DB15-T 3284-2023 北蟲草菌種制作技術(shù)規(guī)程

65.020.01CCS

B

0515 DB15/T

3284—2023北蟲草菌種制作技術(shù)規(guī)程

code

cordyceps

spawns2023-12-29

發(fā)布2024-01-29

實(shí)施內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB15/T

3284—2023本文件按照GB/T

1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則

第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)果蔬標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（

25）歸口。學(xué)、赤峰市敖漢旗農(nóng)牧局、興安盟農(nóng)牧技術(shù)推廣中心。杰、李小雷、賀琪、賈曉東、鄧海峰、閆慶琦、季祥、鄭莎、肖杰、張娜。DB15/T

3284—20231 范圍本文件規(guī)定了北蟲草菌種生產(chǎn)要求、菌種制備、檢驗(yàn)、貯存技術(shù)。本文件適用于北蟲草各級(jí)菌種生產(chǎn)。2 規(guī)范性引用文件文件。GB

5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)NY/T

食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T

1731食用菌菌種良好作業(yè)規(guī)范3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。北蟲草 cordyceps

militaris或蝌蚪狀，高45

mm～50

，淡黃色。菌種 spawn生長在適宜基質(zhì)上具結(jié)實(shí)性的菌絲培養(yǎng)物，包括母種、原種和栽培種。液體菌種 liquid

spawn用液體培養(yǎng)基在生物發(fā)酵罐等容器中，通過深層培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的液體形態(tài)食用菌菌種。母種 stock

級(jí)種。DB15/T

3284—2023原種 preculture

spawn由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱為二級(jí)種。栽培種 spawn由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱為三級(jí)種。4 生產(chǎn)要求技術(shù)人員菌種生產(chǎn)的技術(shù)人員是經(jīng)過培訓(xùn)能夠掌握專業(yè)知識(shí)、制作菌種達(dá)到相關(guān)技術(shù)要求的。場地選擇4.2.1選址選擇水電和交通便利、通風(fēng)良好、便于供排水的場地。4.2.2 環(huán)境衛(wèi)生要求

m之內(nèi)無畜禽養(yǎng)殖場、無垃圾場、無污水和其它污染源，遠(yuǎn)離北蟲草種植區(qū)，尤其是遠(yuǎn)離北蟲草栽培廢棄物晾曬場，用水符合GB

5749相關(guān)規(guī)定。設(shè)施、設(shè)備4.3.1 原材料庫通風(fēng)、防雨、防潮、防蟲、防鼠、防火、防雜菌污染等。4.3.2 配料室、分裝室水電便利，通風(fēng)良好、空間充足，配料室配磅秤、天平、攪拌機(jī)，分裝室配分裝器等。4.3.3 滅菌室氣加熱，要求滅菌設(shè)施的出料門與加熱灶有隔斷設(shè)施。4.3.4 冷卻室及接種室槍、高壓泵、酒精燈、紫外燈、防火設(shè)備等。4.3.5 培養(yǎng)室潔凈、水電暢通、通風(fēng)良好，配有恒溫培養(yǎng)箱或培養(yǎng)架、搖床、發(fā)酵罐、空調(diào)、殺菌設(shè)備等。4.3.6 菌種檢驗(yàn)室DB15/T

3284—2023水電暢通，配有顯微鏡、計(jì)、菌落計(jì)數(shù)器等。容器4.4.1 母種玻璃試管（18

mm×

mm或20

mm×

mm）或平板培養(yǎng)皿，（90

mm×90

mm），試管塞帶有砂芯或者不帶砂芯的硅膠塞。4.4.2 原種耐高溫高壓的透明潔凈搖瓶或聚丙烯塑料瓶。4.4.3 栽培種耐高溫高壓的帶有透氣蓋（膜）玻璃瓶、聚丙烯塑料瓶或不同容積規(guī)格發(fā)酵罐。原料無霉變。5 菌種制備培養(yǎng)基制備5.1.1 母種配方為馬玲薯

g(煮汁)、葡萄糖20

g、瓊脂

g、蛋白胨5

g、牛肉膏0.5

g、酵母粉5

g、磷酸二氫鉀1

g、硫酸鎂

g，加水定容1000

mL，pH6.5～7.0。分裝至試管中，分裝量掌握在試管長度的1/4。5.1.2 原種配方為馬玲薯

g(煮汁)20

g5

g0.5

g5

g1

g、硫酸鎂0.5

g1000

mL，pH6.5～3/5。5.1.3栽培種制備配方和方法同原種，分裝量不超過搖床培養(yǎng)容器或發(fā)酵罐總?cè)莘e的。滅菌

121

123

0.11

～0.15

MPa

20

min～25

，常壓

℃～

℃

h～12

h，自然冷卻到

℃左右時(shí)，取出試管，擺放斜面，原種和栽培種取出備用。接種5.3.1 母種照NY/T

1731的規(guī)定執(zhí)行。DB15/T

3284—20235.3.2 原種每升接入4～52

mm×2

mm528的規(guī)定執(zhí)行。5.3.3栽培種按栽培培養(yǎng)基體積的2%NY/T

的規(guī)定執(zhí)行。培養(yǎng)5.4.1 母種將接好的試管置于20

℃的恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)6

d～8

d，長至4

～5

cm時(shí)使用，或轉(zhuǎn)置于光照強(qiáng)度為200

Lx下培養(yǎng)2

d～3

d轉(zhuǎn)色后使用。5.4.2 原種和栽培種置于18

22

120

r/min～150

r/min可控溫?fù)u床上或發(fā)酵罐中暗培養(yǎng)5

d～7

d，當(dāng)