血紅蛋白與電泳技術(shù)

血紅蛋白與電泳技術(shù)人體的血紅蛋白是一個(gè)完整的四聚體。每個(gè)血紅蛋白分子有2條α類肽鏈（α、ζ）和2條非α肽鏈（β、γ、δ、ε）嚴(yán)格按1：1的比例組成。任何一類肽鏈合成減少，均會(huì)造成肽鏈的不平衡，產(chǎn)生地中海貧血。血紅蛋白血紅蛋白的演化1、妊娠3周卵黃囊造血，生成初級(jí)幼稚紅細(xì)胞----胚胎型血紅蛋白：HbGowerⅠ(ζ2ε2)HbGowerⅡ(α2ε2)HbPortland(ζ2γ2)這些Hb與氧的親合力強(qiáng)，有利于從胎盤攝取O2供胚胎需要。血紅蛋白的演化2、妊娠中期---肝脾造血期ε-肽鏈合成停止，ζ-肽鏈合成逐漸停止，α和γ合成增多--------胎兒型血紅蛋白：HbF(α2γ2)還有少量的HbPortland(ζ2γ2)血紅蛋白的演化3、妊娠后期---骨髓造血為主。這時(shí)血紅蛋白的主要肽鏈為α和γ，開(kāi)始合成少量的β肽鏈，妊娠9個(gè)月后合成δ肽鏈所以這時(shí)血紅蛋白以HbF(α2γ2)為主，少量的HbA(α2β2),和微量的HbA2(α2δ2)血紅蛋白的演化4、出生后γ肽鏈合成迅速減少(出生后12-24個(gè)月降至成人水平)，而β合成迅速增多，δ合成始終很少。所以出生后血紅蛋白以成人型血紅蛋白HbA(α2β2)為主,少量的HbA2(α2δ2)、HbF(α2γ2)珠蛋白肽鏈的演化與地貧胎兒的中后期，α肽鏈不可替代的，如果是α地貧的純合子，由于體內(nèi)不能合成α肽鏈，就會(huì)出現(xiàn)死胎、死產(chǎn)或出生后很快死亡珠蛋白肽鏈的演化與地貧2、而β-地貧，由于胎兒期β肽鏈產(chǎn)量很少，所以對(duì)胎兒發(fā)育影響較小。。出生后頭幾個(gè)月γ肽鏈逐漸被β肽鏈取代，所以臨床貧血表現(xiàn)往往在出生后幾個(gè)月才出現(xiàn)。但在1歲后β肽鏈占非α肽鏈的95%以上，所以重型β地貧患者貧血嚴(yán)重，如不定期輸血，常在幾歲內(nèi)死亡。血紅蛋白病的定義血紅蛋白病是由于血紅蛋白在質(zhì)和量上的異常而發(fā)生的一類遺傳性貧血病，分為兩大類：1、異常血紅蛋白病是由于血紅蛋白發(fā)生了結(jié)構(gòu)上的異常而導(dǎo)致的貧血癥。2、地中海貧血：由于某類珠蛋白合成受抑所引起的溶血性貧血，但不涉及血紅蛋白結(jié)構(gòu)上的異常。血紅蛋白病的定義如：α珠蛋白合成受抑就稱α地貧；β珠蛋白合成受抑就稱β地貧；γ珠蛋白合成受抑就稱γ地貧δ珠蛋白合成受抑就稱δ地貧。。。。主要異常血紅蛋白病的分類珠蛋白基因一級(jí)結(jié)構(gòu)的變化導(dǎo)致異常血紅蛋白，這種變異可發(fā)生在αβγδ珠蛋白肽鏈。目前已鑒別出750多種變異體，但這并不都導(dǎo)致血紅蛋白的功能發(fā)生重大變化，嚴(yán)重影響功能并導(dǎo)致嚴(yán)重貧血的占很少比例。臨床上重要的Hb病1、鐮形細(xì)胞綜合征2、不穩(wěn)定血紅蛋白病(先天性Heinz小體溶血性貧血)3、具有不正常氧親和力的血紅蛋白病高親和力---家族性紅細(xì)胞增多癥低親和力—家族性紫紺臨床上重要的Hb病4、血紅蛋白M-----家族性紫紺5、導(dǎo)致地貧表現(xiàn)型的結(jié)構(gòu)變異體。主要的地貧分類一、α-地貧:α基因位于16號(hào)染色體短臂上，每對(duì)染色體共4個(gè)α基因(αα/αα)1、靜止型α-地貧基因表型：-α/αα或αTα/αα2、標(biāo)準(zhǔn)型α-地貧基因表型：--/αα或-α/-α主要的地貧分類3、HbH?、佴恋刎?與α地貧2的雙重雜合子(--/-α)②α地貧1與非缺失型α地貧的雙重雜合子(--/αTα)③α地貧1與HbConstantSpring的雙重雜合子(--/ααCS)④α地貧1與HbQ的雙重雜合子(--/ααQ)主要的地貧分類總之，3個(gè)α基因缺失或功能障礙------HbH4、HbBart,s胎兒水腫病

α地貧1的純合子(--/--),即是4個(gè)α基因全部缺失主要的地貧分類二、β-地貧：β基因位于11號(hào)染色體短臂上的一對(duì)等位基因，正常為(N/N),β0指突變導(dǎo)致基因功能全失，

β+指突變導(dǎo)致基因功能部分損失1、靜止型β-地貧：無(wú)貧血癥狀，但可見(jiàn)紅細(xì)胞形態(tài)輕度改變，HbA2增高。常見(jiàn)于β+-地貧雜合子2、輕型β-地貧：有輕度貧血癥狀，HbA2增高。常見(jiàn)于β0-地貧雜合子主要的地貧分類3、重型β-地貧：有嚴(yán)重的貧血癥狀，嚴(yán)重的紅細(xì)胞形態(tài)改變，HbF顯著升高。常見(jiàn)于β0-地貧純合子4、中間型β-地貧：：貧血處于重度和輕度之間的β-地貧純合子①一個(gè)或兩個(gè)β地貧等位基因?yàn)檩p型②α地貧與β地貧共遺傳(β+-地貧與α地貧--/αα或-α/αα或-α/-α)主要的地貧分類(β+-地貧與HbH)α-地貧的臨床分型特征1、靜止型α-地貧：缺失一個(gè)基因引起，最常見(jiàn)的是-α3.7缺失型(-α3.7/αα)表現(xiàn)：患者無(wú)任何癥狀，血象正常，Hb正常，紅細(xì)胞內(nèi)無(wú)包涵體，出生時(shí)臍血HbBart,s可達(dá)1-2%，但很快消失。要通過(guò)PCR才能檢測(cè)其基因型。α-地貧的臨床分型特征2、標(biāo)準(zhǔn)型α-地貧：最常見(jiàn)的是-α3.7缺失型的純合子(-α3.7/-α3.7)，其次是缺失2個(gè)α基因(--/αα),如主要是東南亞缺失型(SEA型)患者無(wú)明顯臨床癥狀，臍血HbBart,s含量可達(dá)5-15%，成人Hb正?；蜉p度下降，MCV、MCH輕度下降，少數(shù)可見(jiàn)包涵體，Hb電泳偶可見(jiàn)HbH。α-地貧的臨床分型特征3、HbH?。河捎?個(gè)α-基因缺失3個(gè)引起，其臨床癥狀輕重程度取決于其基因型的不同。單純?nèi)笔统錾鷷r(shí)貧血較輕或無(wú)貧血，此后逐漸加重，通常為輕到中度貧血，伴有脾腫大，偶有黃疸，當(dāng)妊娠、感染、服用氧化性藥物時(shí)可加重，發(fā)育正常，骨骼面容改變不明顯，非缺失型多為HbH-CS，其發(fā)病年齡較早，貧血較嚴(yán)重，肝脾大明顯，多數(shù)需輸血，HbH及HbBart,s較高。HbH病患者臍血中HbBart,s含量約為25%，成年期HbH約0.8-40%，可有少量HbBart,s，HbA2減少。HbH-CS病人可有少量HbCS，約2-3%。HbQ-H病的電泳為約HbQ80%，HbH15-20%，少量的HbBart,s，HbA、HbA2不存在。α-地貧的臨床分型特征4、HbBart,s

胎兒水腫綜合征：4個(gè)α-基因完全缺失，是α-地貧中最嚴(yán)重的。胎兒一般在23-38周或出生數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡，少數(shù)可存和數(shù)天。臍血電泳：HbBart,s80-90%，不等量的HbPotland10-29%及微量的HbH,沒(méi)有HbA、HbA2、HbF。β-地貧的臨床分型特征1、靜止型β-地貧大多數(shù)沒(méi)有癥狀，沒(méi)有貧血，但血涂片可見(jiàn)少數(shù)靶細(xì)胞，RBC脆性輕度降低，HbA2略升高(>3.5%)，也有少數(shù)病例正常。β-地貧的臨床分型特征2、輕型β-地貧RBC脆性降低，Hb80g/l以上，MCV、MCH明顯降低，涂片可見(jiàn)小細(xì)胞低血色素性貧血，有靶型紅細(xì)胞。電泳：HbA2顯著升高(3.5-7%)，HbF可正常，部分病例輕度升高，一般不超過(guò)5%，但如同時(shí)有缺鐵性貧血時(shí)，HbA2不高，經(jīng)鐵劑后HbA2又可升高。β-地貧的臨床分型特征3、重型β-地貧，須定期輸血維持生命。重度貧血，Hb50g/L以下，涂片可見(jiàn)靶型紅細(xì)胞增多，細(xì)胞大小不均，典型的小細(xì)胞低血色素性貧血，MCV、MCH、MCHC明顯降低，脾亢進(jìn)時(shí)，RBC、WBC、PLT均減少。電泳：HbF增高，達(dá)60%以上，也有少數(shù)患者HbF為10-30%，HbA2含量變化較大，可以1.4-4.1%

什么電泳技術(shù)電泳是利用混懸于溶液中的帶電質(zhì)點(diǎn)在外加電場(chǎng)作用下，向著與之帶有相異電荷的電極方向移動(dòng)的現(xiàn)象，利用這種原理達(dá)達(dá)將多種組分物質(zhì)分離分析的技術(shù)稱電泳技術(shù)。Hb電泳通常是PH8.5條件下的電泳，這時(shí)大多數(shù)的Hb組份帶負(fù)電荷，從負(fù)極向正極移動(dòng)，各成分的大小及帶電量的不同，移動(dòng)的速度不同，而將不同組份分離出來(lái)。常見(jiàn)的電泳區(qū)帶總結(jié)總之1、成年人的Hb電泳可見(jiàn)A區(qū)帶及A2區(qū)帶，極少量的F區(qū)帶，出現(xiàn)其它區(qū)帶均為不正常區(qū)帶。2、各區(qū)帶的定量值應(yīng)在參考范圍內(nèi)。A2降低，多見(jiàn)于α-地貧，A2升高多見(jiàn)于β-地貧。F升高或合并A2升高多見(jiàn)于β-地貧?？偨Y(jié)3、地貧的輕重程度一般與區(qū)帶超出參考范圍的多少成正比，或者與出現(xiàn)異常區(qū)帶的量成正比。4、嬰兒血或臍帶血以F區(qū)帶為主，有少量的A區(qū)帶，極微量的A2，如果是臍帶血，A2往往檢測(cè)不出，隨著年齡的增長(zhǎng)，F(xiàn)區(qū)帶減少，A急劇增長(zhǎng)，A2慢慢增加，到2歲達(dá)到成人水平。如果幼兒的電泳區(qū)帶含量與成人參加水平有些少偏差，難以下定論的，可建議滿2歲后復(fù)查。總結(jié)5、