微生態(tài)制劑作用機(jī)理及研究進(jìn)展山東飼料科技與經(jīng)濟(jì)首頁

微生態(tài)制劑作用機(jī)理

及研討進(jìn)展山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院劉建勝教授抗生素之利弊1929年發(fā)現(xiàn)了抗生素以來，挽救了億萬動(dòng)物和人的生命，發(fā)揚(yáng)了不可磨滅的作用，但也產(chǎn)生了一些弊端，抗生素應(yīng)用于飼料行業(yè)為畜牧業(yè)的飛速開展起到了極大的推進(jìn)作用：引起菌群失調(diào)，破壞正常菌群的生態(tài)平衡，出現(xiàn)二重感染。導(dǎo)致耐藥性菌株增多，使疾病的治療更加棘手。影響家禽的細(xì)胞和體液免疫功能。殘留，致畸、致癌、致突變等問題倍受關(guān)注。微生態(tài)制劑的出現(xiàn)從20世紀(jì)70年代開場(chǎng)，微生物學(xué)者轉(zhuǎn)向進(jìn)展微生態(tài)制劑的研討和實(shí)踐運(yùn)用。逐漸在實(shí)際上探明了常見動(dòng)物體內(nèi)〔特別是消化道內(nèi)〕的正常菌群的種類、數(shù)量及其功能。在運(yùn)用方面，研制勝利了多種微生態(tài)制劑，并在消費(fèi)實(shí)際當(dāng)中進(jìn)展了較廣泛的開發(fā)運(yùn)用，產(chǎn)生了顯著的經(jīng)濟(jì)、生態(tài)和社會(huì)效益。微生態(tài)制劑的出現(xiàn)特別是20世紀(jì)90年代，世界各國(guó)，尤其是歐洲、日本等興隆國(guó)家紛紛采取官方強(qiáng)硬的措施，對(duì)飼用抗生素的種類、運(yùn)用方法、劑量和配伍等方面嚴(yán)加限制。為此，當(dāng)前可替代抗生素、抗菌藥物而又無毒副作用、無殘留的微生態(tài)制劑在養(yǎng)殖業(yè)消費(fèi)中運(yùn)用越來越普遍。微生態(tài)制劑的出現(xiàn)由于生活程度的提高，人們逐漸認(rèn)識(shí)到，抗生素長(zhǎng)期添加于飼料中，可經(jīng)過食物鏈對(duì)人類的安康呵斥危害。由此人類對(duì)食品平安性倍加注重。微生態(tài)制劑的研討運(yùn)用抑制了長(zhǎng)期運(yùn)用抗生素給養(yǎng)殖業(yè)呵斥的種種弊端，對(duì)開展綠色飼料添加劑具有寬廣的運(yùn)用前景，己被農(nóng)業(yè)部列為二十一世紀(jì)重點(diǎn)推行技術(shù)工程。這意味著對(duì)微生態(tài)制劑的研討、推行，符合我國(guó)可繼續(xù)開展的總體要求。微生態(tài)制劑的含義微生態(tài)制劑是指根據(jù)微生態(tài)實(shí)際，在微生態(tài)學(xué)實(shí)際指點(diǎn)下，用正常微生物群成員，經(jīng)特殊工藝制成的只含有活菌或包含細(xì)菌菌體及其代謝產(chǎn)物的主要用于動(dòng)物的活菌制劑。運(yùn)用微生態(tài)原理，將從動(dòng)物體內(nèi)外分別的對(duì)動(dòng)物有益的微生物，經(jīng)過特殊的加工工藝制成的包含有益微生物及其代謝產(chǎn)物的活菌制劑。Fuller將益生素定義為“一種可經(jīng)過改動(dòng)腸道菌群平衡而對(duì)動(dòng)物施加有利影響的活微生物飼料添加劑〞，我國(guó)學(xué)者將Probiotics譯為益生素，其產(chǎn)品稱為微生態(tài)制劑。益生元1995年Gibson,G.R等人提出了益生元的概念。它是一類非消化性物質(zhì)，能選擇性的促進(jìn)一種或幾種定植于結(jié)腸內(nèi)常住菌的活性或生長(zhǎng)繁衍，從而增進(jìn)宿主安康。這類物質(zhì)最初發(fā)現(xiàn)的是雙歧因子。大量研討以為，某些寡糖、多糖、肽類、蛋白質(zhì)及我國(guó)的中草藥等均可作為益生元。如今的研討熱點(diǎn)多集中于寡糖，運(yùn)用較多的是大豆寡糖、半乳寡糖、低聚果糖等。合生元益生素和益生元結(jié)合運(yùn)用，既可發(fā)揚(yáng)益生菌的活性，又可選擇性地提高這些菌的數(shù)量，使益生作用更顯著耐久。國(guó)際上將此類產(chǎn)品定名為合生元，這是微生態(tài)制劑的又一開展方向。微生態(tài)制劑的種類按制品劑型可分為液體劑型和固體劑型按制品所含有效微生物種類多少的不同可劃分為單一有效菌劑和多菌復(fù)合菌劑。單一有效菌劑即有效活菌為某一種微生物構(gòu)成的制劑，如乳酸菌劑、芽孢菌劑、酵母菌劑;多菌復(fù)合劑即有效菌是由二種或二種以上微生物構(gòu)成的制劑。芽孢桿菌與乳酸桿菌結(jié)合組成和乳酸桿菌與酵母結(jié)合組成的復(fù)合微生物添加劑，具有促進(jìn)生長(zhǎng)和提高飼料效率的作用。單一菌株的益生素較少，而更注重于復(fù)合菌制劑的研討。復(fù)合菌制劑的作用效果更好，更符合實(shí)踐生態(tài)環(huán)境。復(fù)合菌制劑普通都具有協(xié)同作用。以蠟樣芽孢桿菌與乳酸菌的協(xié)同作用為例，臘樣芽孢桿菌是高度耗氧菌，它所呵斥的體內(nèi)缺氧環(huán)境可抑制致病菌生長(zhǎng)，但卻有利于厭氧的乳酸菌的生長(zhǎng)，乳酸菌的生長(zhǎng)又添加了環(huán)境的酸度，更加強(qiáng)了對(duì)致病菌生長(zhǎng)的抑制。產(chǎn)品雖然價(jià)錢較高，但其添加量低。微生態(tài)制劑的種類按制品運(yùn)用目的可分為飼料添加劑型和藥用型。前者可用于提高動(dòng)物的消費(fèi)性能，提高飼料的利用率以及維護(hù)動(dòng)物機(jī)體的安康;后者作用方式與抗生素類藥物類似，主要用于防病治病等治療目的按微生物的菌種類型還可將其劃分為乳酸菌類制劑、芽孢桿菌類制劑、酵母菌類制劑為主的制劑。常用菌及其功能特點(diǎn)乳酸菌芽孢桿菌酵母菌乳酸菌是一種可以分解糖類產(chǎn)生乳酸的革蘭氏陽性菌，厭氧或者兼性厭氧生長(zhǎng)。在動(dòng)物體內(nèi)經(jīng)過降低pH值，阻止和抑制致病菌的侵入和定植;降解氨、吲哚、糞臭素等有害物質(zhì)，維持腸道中正常的生態(tài)平衡;加強(qiáng)體液免疫和細(xì)胞免疫;乳酸菌可用于哺乳和斷乳期動(dòng)物的飼料中目前運(yùn)用的乳酸菌主要是來源于乳酸桿菌屬、乳酸鏈球菌屬和雙歧桿菌屬的近30種的微生物。我國(guó)農(nóng)業(yè)部允許用作飼料添加劑的乳酸菌有:干酪乳桿菌、植物乳桿菌、糞鏈球菌、屎鏈球菌、乳酸片球菌、嗜酸乳桿菌、乳鏈球菌，共七種。芽孢桿菌用于益生素的芽孢桿菌是腸道的過路菌，不能定植于腸道中。好氧，無害，能產(chǎn)生芽孢，耐酸堿、耐高溫暖擠壓，在腸道酸性環(huán)境中具有高度的穩(wěn)定性;促進(jìn)有益菌的生長(zhǎng);拮抗腸道內(nèi)有害菌;加強(qiáng)機(jī)體免疫力，提高抗病才干;能分泌較強(qiáng)活性的蛋白酶及淀粉酶，可明顯提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度促進(jìn)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化。目前報(bào)道較多的菌種有枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌及東洋芽孢桿菌等有益菌種類酵母菌酵母菌用于微生態(tài)制劑:一種是活性酵母制劑，一種是酵母培育物。酵母細(xì)胞富含蛋白質(zhì)、核酸、維生素和多種酶，具有加強(qiáng)動(dòng)物免疫力，添加料適口性，促進(jìn)動(dòng)物對(duì)飼料的消化吸收才干等功能，并可提高動(dòng)物對(duì)磷的利用率;其培育物營(yíng)養(yǎng)豐富，富含B族維生素、礦物質(zhì)、消化酶、促生長(zhǎng)因子和較齊全的氨基酸。酵母及其培育物的運(yùn)用年代已久，現(xiàn)己廣泛運(yùn)用于各種動(dòng)物的養(yǎng)殖中。目前農(nóng)業(yè)部允許用于益生素的酵母菌有:釀酒酵母、啤酒酵母、產(chǎn)朊假絲酵母等。微生態(tài)制劑的作用機(jī)理微生態(tài)制劑與治療藥物不同，為“己病治病，未病防病，無病保健〞。益生菌進(jìn)入動(dòng)物腸道后，會(huì)與其中的正常菌群會(huì)合，顯現(xiàn)出共生、棲生、競(jìng)爭(zhēng)或吞噬等復(fù)雜關(guān)系。因此，微生態(tài)制劑的作用機(jī)理相當(dāng)復(fù)雜，從微生物作用方式的角度，有以下幾種解釋：優(yōu)勢(shì)種群說正常微生物群與動(dòng)物和環(huán)境之間所構(gòu)成的微生態(tài)系統(tǒng)中，優(yōu)勢(shì)種群對(duì)整個(gè)種群起決議作用。一旦失去了優(yōu)勢(shì)種群，那么該微生態(tài)平衡失調(diào)，原有優(yōu)勢(shì)種群發(fā)生更替，運(yùn)用飼用微生物添加劑的目的就在于恢復(fù)優(yōu)勢(shì)種群。何明清〔1983〕指出：正常情況下豬雞腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)種群為厭氧菌〔占99%以上〕，而需氧菌及兼性厭氧菌只占1%，其中主要是擬桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌、消化球菌等。當(dāng)動(dòng)物處于應(yīng)激、下痢形狀時(shí)，該優(yōu)勢(shì)種群發(fā)生更替，上述專性厭氧桿菌顯著減少，而兼性厭氧菌等顯著添加，當(dāng)運(yùn)用飼用微生物添加劑后，擬桿菌等專性厭氧菌逐漸添加恢復(fù)正常形狀，而大腸桿菌等逐漸降低并堅(jiān)持原有形狀。膜菌群屏障說動(dòng)物腸道內(nèi)正常菌群直接參與機(jī)體生物防御的屏障構(gòu)造，以影響過路菌或侵襲菌，防止其在腸道內(nèi)定植生長(zhǎng)。飼喂動(dòng)物的有益微生物可競(jìng)爭(zhēng)性地附著到腸細(xì)胞上，構(gòu)成屏障作用，也就是競(jìng)爭(zhēng)性頡頏作用。在非有益微生物區(qū)系建立前，給新生家畜接種有益的微生物，有助于幼畜建立正常的微生物區(qū)系，排除或控制潛在的病原體，即人為的改動(dòng)腸道微生物區(qū)系，也就是優(yōu)勢(shì)種群發(fā)生更替，建立新的優(yōu)勢(shì)種群。某些益生菌還可合成抗生素、有機(jī)酸、H202等物質(zhì)抑制有害菌的生長(zhǎng)，從而起到生物頡頏作用。向貴友等〔1995〕報(bào)道用B01(芽孢桿菌)菌液飼喂雛雞后，發(fā)現(xiàn)其對(duì)雛雞腸內(nèi)大腸桿菌和沙門氏菌有極顯著的頡頏作用。微生物奪氧說一些需氧的微生物特別是芽孢桿菌能耗費(fèi)腸道內(nèi)氧氣，呵斥部分厭氧環(huán)境，有利于厭氧微生物生長(zhǎng)，從而使失調(diào)菌群恢復(fù)正常。當(dāng)飼用微生物添加劑中某菌種以孢子形狀進(jìn)入畜禽消化道后迅速生長(zhǎng)繁衍，耗費(fèi)腸內(nèi)氧氣，使部分氧分子濃度下降，從而恢復(fù)腸內(nèi)微生物之間的微生態(tài)平衡，到達(dá)防病治病、促生長(zhǎng)之目的其他作用產(chǎn)生各種酶提高機(jī)體免疫機(jī)能營(yíng)養(yǎng)作用產(chǎn)生各種酶有些益生菌可產(chǎn)生水解酶、發(fā)酵酶和呼吸酶等，有利于降解飼料中蛋白質(zhì)、脂肪和復(fù)雜的碳水化合物。如乳酸桿菌等在消化道內(nèi)繁衍增殖，促進(jìn)消化道內(nèi)氨基酸、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)，提高消費(fèi)性能。陳惠等(1994)研討闡明生長(zhǎng)育肥豬飼喂芽孢桿菌添加劑后，可使其α-淀粉酶及胰蛋白酶活性顯著加強(qiáng)。Hotten(1998)報(bào)道，有益微生物可在體內(nèi)產(chǎn)生多種消化酶，從而提高飼料利用率。提高機(jī)體免疫機(jī)能微生態(tài)制劑中的有益菌是良好的免疫激活劑，能有效地促進(jìn)干擾素和巨噬細(xì)胞的活性，經(jīng)過促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體和噬菌作用活性等，激發(fā)機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫，提高機(jī)體免疫力和抗病力。劉克琳等〔1997〕用芽孢桿菌制劑飼喂雛雞后發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組的中樞免疫器官發(fā)育比對(duì)照組快，胸腺內(nèi)淋巴細(xì)胞密度加大，T細(xì)胞數(shù)量添加，法氏囊黏膜構(gòu)成皺襞數(shù)量添加，血中T細(xì)胞數(shù)量亦較高。潘康成等〔1997，1998〕發(fā)現(xiàn)地衣芽孢桿菌對(duì)家兔體液免疫功能有促進(jìn)作用。Wren〔1987〕研討闡明，乳酸桿菌可以某種免疫調(diào)理因子的方式起作用，刺激腸道某種部分型免疫反響。潘康成等〔1999〕綜述以為，動(dòng)物口服益生菌后，調(diào)整腸道菌群，使腸道微生態(tài)系統(tǒng)處于最正確的平衡形狀，活化腸黏膜內(nèi)的相關(guān)淋巴組織，使SIgA抗體分泌加強(qiáng)，提高免疫識(shí)別力，并誘導(dǎo)T、B淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生細(xì)胞因子，經(jīng)過淋巴細(xì)胞再循環(huán)而活化全身免疫系統(tǒng)，從而加強(qiáng)機(jī)體免疫功能。大量研討闡明，乳酸菌可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生干擾素、白細(xì)胞介素等細(xì)胞因子，經(jīng)過淋巴循環(huán)活化全身的免疫防御系統(tǒng)，加強(qiáng)機(jī)體抑制癌細(xì)胞增殖的才干。酵母菌細(xì)胞壁含有酵母多糖，其主要活性成分為葡萄朊、甘露聚糖、明角質(zhì)，研討證明這些酵母細(xì)胞壁成分可提高動(dòng)物的免疫力，增進(jìn)安康。霉菌分泌的一些代謝產(chǎn)物，可以加強(qiáng)機(jī)體免疫力。營(yíng)養(yǎng)作用益生菌〔如乳桿菌，雙歧桿菌等〕可以合成多種維生素如葉酸、煙酸、維生素B1、維生素B2等，促進(jìn)機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)、鈣、鐵和維生素D的消化吸收，從而起到促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)和提高消費(fèi)性能的作用。蘇志勇等(1999)用生態(tài)寶(酵母菌、鏈球菌、乳酸桿菌、芽孢桿菌復(fù)合制劑)飼喂蛋雞發(fā)現(xiàn)：實(shí)驗(yàn)組產(chǎn)蛋率比對(duì)照組提高5.7%，產(chǎn)蛋量提高9.1%，飼料轉(zhuǎn)化率提高10%，而腹瀉率下降12.7%。微生態(tài)制劑的合理運(yùn)用已有的研討成果闡明，微生態(tài)制劑無毒副作用、無殘留、可促進(jìn)動(dòng)物消費(fèi)性能發(fā)揚(yáng)、提高飼料轉(zhuǎn)化率，可以替代抗生素作為飼料添加劑運(yùn)用。但由于存在菌種的挑選、活菌數(shù)、菌種的失活、雜菌含量的多少、運(yùn)用條件等問題而導(dǎo)致微生態(tài)制劑活性降低，影響到運(yùn)用效果的反復(fù)性和穩(wěn)定性。因此，在養(yǎng)殖消費(fèi)中為了確保微生態(tài)制劑的運(yùn)用效果，應(yīng)科學(xué)運(yùn)用。菌種的選擇菌種的來源在微生物大家族里，可選作微生態(tài)制劑的菌種很多，包括細(xì)菌、真菌及許多來自土壤、腌制品、發(fā)酵食品以及動(dòng)物消化道和糞便的無毒菌株。1989年美國(guó)食品與藥物管理局〔FDA〕和美國(guó)飼料公定協(xié)會(huì)〔AAFCO〕公布的可平安用于微生態(tài)制劑的微生物菌種有43種，歐洲市售的微生態(tài)制劑約50種。1.黑曲霉2.米曲霉3.凝結(jié)芽胞桿菌4.緩慢芽胞桿菌5.地衣芽胞桿菌6.短小芽胞桿菌7.枯草桿菌〔僅限于不產(chǎn)生抗生素的區(qū)系〕8.嗜淀粉擬桿菌9.多毛擬桿菌10.棲瘤胃擬桿菌11.豬擬桿菌12.青春雙歧桿菌13.動(dòng)物雙歧桿菌14.兩歧雙歧桿菌15.嬰兒雙歧桿菌16.長(zhǎng)雙歧桿菌17.嗜熱性雙歧桿菌18.嗜酸乳桿菌19.短乳桿菌20.保加利亞桿菌21.干酪乳桿菌22.纖維二糖乳桿菌23.彎曲乳桿菌24.德氏乳桿菌25.發(fā)酵乳桿菌26.瑞士乳桿菌27.乳酸乳桿菌28.胚芽乳桿菌29.羅特氏乳桿菌30.腸膜明串珠菌31.乳酸片球菌32.啤酒片球菌33.戊糖片球菌34.費(fèi)氏丙酸桿菌35.謝氏丙酸球菌36.釀酒片球菌37.乳酪鏈球菌38.二乙酰乳酸鏈球菌39.糞鏈球菌40.中間鏈球菌41.乳鏈球菌42.嗜熱鏈球菌43.酵母我國(guó)農(nóng)業(yè)部公布的微生態(tài)制劑菌種2003年公布了15種可以運(yùn)用的的菌種，分別為：地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、雙歧桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌、乳酸腸球菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、乳酸乳桿菌、植物乳桿菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母、沼澤紅假單胞菌。菌種的平安性作為微生態(tài)制劑，菌種的平安性或非病原性是挑選菌種的首要條件。因此，必需確定出菌株的平安性，并且對(duì)該菌種能夠的代謝產(chǎn)物進(jìn)展系統(tǒng)的研討。值得留意的是，一株如今無毒副作用的菌種，未來也能夠會(huì)由于理化、微生物毒素和菌種本身緣由引起負(fù)性突變，所以應(yīng)定期對(duì)消費(fèi)菌種進(jìn)展平安性檢測(cè)或評(píng)價(jià)，留意菌株的變異。評(píng)價(jià)菌種的平安性包括致病性、感染性、毒力或毒素、代謝活性以及菌株的遺傳特性。國(guó)外學(xué)者提供了一些評(píng)價(jià)乳酸菌平安性體外研討的方法，可以自創(chuàng)活菌數(shù)和運(yùn)用劑量微生態(tài)制劑的效果是經(jīng)過有益微生物在動(dòng)物體內(nèi)的一系列生理活動(dòng)來實(shí)現(xiàn)的，其最終效果同動(dòng)物食入活菌的數(shù)量親密相關(guān)。假設(shè)數(shù)量不夠，在體內(nèi)不能構(gòu)成優(yōu)勢(shì)菌群，難以起到益生作用。瑞典規(guī)定乳酸菌制劑活菌數(shù)要到達(dá)2×1010個(gè)/g。我國(guó)正式同意消費(fèi)的制劑中，對(duì)含菌數(shù)量與用量的規(guī)定是：芽孢桿菌含量≥5×108個(gè)/g，乳酸桿菌≥1×107個(gè)/g。德國(guó)學(xué)者以為，仔豬飼料中參與微生態(tài)制劑其含菌量應(yīng)到達(dá)2×105個(gè)/g～5×105個(gè)/g。乳酸桿菌因制劑不同而有差別，其數(shù)量不少于107個(gè)/g，每日添加0.1～3g，普通添加量為0.02%～0.2%。假設(shè)將微生態(tài)制劑添加于飼料中，其目的活菌不應(yīng)低于109個(gè)/kg。關(guān)于添加過量的益生菌產(chǎn)生的后果，鮮有報(bào)道，根據(jù)張日俊〔2007〕的研討結(jié)果，每千克斷奶仔豬飼料中添加6×1011個(gè)枯草芽孢桿菌，其促生長(zhǎng)效果差于最適添加量，但好于不添加組的效果。根據(jù)畜禽的種類和消費(fèi)階段

合理選用微生態(tài)制劑正常菌群在動(dòng)物消化道內(nèi)定植是經(jīng)過細(xì)菌的粘附作用完成的，這種粘附作器具有種屬特性。因此，運(yùn)用微生態(tài)制劑要充分思索運(yùn)用對(duì)象和目的，對(duì)不同的動(dòng)物要區(qū)別對(duì)待。張日俊〔2007〕以為，防治1～7日齡仔豬腹瀉首選植物乳酸菌、乳酸片球菌、糞鏈球菌等產(chǎn)酸的制劑；而促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)發(fā)育、提高日增重和飼料報(bào)酬，那么選用雙歧桿菌等菌株。預(yù)防動(dòng)物常見疾病主要選用乳酸菌、片球菌、雙歧桿菌等產(chǎn)乳酸類的細(xì)菌，效果會(huì)更好；促進(jìn)動(dòng)物快速生長(zhǎng)、提高飼料效率，那么可選用以芽孢桿菌、乳酸桿菌、酵母菌和霉菌等制成的微生態(tài)制劑；假設(shè)以改善養(yǎng)殖環(huán)境為主要目的，應(yīng)從以光合細(xì)菌、硝化細(xì)菌以及芽孢桿菌為主的微生態(tài)制劑中去選擇。普通以為，乳酸菌類在各種動(dòng)物的各階段添加均較好；芽孢菌類在生長(zhǎng)期添加較好，在幼齡期可以添加；曲霉菌類在幼齡期、水產(chǎn)動(dòng)物全期不用添加；酵母菌類在生長(zhǎng)期不用添加；在水產(chǎn)動(dòng)物養(yǎng)殖中，以改善水質(zhì)為目的時(shí)，可將微生態(tài)制劑或光合細(xì)菌直接灑于水中。運(yùn)用時(shí)間及運(yùn)用方法微生態(tài)制劑在動(dòng)物的整個(gè)消費(fèi)過程中都可以運(yùn)用，但不同的消費(fèi)階段其作用效果不盡一樣。在動(dòng)物幼齡階段，體內(nèi)微生態(tài)平衡尚未完全建立，抵抗疾病的才干較弱，此時(shí)引入益生菌，可較快地進(jìn)入體內(nèi)，占據(jù)附著點(diǎn)，效果最正確。如新生反芻動(dòng)物腸道內(nèi)有益微生物種群數(shù)量的添加不僅可以促進(jìn)宿自動(dòng)物對(duì)纖維素的消化，而且有助于防止病原微生物損害腸道。另外在斷奶、運(yùn)輸、飼料改換、天氣突變和豢養(yǎng)環(huán)境惡劣等應(yīng)激條件下，動(dòng)物體內(nèi)微生態(tài)平衡遭到破壞，運(yùn)用微生態(tài)制劑對(duì)構(gòu)成優(yōu)勢(shì)種群極為有利。因此，把握益生菌的運(yùn)用時(shí)機(jī)，盡早并長(zhǎng)期飼喂，使其益生菌的功能得到充分表達(dá)。運(yùn)用方法一是延續(xù)運(yùn)用，二是階段性運(yùn)用，三是在某些階段一次性運(yùn)用。留意運(yùn)用條件或環(huán)境堅(jiān)持菌種的穩(wěn)定性或活性，是微生態(tài)制劑運(yùn)用的又一重要問題。其影響要素主要有溫度、濕度、酸度、機(jī)械摩擦和擠壓以及室溫儲(chǔ)存的時(shí)間等，制粒溫度的影響尤為重要。溫度不同的菌種對(duì)高溫的耐受力差別較大，芽孢桿菌耐受力最強(qiáng)，100℃下2min只損失5%～10%，而在80℃下5min乳酸桿菌、酵母菌損失70%～80%，95℃下2min損失98%～99%。普通制粒溫度為80～90℃，對(duì)芽孢桿菌影響較小，對(duì)乳酸桿菌、酵母菌和糞鏈球菌等影響較大。徐海燕〔2005〕對(duì)枯草芽孢桿菌經(jīng)過100℃處置15min和30min，活菌數(shù)損失率分別為2.1%和4.2%。水分活菌在枯燥形狀下存活時(shí)間長(zhǎng)，水分升高那么存活率降低。飼料原料如玉米、豆餅含水量多在14%左右，與微生態(tài)制劑混合后，對(duì)活菌影響