肽類和蛋白質(zhì)類藥物

第四章肽類和蛋白質(zhì)類藥物第一節(jié)概述一、多肽和蛋白質(zhì)的概念由多個(gè)氨基酸通過肽鍵連接而成的鏈狀化合物稱為多肽。50個(gè)以上氨基酸殘基組成的多肽稱蛋白質(zhì)。酶肽鍵+H2O二肽脫水縮合反響H2O多肽和蛋白質(zhì)具有不同的結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與其生物學(xué)活性之間的關(guān)系非常密切。蛋白質(zhì)變性：當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)受環(huán)境因素的影響，從原來的有規(guī)那么的空間結(jié)構(gòu)變?yōu)闊o序松散狀態(tài)時(shí)，其生物活性將會(huì)散失，稱為蛋白質(zhì)的變性。二、多肽和蛋白質(zhì)理化性質(zhì)1.酸堿性2.膠體性質(zhì)3.離子結(jié)合〔1〕鹽析〔2〕有機(jī)溶劑沉淀反響〔3〕加熱沉淀反響〔4〕金屬鹽沉淀法〔pH>pI時(shí)〕〔5〕生物堿試劑和某些酸類的沉淀反響4.變性作用天然蛋白質(zhì)因受物理或化學(xué)因素的影響，分子構(gòu)象發(fā)生變化，致使蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)和生物學(xué)功能隨之發(fā)生變化，但一級(jí)結(jié)構(gòu)未遭破壞，這種現(xiàn)象稱為變性作用。變性后的蛋白質(zhì)稱為變性蛋白。導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的因素：熱、紫外光、劇烈的攪拌以及強(qiáng)酸和強(qiáng)堿等。5.紫外吸收6.顏色反響〔1〕茚三酮反響在弱酸條件下〔pH5-7〕，蛋白質(zhì)或氨基酸與茚三酮共熱，可生成藍(lán)紫色縮合物?！?〕雙縮脲反響蛋白質(zhì)在堿性條件下與銅離子結(jié)合成紅紫色絡(luò)合物，此反響稱為雙縮脲反響。〔3〕酚試劑反響在堿性條件下，蛋白質(zhì)中的酪氨酸、色氨酸可與酚試劑反響呈現(xiàn)藍(lán)色，藍(lán)色的深淺與蛋白質(zhì)含量呈正比。三、多肽和蛋白質(zhì)藥物1.多肽類藥物〔1〕多肽類激素①下丘腦-垂體多肽激素：促甲狀腺素釋放素、促生長抑制素等②甲狀腺激素：甲狀旁腺素，降鈣素等③胰島激素：胰高血糖素、胰解痙多肽等④消化道激素：腸抑胃肽，胃泌素等⑤胸腺激素：胸腺肽等⑥心臟激素：心房肽等〔2〕多肽類細(xì)胞生長調(diào)節(jié)因子：表皮生長因子等〔3〕其它多肽類藥物：谷胱甘肽、胎盤素等2、蛋白質(zhì)藥物〔1〕蛋白質(zhì)藥物：胰島素、生長激素、促甲狀腺素、促乳素等；‘〔2〕蛋白質(zhì)類細(xì)胞生長調(diào)節(jié)因子：干擾素、白細(xì)胞介素-2、神經(jīng)生長因子、促紅細(xì)胞生成素、集落刺激因子等；〔3〕血漿蛋白：纖維蛋白原、白蛋白、丙種球蛋白等；〔4〕黏蛋白：胃膜素、硫酸糖肽等；〔5〕膠原蛋白：阿膠，明膠等；〔6〕其他蛋白質(zhì)藥物；抑酶肽。第二節(jié)多肽和蛋白質(zhì)類藥物的一般制備方法一、生物材料的選擇1.選擇原那么〔1〕材料來源豐富易得；〔2〕有效成分含量高；〔3〕制備工藝簡單，難于別離的雜質(zhì)少；〔4〕本錢低經(jīng)濟(jì)效益好的生物材料或微生物材料為原料。材料選定后，必須盡量保持新鮮，盡快加工處理，否那么冷凍保存。二、材料的預(yù)處理1.機(jī)械法常用的有勻漿器，研缽，機(jī)械搗碎機(jī)。2.物理法反復(fù)凍融法；急熱驟冷法；超聲波法；加壓破碎法。3.化學(xué)法和酶法包括有機(jī)溶劑法、自溶法、酶解法和外表活性劑處理法。有機(jī)溶劑法是于0℃以下在粉碎后參加5-10倍量的丙酮，迅速攪拌，可破碎細(xì)胞。酶解法用纖維素酶、半纖維素酶處理植物細(xì)胞，酶解細(xì)胞壁，得到細(xì)胞的內(nèi)含物。三、多肽和蛋白質(zhì)藥物的提取與合成〔一〕提取法水溶液提取〔1〕鹽濃度〔2〕pH〔3〕溫度2.有機(jī)溶劑提取法一些與脂質(zhì)結(jié)合比較牢固或分子中非極性側(cè)鏈較多的蛋白質(zhì)或多肽，不溶或難溶于水、稀鹽、稀堿中，常用不同比例的有機(jī)溶劑提取?！捕郴瘜W(xué)合成法多肽和蛋白質(zhì)的化學(xué)合成是從1882年Curticus報(bào)道的馬脲酰甘氨酸，經(jīng)過半個(gè)多世紀(jì)對(duì)各種保護(hù)基和縮合方法的精心設(shè)計(jì)應(yīng)用，使得合成方法日趨完善。四、多肽與蛋白質(zhì)類藥物的純化

1.根據(jù)溶解度不同主要有鹽析法、等電點(diǎn)沉淀法、有機(jī)溶劑沉淀法、加熱沉淀法、結(jié)晶法、雙水相萃取法等。2.利用分子結(jié)構(gòu)和大小的不同可采用凝膠色譜、超濾、SDS來別離。3.利用電離性質(zhì)的不同常采用的方法有離子交換法、電泳法等。4.利用生物功能專一性的不同常用的是親和色譜技術(shù)，近年來還開展出了親和膜別離技術(shù)及親和過濾技術(shù)。5.利用疏水性的不同利用多肽和蛋白質(zhì)疏水性不同的純化方法有疏水相互作用色譜法、反向色譜法。粉漿蛋白漿液漿水〔棄去〕稠漿100目上渣100目下漿別離稠漿上清液〔棄去〕清洗上清液〔棄去〕酒精沉淀上清液沉淀物〔棄去〕100目下渣清洗、枯燥沉淀沉淀上清液〔棄去〕沉淀100目上渣噴霧枯燥0.5mol/LNaOH1mol/LHCl,