一、農(nóng)藥殘留檢測(cè)介紹二、儀器介紹三、實(shí)驗(yàn)操作流程介紹1、實(shí)驗(yàn)原理在一定條件下,膽堿酯酶對(duì)底物分解反應(yīng)的催化能力與其活性成正相關(guān)。而有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用農(nóng)藥殘留快速測(cè)試儀測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值(△A)計(jì)算出抑制率(I),通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中的酶抑制率法檢測(cè)農(nóng)藥殘留)
I=(△A0-△At)/△A0×100%其中:I:酶的抑制率△A0:對(duì)照溶液吸光度隨時(shí)間的變化值△At:樣品溶液吸光度隨時(shí)間的變化值2、國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003規(guī)定:樣品農(nóng)藥殘留對(duì)乙酰膽堿酯酶抑制率≥50%時(shí)為樣品農(nóng)藥殘毒超標(biāo),抑制率<50%時(shí)為農(nóng)藥殘毒不超標(biāo)。在實(shí)際檢測(cè)中,當(dāng)樣品抑制率≥50%時(shí),特別是50%-60%時(shí),建議復(fù)測(cè)或留樣送氣相檢測(cè)。二、儀器介紹
GNSPR-16D農(nóng)藥殘留快速測(cè)試儀是根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T5009.199-2003》標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)要求來(lái)設(shè)計(jì)的??蓪?duì)果蔬中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的含量進(jìn)行快速準(zhǔn)確的檢測(cè)。該儀器可廣泛應(yīng)用于各級(jí)政府蔬菜檢測(cè)中心、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市、環(huán)保、蔬菜種植基地、飯店等單位對(duì)果蔬中農(nóng)藥殘留的測(cè)定。LED光源比色池光電傳感器微處理器微型打印機(jī)1.儀器組成2.儀器正常工作條件環(huán)境溫度5℃~35℃。室內(nèi)相對(duì)濕度不大于85%。儀器應(yīng)放在平穩(wěn)的工作臺(tái)上,無(wú)陽(yáng)光直射及強(qiáng)烈的電磁場(chǎng)干擾。室內(nèi)無(wú)腐蝕性氣體。工作電源:a、電源:AC220V50Hz/60Hzb、12V車載電源(可選)3.儀器結(jié)構(gòu)
GNSSP-16D儀器全圖
GNSSP-16D儀器后視圖4.儀器按鍵基本功能
5、儀器操作開(kāi)機(jī)/關(guān)機(jī)系統(tǒng)管理歷史數(shù)據(jù)清空開(kāi)機(jī)/關(guān)機(jī)接入市電100~230V50/60Hz打開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān)“正在啟動(dòng)”儀器顯示“請(qǐng)稍候……”1-2s后儀器顯示請(qǐng)取出測(cè)量室中所有樣品,關(guān)閉測(cè)量室蓋,并按〈
〉鍵按〈
〉鍵儀器顯示系統(tǒng)正在自檢,請(qǐng)稍候!儀器顯示待機(jī)檢測(cè)界面自檢完畢后待機(jī)檢測(cè)界面關(guān)機(jī)時(shí)直接關(guān)閉儀器的電源開(kāi)關(guān)。注意:儀器開(kāi)機(jī)進(jìn)入待機(jī)檢測(cè)界面預(yù)熱20分鐘后再使用,則儀器工作更加穩(wěn)定,測(cè)量結(jié)果更加準(zhǔn)確。
每次開(kāi)機(jī)時(shí)應(yīng)取出測(cè)量室中所有的樣品。系統(tǒng)管理待機(jī)檢測(cè)界面系統(tǒng)管理界面按<C>鍵約3秒系統(tǒng)管理1—數(shù)據(jù)查詢2—參數(shù)設(shè)置3—聯(lián)機(jī)4—顯示設(shè)置5—打印設(shè)置C—返回系統(tǒng)管理a.數(shù)據(jù)查詢b.參數(shù)設(shè)置c.聯(lián)機(jī)d.顯示設(shè)置e.打印設(shè)置a.數(shù)據(jù)查詢按〈1〉+〈
〉或按↑、↓鍵+〈
〉按2鍵按1鍵系統(tǒng)管理界面查詢結(jié)果注意:若需要打印查詢結(jié)果,按〈↑〉、〈↓〉鍵移動(dòng),按<M>鍵翻頁(yè),按<L>鍵選中所需打印的查詢項(xiàng)目,且選定的數(shù)據(jù)序號(hào)前出現(xiàn)一個(gè)“s”,最后再按<P>鍵即可完成所選項(xiàng)目的結(jié)果打印。b.參數(shù)設(shè)置按〈2〉+〈
〉或按↑、↓鍵+〈
〉系統(tǒng)管理界面參數(shù)設(shè)置界面按〈M〉鍵移動(dòng)光標(biāo)選擇所要修改的數(shù)字項(xiàng),直接輸入數(shù)字進(jìn)行修改,也可以通過(guò)〈↑〉、〈↓〉鍵或〈L〉、〈B〉鍵進(jìn)行修改。注意:
測(cè)量時(shí)間和延遲時(shí)間的單位是秒;
延遲時(shí)間是指按〈B〉鍵或〈M〉鍵測(cè)試時(shí)儀器的等待時(shí)間,建議設(shè)置延遲時(shí)間10秒,這樣儀器將更加穩(wěn)定,測(cè)試結(jié)果更準(zhǔn)確。c.聯(lián)機(jī)按〈3〉+〈
〉或按↑、↓鍵+〈
〉d.顯示設(shè)置按〈4〉+〈
〉或按↑、↓鍵+〈
〉按〈↑〉、〈↓〉鍵可使背光開(kāi)關(guān)在“開(kāi)”和“關(guān)”之間切換。設(shè)置完畢后按〈
〉鍵確認(rèn)。e.打印設(shè)置按〈5〉+〈
〉或按↑、↓鍵+〈
〉打印設(shè)置界面按〈M〉鍵可移動(dòng)光標(biāo)選擇“即時(shí)打印”或“打印模式”,再按〈↑〉、〈↓〉鍵,可使即時(shí)打印在“開(kāi)”和“關(guān)”之間切換,打印模式在“合列”和“分列”之間切換。出廠默認(rèn)設(shè)置即時(shí)打印“關(guān)”,打印模式“合列”。歷史數(shù)據(jù)清空單獨(dú)刪除歷史數(shù)據(jù):儀器在數(shù)據(jù)查詢狀態(tài)下,按〈↑〉、〈↓〉鍵移動(dòng)光標(biāo)選擇要?jiǎng)h除的數(shù)據(jù),再按〈B〉鍵刪除;清空歷史數(shù)據(jù):按〈C〉鍵約3秒進(jìn)入系統(tǒng)管理界面,按〈E〉鍵后按〈P〉鍵,儀器顯示“要清空數(shù)據(jù)嗎?”,按〈
〉鍵確認(rèn),儀器顯示“正在清空數(shù)據(jù)”。數(shù)據(jù)清除完成后將自動(dòng)返回系統(tǒng)管理界面。注意:清除以后的數(shù)據(jù)將無(wú)法恢復(fù)。6、主要配件介紹電子秤移液器電子秤使用說(shuō)明1、按鍵功能:鍵:系統(tǒng)在開(kāi)機(jī)狀態(tài)下按下此鍵,則關(guān)機(jī);系統(tǒng)在關(guān)機(jī)狀態(tài)下按此鍵,則開(kāi)機(jī);鍵:系統(tǒng)在開(kāi)機(jī)狀態(tài)下按下此鍵,則做到歸零提示;②扣重功能:稱重時(shí),按鍵,起扣重作用,數(shù)字顯示0.0g(注意:稱重重量=最大稱量-扣重量);Unit鍵:系統(tǒng)在開(kāi)機(jī)狀態(tài)下按此鍵,則切換計(jì)量單位,即在“g、ct、dwt、oz”等進(jìn)行切換(注:實(shí)驗(yàn)稱量時(shí),使用單位為g);Light鍵:開(kāi)/關(guān)背景鍵。①Z/TZ/T2、關(guān)機(jī)與自動(dòng)關(guān)機(jī)功能A、稱重結(jié)束后,按鍵關(guān)機(jī);B、開(kāi)機(jī)后若無(wú)稱重或保持穩(wěn)定,2分鐘后將自動(dòng)關(guān)機(jī)。①注意事項(xiàng)請(qǐng)勿將秤放在陽(yáng)光直射的地方,以免引起外殼變色及故障;顯示“0-LD”表示物品(連同容器)重量超過(guò)顯示重量的極限;顯示“LO”表示電源電壓低,無(wú)法正常工作,更換電池時(shí),請(qǐng)將2節(jié)電池同時(shí)置換;長(zhǎng)期不使用,請(qǐng)把電池取出來(lái),以免漏電,損壞設(shè)備;請(qǐng)勿超重,以免損壞電子秤;請(qǐng)勿將水滴落在電子秤上,內(nèi)部潮濕,將帶來(lái)危害;請(qǐng)將秤置于結(jié)實(shí)的平臺(tái)上,并保持秤的水平(若秤傾斜,將引起稱重誤差)。移液器移液器使用說(shuō)明設(shè)定移液器轉(zhuǎn)動(dòng)移液器頂部的操作按鈕進(jìn)行移液量的設(shè)定,反時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)按鈕可增加移液量,順時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)按鈕減少移液量;確認(rèn)所要求的移液量可調(diào)整到位并完全在數(shù)字顯示窗口內(nèi)的可見(jiàn)位置;
注意:設(shè)定的移液量不能超出該移液器標(biāo)定的移液范圍(本移液器為100-1000ul),過(guò)度用力試圖把按鈕扭轉(zhuǎn)至額定范圍之外將造成移液器的損壞。移液器操作
A為起始位置;B為第一停點(diǎn)位置;C為第二停點(diǎn)位置移液器的操作由操作按鈕進(jìn)行控制,將按鈕壓至第一停點(diǎn)位置;將移液吸頭置于液面以下1cm深度并慢慢松開(kāi)按鈕,待吸頭吸入溶液后,將移液吸頭撤出液面并斜貼在試劑瓶壁上淌走多余的液體;輕輕壓下操作按鈕至第一??课恢?,約1秒后繼續(xù)將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn),此作用是排盡管內(nèi)的溶液;松開(kāi)按鈕,使之返回按鈕起點(diǎn)位置,需要時(shí),可更換吸頭繼續(xù)移液操作。注意事項(xiàng)按下按鈕或松開(kāi)按鈕的操作必須循序漸進(jìn),尤其是作處理高黏度液體時(shí)更應(yīng)如此,絕不允許讓操作按鈕急速?gòu)椈?;移液前?yīng)確保潔凈的吸頭牢牢地裝進(jìn)移液器的吸錐,在移液前先將溶液吸入新裝的吸頭,然后排空,吸入反復(fù)2-3次后進(jìn)行實(shí)際操作;移液器吸入液體時(shí)應(yīng)注意垂直握住移液器,把手柄靠在食指上。移液器在使用完后,不可倒置,必須調(diào)至最大量程,掛起,以防殘余液體倒流造成移液槍損壞。7、儀器維護(hù)儀器應(yīng)存放于干燥、無(wú)塵的環(huán)境中,放置于穩(wěn)固的工作臺(tái)上,避開(kāi)震動(dòng)源和化學(xué)腐蝕性氣體,避免陽(yáng)光直射。儀器液晶顯示器和鍵盤日常使用和保存時(shí)應(yīng)注意防劃傷、防水、防塵、防腐蝕。儀器操作時(shí),必須注意比色皿透光面不能受到手指或油跡等污染。每次使用儀器后應(yīng)取出所有的參比溶液和樣品溶液。檢查測(cè)量室是否積存有溢出溶液,經(jīng)常擦拭測(cè)量室,以防廢液對(duì)部件或光路系統(tǒng)的腐蝕。1、試劑組成緩沖液:取1包緩沖劑加入500ml蒸餾水中,攪拌溶解制成磷酸緩沖液(pH8.0),常溫保存;顯色劑:取1瓶顯色劑加26ml緩沖液溶解,使用時(shí)取100ul,避光、4℃保存;膽堿酯酶:酶制劑無(wú)需配制,可直接取用,4℃保存;該試劑在臨用前取出一瓶打開(kāi),用一瓶開(kāi)一瓶。要防止其他物質(zhì)的污染,以免酶試劑失效。平時(shí)不在使用狀態(tài)時(shí),酶試劑應(yīng)在4℃冰箱保存。底物:取1瓶底物加10ml蒸餾水溶解,使用時(shí)取樣量為100ul,4℃保存;
注意:由于瓶蓋中有可能沾染部分試劑粉末,溶解、配制時(shí)應(yīng)注意,不要使這部分粉末損失(例如:開(kāi)蓋時(shí)瓶蓋朝上并小心輕放,溶解時(shí)合蓋后再振搖等。)
2、實(shí)驗(yàn)步驟稱2g,加10ml緩沖液,振蕩提取2min代表性樣品,剪成1cm過(guò)濾樣品:2.5ml濾液+100ul酶+100ul顯色劑空白:
2.5ml緩沖液+100ul酶+100ul顯色劑加100ul底物,混勻靜置10min靜置10min加100ul底物,混勻放入儀器第1通道放入儀器第2-8通道按B鍵檢測(cè)方法一:倒入比色皿中倒入比色皿中空白:
2.5ml緩沖液+100ul酶+100ul顯色劑加100ul底物,混勻放入儀器第1通道按B鍵檢測(cè)靜置10min倒入比色皿中代表性樣品,剪成1cm稱2g,加10ml緩沖液,振蕩提取2min過(guò)濾樣品:2.5ml濾液+100ul酶+100ul顯色劑加100ul底物,混勻放入儀器第1-16通道按M鍵檢測(cè)靜置10min倒入比色皿中方法二:3、注意事項(xiàng)
進(jìn)行樣品測(cè)試前,必須先做對(duì)照測(cè)試,否則樣品的抑制率是以最后一次存儲(chǔ)的對(duì)照△A值為參照。
進(jìn)行對(duì)照測(cè)試時(shí),對(duì)照試樣必須放在測(cè)量室第1通道,放置對(duì)照試樣的第1通道序號(hào)前出現(xiàn)“*”標(biāo)記,2-16通道樣品的抑制率是以第1通道對(duì)照試樣為參照;
試劑從冰箱中取出后一定要放置至室溫再使用;
酶液與底物切忌長(zhǎng)時(shí)間置于室溫中,用完一階段后(一上午或一下午)即放入2℃-8℃冰箱中;
建議用移液器配合一次性吸頭進(jìn)行操作,避免試劑交叉污染;
對(duì)含有色素較多的果蔬(如西紅柿、韭菜、芥蘭菜),建議整?;蛘崛。贿^(guò)提取液的加入量應(yīng)相應(yīng)成比例調(diào)整;
樣
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