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大腸菌群的定義及測定意義(一)大腸菌群的定義及范圍根據(jù)國家1994年頒布的食品衛(wèi)生檢驗方法微生物學(xué)部分,大腸菌群(coliformbacteria)系指一群在37C24h能發(fā)酵乳糖,產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。大腸菌群主要是由腸桿菌科中四個菌屬內(nèi)的一些細菌所組成,即艾希氏菌屆、拘櫞酸桿菌屬、克雷伯氏菌屬及腸桿菌屬,其生化特性由上表可以看出,大腸菌群中大腸艾希氏菌I型和B型的特點是,對靛基質(zhì)、甲基紅、v-P和拘櫞酸鹽利用四個生化反應(yīng)分別為“十十-一”,通常稱為典型大腸桿菌;而其他類大腸桿菌則披稱為非典型大腸桿菌。(二)大腸菌群的測定意義糞便污染的指標細菌早在1892年,沙爾丁格(Schardinger)氏首先提出大腸桿菌作為水源中病原菌污染的指標菌的意見,因為大腸桿菌是存在于人和動物的腸道內(nèi)的常見細菌。一年后,塞烏博耳德〃斯密斯(Theobold.Smith)氏指出,大腸桿菌因普遍存在于腸道內(nèi),若在腸道以外的環(huán)境中發(fā)現(xiàn),就可以認為這是由于人或動物的糞便污染造成的;從此,就開始應(yīng)用大腸桿菌作為水源中糞便污染的指標菌。據(jù)研究發(fā)現(xiàn),成人糞便中的大腸菌群的含量為:108個/g—109個/g。若水中或食品中發(fā)現(xiàn)有大腸菌群,即可證實已被糞便污染,有糞便污染也就有可能有腸道病原菌存在。根據(jù)這個理由,就可以認為這種含有大腸菌群的水或食品供食用是不安全的。所以目前為評定食品的衛(wèi)生質(zhì)量而進行檢驗時,也都采用大腸菌群或大腸桿菌作為糞便污染的指標細菌。當然,有糞便污染,不一定就有腸道病原菌存在,但即使無病原菌,只要被糞便污染的水或食品,也是不衛(wèi)生的,不受人喜歡的。糞便污染指標菌的選擇作為理想的糞便污染的指標菌應(yīng)具備以下幾個特性,才能起到比較正確的指標作用。①存在于腸道內(nèi)持有的細菌,才能顯示出指標的特異性。⑧在腸道內(nèi)占有極高的數(shù)量,即使被高度稀釋后,也能被檢出。⑧在腸道以外的環(huán)境中,其抵抗力大于腸道致病菌或相似,進入水中不再繁殖。④檢驗方法簡便,易于檢出和計數(shù)。在食品衛(wèi)生微生物檢驗中,可作為糞便污染指標菌依據(jù)的上述條件,糞便中數(shù)量最多的是大腸菌群,而且大腸菌群隨糞便排出體外后,其存活時間與腸道主要致病菌大致相似,在檢驗方法上,也以大腸菌群的檢驗計數(shù)簡便易行。因此,我國選用大腸菌群作為糞便污染指標菌是比較適宜的。另外,作為糞便污染的指標細菌還有:分叉桿菌(Bifidobacterium)、擬桿菌(Bacteroides)、乳酸菌、腸桿菌科中的梭狀芽胞和底群鏈球菌等,據(jù)報道,擬桿菌是人體腸道內(nèi)第二個較大的菌群;厭氣性乳酸菌占人體腸道內(nèi)細菌組分的50%以上,一般糞便中該菌量為109個/g-1010個/g。腸道內(nèi)屬于腸桿菌科的細菌,除上述的細菌外,還有克雷伯氏菌屬(Klebsiella)、變形桿菌和副大腸桿菌等,也可以充當糞便污染指標菌。很多研究者認為,在冷蹤食品或冷凍狀態(tài)照射處理過的食品中,大腸桿菌可比其他多種病原菌容易死亡,因此,像這類食品,用大腸菌群作為指標菌就不夠理想,而底群鏈球菌對低溫抵抗力強,作為這類食品的糞便污染指標菌就比較適宜。上述的這些腸道內(nèi)的其他細菌,雖與糞便有關(guān),因均比不上大腸菌群所具備的指標特異性,所以目前還沒有列入作為公認的糞便污染的指標細菌。當然,大腸菌群作為糞便污染指標菌也有一些不足之處:飲用水中含有較少量大腸菌群的情況下,有時仍能引起腸道傳染病的流行。⑧大腸菌群在一定條件下能在水中生長繁殖。在外界環(huán)境中,有的沙門氏菌比大腸菌群更有耐受力。大腸菌群作為糞便污染指標菌的意義糞便污染的食品,往往是腸道傳染病發(fā)生的主要原因,因此檢查食品中有無腸道菌,這對控制腸道傳染病的發(fā)生和流行,具有十分重要的意義。許多研究者的調(diào)查證明,人、畜糞便對外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。在腹瀉患者所排糞便中,非典型大腸桿菌常有增多趨勢,這可能與機體腸道發(fā)生紊亂,大腸菌群在型別組成的比例上因而發(fā)生改變所致;隨糞便排至外環(huán)境中的典型大腸桿菌,也可因條件的改變。使生化性狀發(fā)生變異,因而轉(zhuǎn)變?yōu)榉堑湫痛竽c桿菌。由此看來,大腸菌群無論;莊糞便內(nèi)還是在外環(huán)境中,都是作為—個整體而存在的,它的菌型組成往往是多種的,只是在比例上,因條件不同而有差異。因此,大腸菌群的檢出,不僅反映校樣被糞便污染總的情況,而且在一定程度上也反映了食品在生產(chǎn)加工、運輸、保存等過程中的衛(wèi)生狀況,所以具有廣泛的衛(wèi)生學(xué)意義。由于大腸菌群作為糞便污染指標菌而被列入食品衛(wèi)生微生物學(xué)常規(guī)檢驗項目,如果食品中大腸菌群超過規(guī)定的限量,則表示該食品有
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