分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)考試題庫

一、名詞解釋1.分配常數(shù)：又稱分配系數(shù)，是指一種分析物在兩種不相混合溶劑中的平衡常數(shù)。2.多肽鏈的末端分析：確定多肽鏈的兩末端可作為整條多肽鏈一級構(gòu)造測定的標(biāo)志，分為氨基端分析和羧基端分析。3.連接酶：指能將雙鏈DNA中一條單鏈上相鄰兩核苷酸連接成一條完整的分子的酶。4.預(yù)雜交：在分子雜交實(shí)驗(yàn)之前對雜交膜上非樣品區(qū)域進(jìn)展封閉，用以降低探針在膜上的非特異性結(jié)合。5.反轉(zhuǎn)錄PCR：是將反轉(zhuǎn)錄RNA與PCR結(jié)合起來建立的一種PCR技術(shù)。首先進(jìn)展反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生cDNA,然后進(jìn)展常規(guī)的PCR反響。6.穩(wěn)定表達(dá)：外源基因轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞并整合入基因組后的表達(dá)。7.基因敲除：是指對一個構(gòu)造但功能未知或未完全知道的基因，從分子水平上設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，將該基因從動物的原基因組中去除，或用其它無功能的DNA片斷取代，然后從整體觀察實(shí)驗(yàn)動物表型，推測相應(yīng)基因的功能。8.物理圖譜：人類基因組的物理圖是指以核苷酸序列的DNA片段為“路標(biāo)〞，以堿基對(bp，kb，Mb)作為根本測量單位(圖距)的基因組圖。9.質(zhì)譜圖：不同質(zhì)荷比的離子經(jīng)質(zhì)量分析器分開后，到檢測器被檢測并記錄下來，經(jīng)計(jì)算機(jī)處理后所表示出的圖形。10.側(cè)向散射光：激光束照射細(xì)胞時，光以90度角散射的訊號，用于檢測細(xì)胞內(nèi)部構(gòu)造屬性。11.離子交換層析：是以離子交換劑為固定相，液體為流動相的系統(tǒng)中進(jìn)展的層析。12.Edman降解：從多肽鏈游離的N末端測定氨基酸殘基的序列的過程。13.又稱為限制性核酸內(nèi)切酶(restrictionendonuclease)：是能夠特異識別雙鏈DNA序列并進(jìn)展切割的一類酶。14.電轉(zhuǎn)移：用電泳技術(shù)將凝膠中的蛋白質(zhì)，DNA或RNA條帶按原位轉(zhuǎn)移到固體支持物，形成印跡。15.多重PCR：是在一次反響中參加多對引物，同時擴(kuò)增一份模板樣品中不同序列的PCR過程。:在表達(dá)載體的多克隆位點(diǎn)上連有一段融合表達(dá)標(biāo)簽〔Tag〕，表達(dá)產(chǎn)物為融合蛋白〔有分N端或者C端融合表達(dá)〕，方便后繼的純化步驟或者檢測。17.同源重組：發(fā)生在DNA同源序列之間，有一樣或近似堿基序列的DNA分子之間的遺傳交換。18.遺傳圖譜又稱連鎖圖譜(linkagemap)，它是以具有遺傳多態(tài)性的遺傳標(biāo)記為“路標(biāo)〞，以遺傳學(xué)距離為圖距的基因組圖。19.碎片離子：廣義的碎片離子為由分子離子裂解產(chǎn)生的所有離子。20.前向散射光：激光束照射細(xì)胞時，光以相對軸較小角度向前方散射的訊號用于檢測細(xì)胞等離子的外表屬性，信號強(qiáng)弱與細(xì)胞體積大小成正比。21.親和層析:利用共價連接有特異配體的層析介質(zhì)別離蛋白質(zhì)混合物中能特異結(jié)合配體的目的蛋白或其他分子的一種層析法。(利用分子與其配體間特殊的、可逆性的親和結(jié)合作用而進(jìn)展別離的一種層析技術(shù)。)22.蛋白質(zhì)的局部水解:不完全水解得到的水解產(chǎn)物使各種大小不等的肽段和單個氨基酸。23.TaqDNA聚合酶:存在于水生嗜熱菌(Thermusaquaticus)的嗜熱DNA聚合酶，可在74℃復(fù)制DNA，在9524.探針:在分子雜交中用來檢測互補(bǔ)序列的帶有標(biāo)記的單鏈DNA或RNA片段。25.引物:在多聚酶鏈?zhǔn)椒错懼校糜谝龑?dǎo)脫氧核糖核酸合成的一段核苷酸序列。26.包含體:包埋病毒粒子具一定形狀和大小的蛋白結(jié)晶體，在相差顯微鏡下呈現(xiàn)強(qiáng)的折光性，由單一多肽構(gòu)成。27.轉(zhuǎn)基因動物:通過基因轉(zhuǎn)移技術(shù)獲得的整合有外源基因的動物個體。28.序列標(biāo)簽：基因組中任何單拷貝的長度在100～500bp之間的DNA序列，與核酸內(nèi)切酶識別序列相關(guān)聯(lián)。29.基峰:質(zhì)譜圖中表現(xiàn)為最高豐度離子的峰。30.短通濾片:是一種能讓短波方向的光透過,長波方向的截止的濾光片.31.凝膠過濾:利用凝膠的網(wǎng)狀構(gòu)造根據(jù)被別離物質(zhì)分子大小進(jìn)展別離的一種方法。32.蛋白質(zhì)的完全水解:徹底水解得到的水解產(chǎn)物為各種氨基酸的混合物33.末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶:不需要模板，以dNTP為底物催化脫氧核糖核苷酸依次加到DNA鏈(片段)3′-OH端的酶。34.切口平移:制備標(biāo)記DNA的一種方法。先用DNA酶使DNA雙鏈上形成不對稱的切口，再利用DNA聚合酶Ⅰ的5′→3′外切酶活性將切口處的5′-P-核苷酸逐個切除，同時其DNA聚合酶活性又不斷將新的含標(biāo)記的核苷酸按堿基配對原則參加形成新鏈，這樣就使缺口不斷向3′端移動，同時標(biāo)記了DNA。35.退火:兩條單鏈多核苷酸通過互補(bǔ)堿基之間的氫鍵形成雙鏈分子的過程。可發(fā)生在同一來源或不同來源核酸鏈之間，可以形成雙鏈DNA分子、雙鏈RNA或DNA-RNA雜交分子。：轉(zhuǎn)染的DNA不與宿主染色體整合，不能隨宿主基因組的復(fù)制而擴(kuò)增，只是臨時在一個相對短的時間內(nèi)大量擴(kuò)增，只能在細(xì)胞內(nèi)維持兩三天。37.嵌合體：一種含有兩種以上基因型組織的機(jī)體，可能是基因突變、染色體異常別離或移植的結(jié)果。38.序列圖譜：以某一染色體DNA上所含的全部堿基序列繪制圖譜，包括：轉(zhuǎn)錄序列和非轉(zhuǎn)錄序列39.分子離子：有機(jī)質(zhì)譜分析中，化合物分子失去一個電子形成的離子40.長通濾片:是一種能讓長波方向的光透過,短波方向的截止的濾光片.41.基因敲入：利用基因同源重組，將外源有功能基因〔基因組原先不存在、或已失活的基因〕，轉(zhuǎn)入細(xì)胞與基因組中的同源序列進(jìn)展同源重組，插入到基因組中，在細(xì)胞內(nèi)獲得表達(dá)的技術(shù)。42.缺口平移:缺口翻譯法或切口平移法是實(shí)驗(yàn)室最常用的一種脫氧核糖核酸探針標(biāo)記法。利用E.coliDNA多聚酶I的多種酶促活性將標(biāo)記的dNTP摻入到新合成的DNA鏈中從而形成高比活性的均勻標(biāo)記的DNA探針。線狀、超螺旋及帶缺口的環(huán)狀雙鏈DNA均可作為缺口平移法的模版。44.化學(xué)斷裂法：化學(xué)斷裂法化學(xué)斷裂法是采用特殊的化學(xué)試劑，將DNA片段分別從特定堿基局部裂解，得到從同一標(biāo)記端開場，以特定堿基結(jié)尾的一系列長短不一的DNA片段(Maxam、Gilbert，1977)。利用聚丙烯酰胺凝膠電泳使它們按大小別離，根據(jù)放射自顯影條帶的相對位置和裂解專一性讀出DNA序列。45.有效成分：指一種混合物中，對生物體代謝或者化學(xué)反響起作用的成分。46.雜質(zhì)：物質(zhì)別離過程中除所要的目的產(chǎn)物外的物質(zhì)總稱為雜質(zhì)。47.鹽析:在高鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度隨鹽濃度的升高而降低的過程這種現(xiàn)象稱為鹽析。48.鹽溶：酶蛋白可溶于水，而且在低濃度的鹽存在的條件下，酶在水中的溶解度隨鹽濃度的升高而增加49.塔板理論：塔板理論是色譜學(xué)的根底理論，塔板理論將色譜柱看作一個分餾塔，待別離組分在分餾塔的塔板間移動，在每一個塔板內(nèi)組分分子在固定相和流動相之間形成平衡，隨著流動相的流動，組分分子不斷從一個塔板移動到下一個塔板，并不斷形成新的平衡。一個色譜柱的塔板數(shù)越多，則其別離效果就越好。時，不同物質(zhì)在兩相中的分布會不同。：在DNA分子中，RNA聚合酶能夠結(jié)合并導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄起始的序列。：加尾信號-多聚A尾巴真核生物mRNA的3’端都有一段多聚A尾巴〔polyAtail〕，這種尾巴不由基因編碼，而是在轉(zhuǎn)錄后加到mRNA上的。加尾過程受位于終止密碼3’端的加尾信號序列所控制。一種順式作用元件。長約數(shù)百個核苷酸對，通常位于啟動子正調(diào)控元件或負(fù)調(diào)控元件之間的一種調(diào)控序列。53.核糖體識別位點(diǎn):核糖體識別并結(jié)合信使核糖核酸的位點(diǎn)。原核生物信使核糖核酸起始密碼子的上游含有核糖體識別和結(jié)合序列；真核生物信使核糖核酸的5′帽子構(gòu)造對核糖體的識別起一定作用。：是基因的體外轉(zhuǎn)錄和翻譯是20世紀(jì)70年代開展起來的一項(xiàng)分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，是研究離體條件下(非細(xì)胞體系)基因表達(dá)情況的理想體系。55.報告基因(reportergene)：是一種編碼可被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因，也就是說，是一個其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因。把它的編碼序列和基因表達(dá)調(diào)節(jié)序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，在調(diào)控序列控制下進(jìn)展表達(dá)，從而利用它的表達(dá)產(chǎn)物來標(biāo)定目的基因的表達(dá)調(diào)控，篩選得到轉(zhuǎn)化體。由α-互補(bǔ)而產(chǎn)生的LacZ+細(xì)菌在誘導(dǎo)劑IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在時產(chǎn)生藍(lán)色菌落，因而易于識別。然而，當(dāng)外源DNA插入到質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn)后，幾乎不可防止地導(dǎo)致無α-互補(bǔ)能力的氨基端片段，使得帶有重組質(zhì)粒的細(xì)菌形成白色菌落。這種重組子的篩選，又稱為藍(lán)白斑篩選。是指包含了一個生物細(xì)胞中全部DNA序列的片段與載體連接構(gòu)成重組DNA分子經(jīng)轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞后所形成的克隆群體。能從文庫中篩選到至少99％的基因組DNA做多少重組子才能代表一個生物所有基因組DNA的全部：蛋白質(zhì)序列指紋圖譜基于多序列比對的結(jié)果，它由比對結(jié)果得到一系列相當(dāng)保守的序列模體構(gòu)建而成，用來表示蛋白質(zhì)家族特征。61.轉(zhuǎn)基因動物：是指基因組中整合有外源基因、外源基因能夠表達(dá)并按孟德爾定律遺傳的一類動物。62.轉(zhuǎn)基因(transgene)：將外源基因整合入動物基因組中的操作。63轉(zhuǎn)染：指真核細(xì)胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標(biāo)志的過程。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染〔永久轉(zhuǎn)染〕兩大類。64.基因診斷：針對DNA和或mRNA的分子診斷，通過分析這些遺傳信息分子的序列，從而在分子水平上確定疾病的病因，具高度特異性。65.基因治療：利用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，將正常的基因?qū)牖颊甙屑?xì)胞使其發(fā)揮作用以糾正或補(bǔ)償基因缺陷或?qū)⒒颊甙屑?xì)胞異常表達(dá)的基因敲除或封閉以到達(dá)對疾病進(jìn)展治療的方法。66.自殺基因：某些基因表達(dá)的特異性酶可以催化對真核細(xì)胞無毒或低毒的藥物前體，轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂幸种坪怂岷铣尚?yīng)的抗代謝藥物，進(jìn)而選擇性地將轉(zhuǎn)染了該基因的腫瘤細(xì)胞“自殺〞。這些基因也相應(yīng)地被稱為“自殺基因〞。67.旁觀者效應(yīng):“自殺基因〞治療不僅使轉(zhuǎn)導(dǎo)了“自殺基因〞的腫瘤細(xì)胞在用藥后被殺死，而且與其相鄰的未轉(zhuǎn)導(dǎo)“自殺基因〞的腫瘤細(xì)胞也被殺死。68.CASPASE：是近年來發(fā)現(xiàn)的一組存在于胞質(zhì)溶膠中的構(gòu)造上相關(guān)的半胱氨酸蛋白酶，它們的一個重要共同點(diǎn)是特異地?cái)嚅_天冬氨酸殘基C端的肽鍵。Caspase在凋亡過程中是起著必不可少的作用，細(xì)胞凋亡的過程實(shí)際上是Caspase不可逆有限水解底物的級聯(lián)放大反響過程。69.蛋白質(zhì)組：一個基因組、一個細(xì)胞或組織或一種生物體所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)：是蛋白質(zhì)組概念的延伸，是在整體水平上研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)組及其活動規(guī)律的科學(xué)。70.差異表達(dá)：基因表達(dá)調(diào)控的一種方式。指在對信號或誘導(dǎo)物做出應(yīng)答時，選擇表達(dá)不同的基因，或使基因的表達(dá)水平有所不同。71.顯微注射：直接用顯微注射器將重組DNA注射到哺乳動物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中的方法。是轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)中將基因?qū)氩溉閯游锛?xì)胞的主要方法之一。72.干細(xì)胞：具有無限制自我更新能力、同時也可分化成特定組織的細(xì)胞，在細(xì)胞發(fā)育過程中處于較原始階段。73.酶的比活性：酶純度的度量標(biāo)志，是指在特定特定條件下，單位質(zhì)量蛋白質(zhì)或RNA所具有的酶活力單位數(shù)。74.提純倍數(shù)：反響純化方法的效率，純化倍數(shù)=純化后的比活/純化前的比活。75.分子雜交：一條DNA單鏈或RNA單鏈與另一條單鏈通過堿基互補(bǔ)形成雙鏈分子的過程。76.基因組：一個生物體的基因組是指包含在該生物的DNA〔局部病毒是RNA〕中的全部遺傳信息，又稱基因體(genome)?；蚪M包括基因和非編碼DNA。：STS是基因組中任何單拷貝的長度在100～500bp之間的DNA序列，與核酸內(nèi)切酶識別序列相關(guān)聯(lián)。77.SNP:單核苷酸多態(tài)性,是指在基因組上單個核苷酸的變異，形成的遺傳標(biāo)記，其數(shù)很多，多態(tài)性豐富。指在基因組上單個核苷酸的變異,包括置換、顛換、缺失和插入。：用特殊的一種緩沖液〔兩性電解質(zhì)〕在凝膠〔常用聚丙烯酰胺凝膠〕內(nèi)制造一個pH梯度，電泳時每種蛋白質(zhì)就將遷移到等于其等電點(diǎn)〔pI〕的pH處〔此時此蛋白質(zhì)不再帶有凈的正或負(fù)電荷〕，形成一個很窄的區(qū)帶。：:在DNA、RNA或蛋白質(zhì)等生物大分子發(fā)生變性(如使用十二烷基硫酸鈉、尿素、乙二醛等變性劑)的條件下進(jìn)展的凝膠電泳。81.粘性末端:當(dāng)一種限制性內(nèi)切酶在一個特異性的堿基序列處切斷DNA時，就可在切口處留下幾個未配對的核苷酸片斷，即5’突出。這些片斷可以通過重疊的5‘末端形成的氫鍵相連，或者通過分子內(nèi)反響環(huán)化。因此稱這些片斷具有粘性，叫做粘性末端。82.質(zhì)粒的不相容性:細(xì)菌質(zhì)粒分類的一種標(biāo)準(zhǔn)，指在無選擇壓力的條件下，親緣關(guān)系密切的不同質(zhì)粒或同一不相容群的質(zhì)粒不能穩(wěn)定共存于同一宿主細(xì)胞，在細(xì)胞增殖過程中將有一種被排斥的現(xiàn)象。83.穩(wěn)定表達(dá):轉(zhuǎn)染的DNA與宿主染色體整合，能隨宿主基因組的復(fù)制轉(zhuǎn)錄和翻譯，并被穩(wěn)定遺傳。84.多克隆位點(diǎn):是包含多個〔最多20個〕限制性酶切位點(diǎn)的一段很短的DNA序列。也稱為多位點(diǎn)切頭，是基因工程中藏用到的載體質(zhì)粒的標(biāo)準(zhǔn)配置序列。在多克隆位點(diǎn)中，每個限制性酶切位點(diǎn)通常是唯一的，即他們在一個特定的載體質(zhì)粒中只出現(xiàn)一次85.基因打靶：是利用DNA同源重組原理，在基因組中的某一特定部位進(jìn)展定點(diǎn)的基因重組，是研究基因的功能的有效手段。包括基因敲除〔geneknockout〕和基因敲入〔geneknockin〕。86.慢病毒：屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科。慢病毒核蛋白質(zhì)前整合復(fù)合物具有噬核特性，病毒基因組運(yùn)輸至細(xì)胞核，從而使慢病毒可以感染和在非有絲分裂細(xì)胞中復(fù)制。這一特性使慢病毒成為基因治療的轉(zhuǎn)移載體。87.短串聯(lián)重復(fù)序列：是第二代遺傳標(biāo)志，染色體上的一種串聯(lián)重復(fù)序列，重復(fù)單位是2-6個核苷酸，具有高度多態(tài)性，又可以利用ＰＣＲ技術(shù)進(jìn)展自動化操作，因而為完成人類基因組方案中遺傳圖采用的主要遺傳標(biāo)志。88.限制性酶切片段多態(tài)性：是第一代遺傳標(biāo)志一位置上由于核苷酸序列的差異而造成的限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)喪失而表達(dá)。89..熒光原位雜交：是一種物理圖譜繪制方法，使用熒光素標(biāo)記探針，以檢測探針和分裂中期的染色體活分裂中期的染色體或分裂間期的染色質(zhì)的雜交。熒光原位雜交圖譜：用不同顏色標(biāo)記的各種DNA序列〔探針〕，與染色體上的互補(bǔ)序列雜交而不破壞染色體的整體形態(tài)，顯微鏡下觀察、識別熒光標(biāo)記在染色體上的定位而繪制的圖譜。90.連續(xù)克隆系〔圖〕：是最重要的一種圖譜，以序列標(biāo)簽為標(biāo)志。:是核酸分子雜交的一種，指液相中的核酸探針與固定在固相支持物的上的待測核酸片段進(jìn)展雜交的過程，分為原位雜交和印記雜交兩種。：是核酸分子雜交的一種，指待測核酸樣品與探針在液相中發(fā)生雜交。：主要用來檢測染色質(zhì)構(gòu)造與功能狀態(tài)的方法。當(dāng)染色質(zhì)構(gòu)造致密，DNA被組蛋白壓縮很緊時，基因是不表達(dá)的，同時也對DNA酶不敏感。反之，構(gòu)造蓬松、活潑進(jìn)展基因表達(dá)的染色質(zhì)，則易遭DNA酶的降解。：用于分析混合物中某一組分對某些化學(xué)處理或光處理后變化的雙向電泳技術(shù)。樣品加樣后先從一個方向進(jìn)展電泳別離，經(jīng)化學(xué)或光處理后，再以與第一次電泳垂直方向進(jìn)展第二次電泳別離，則經(jīng)過處理未被修飾的組分皆位于電泳圖譜的對角線上。不在對角線處出現(xiàn)的多肽含有由于二硫鍵氧化而形成的半胱氨酸殘基，由此可分析多肽中二硫鍵位置。：通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進(jìn)展定性和定量分析的方法。96.Ti質(zhì)粒：是在根瘤土壤桿菌細(xì)胞中存在的一種染色體外自主復(fù)制的環(huán)狀雙鏈DNA分子。它控制根瘤的形成，可作為基因工程的載體。：E.coliDNA聚合酶Ⅰ經(jīng)胰蛋白酶或枯草桿菌蛋白酶局部水解生成的，保存了5’-3’聚合酶和3’-5’外切酶活性，但缺少5’-3’外切酶活性。：有機(jī)質(zhì)譜分析中，化合物分子通過某種電離方式失去一個外層電價電子形成的帶正電荷的離子，常用M.+表示。：廣義的碎片離子為由分子離子裂解產(chǎn)生的所有離子。：質(zhì)譜圖中表現(xiàn)為最高豐度離子的峰。計(jì)算各峰相對值時常以基峰為100.二、填空1.在生物大分子提取時，材料的選擇原則是〔含有效成分豐富、穩(wěn)定性好〕、〔來源豐富，保持新鮮〕〔適合加工提取〕和〔有經(jīng)濟(jì)利用價值〕。2.YAC的三個主要功能成份分別是〔端粒〕、〔著絲?！澈汀睞RS元件〕。3.從功能上可將Caspase分為〔ICE亞類〕、〔凋亡啟動亞類〕和〔凋亡效應(yīng)亞類〕三大類。4.限制酶切割DNA后產(chǎn)生的切口有〔平末端〕、〔3’粘性末端〕和〔5’粘性末端〕三種形式。5.印跡技術(shù)常用的固相支持物分別是〔尼龍膜〕和〔硝酸纖維素膜〕。6.進(jìn)展生物活性物質(zhì)提取時，動物性來源主要有〔〕、〔〕、〔〕和〔〕。7.Kozak規(guī)則說明在起始密碼子上游的〔-3〕、〔-6〕和〔-9〕位置最好是G。8.流式細(xì)胞儀用濾片減少熒光干擾，這些濾片分別是(長通濾片)、(短通濾片)和(帶通濾片)。9.基因工程中使用的連接酶有〔T4DNA連接酶〕和〔大腸桿菌連接酶〕，其中以〔T4DNA連接酶〕更常用。10.按雜交介質(zhì)的不同可將雜交分為〔固相雜交〕和〔液相雜交〕兩類。11.生物活性物質(zhì)提取時必需同時建立一套有效的檢測手段，常用的技術(shù)有〔PCR〕、〔電泳技術(shù)〕、〔免疫標(biāo)記技術(shù)〕及〔〕。12.轉(zhuǎn)基因的三個層次分別是〔細(xì)菌轉(zhuǎn)基因〕、〔離體真核細(xì)胞轉(zhuǎn)基因〕和〔生物轉(zhuǎn)基因〕。13.流式細(xì)胞儀主要由〔流動室和液流〕系統(tǒng)、〔激光源和光學(xué)〕系統(tǒng)、光電管及檢測系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)以及〔細(xì)胞分選系統(tǒng)〕系統(tǒng)等五局部組成。14.連接酶連接目的基因和載體時需要能量，〔T4DNA連接酶〕連接酶以ATP為能量形式，而〔大腸桿菌連接酶〕連接酶則以〔NAD+〕供能。15.三種印跡技術(shù)的名稱分別是〔Southern〕、〔Northern〕和〔Western〕。16.細(xì)胞破碎的方法主要有〔機(jī)械破碎法〕〔物理破碎法〕、〔化學(xué)破碎法〕、〔酶解法〕。17.轉(zhuǎn)基因動物的主要用途有〔疾病型轉(zhuǎn)基因動物〕、〔利用轉(zhuǎn)基因動物制藥〕、〔動物改進(jìn)型〕和根底生物學(xué)研究。18.流式細(xì)胞檢測時三個重要的參數(shù)分別代表FS〔前向散射〕、SS〔側(cè)向散射〕和FL〔每條線路上的光強(qiáng)〕。19.連接酶〔大腸桿菌連接酶〕只能連接粘性末端，而〔T4DNA連接酶〕即能連接粘端又能連接平端。20.三種印跡技術(shù)檢測的目的物分別為〔Southern測蛋白〕、(Northern—測RNA〕和〔western---測DNA〕。21.DNA序列測定的主要方法有〔sanger法〕、〔Maxam-Gilbert化學(xué)降解法〕、〔基因芯片技術(shù)〕及(PCR測序〕等。22.雙脫氧合成終止法是在不同體系的底物中參加一種〔ddNTP〕，在DNA合成過程中聚合酶隨機(jī)終止合成反響，這個體系中每一條鏈都以〔相應(yīng)的ddNTP〕結(jié)尾，經(jīng)電泳后可〔不同片段末端的ddNTP〕讀出DNA的序列。23.化學(xué)斷裂法利用特異的選擇性試劑斷裂DNA鏈，其中嘌呤選擇試劑為〔甲酸〕，嘧啶選擇性試劑為〔肼〕。24.PCR時，為了防止假陽性結(jié)果的出現(xiàn)需要分別做〔陰性對照〕、〔陽性對照〕和〔試劑對照〕三個對照。25.PCR的一個循環(huán)包含〔變性〕、〔退火〕和〔延伸〕三個過程。26.常用的測定蛋白質(zhì)含量的方法有〔凱氏定氮法〕、〔Lowry法〕、〔紫外光譜吸收法〕及〔考馬斯亮藍(lán)染色法〕等。27.基因組方案所作的四張圖分別是〔物理圖〕、〔遺傳圖〕、〔轉(zhuǎn)錄圖〕和〔序列圖〕。28.遺傳圖作圖時所用的遺傳標(biāo)記分別是〔SNP〕、〔STR〕和〔RFLP〕。29.物理圖作圖的常用方法為〔熒光原位雜交作圖〕、〔限制性酶切作圖〕、〔輻射雜交作圖〕及〔稀有切點(diǎn)限制作圖〕。30.原核細(xì)胞常用的四個表達(dá)系統(tǒng)分別是〔大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)〕、〔鏈霉菌表達(dá)系統(tǒng)〕、〔芽孢桿菌表達(dá)系統(tǒng)〕和〔藍(lán)藻表達(dá)系統(tǒng)〕。31.大腸桿菌表達(dá)載體構(gòu)建時必要的順式元件有〔啟動子和終止子〕〔核糖體結(jié)合位點(diǎn)〕、〔復(fù)制子〕及〔篩選標(biāo)記〕等。32.活化的CASPASES是由同源〔4〕聚體組成，酶分子中含有〔半胱氨酸〕殘基，作用的底物分子中含有〔天冬氨酸〕殘基。33.不連續(xù)電泳的三個效應(yīng)分別是〔濃縮效應(yīng)〕、〔分子篩效應(yīng)〕和〔電荷效應(yīng)〕。34.轉(zhuǎn)基因動物制備過程中，轉(zhuǎn)基因的方法主要有〔微量注射〕、〔胚胎干細(xì)胞法〕、〔生殖細(xì)胞載體法〕、〔逆轉(zhuǎn)錄和慢病毒轉(zhuǎn)染法〕、〔精子載體法〕、〔受體介導(dǎo)法〕等。35.基因敲除技術(shù)是建立在〔胚胎干細(xì)胞植入〕、〔胚胎顯微操作技術(shù)〕和〔基因重組〕三個技術(shù)的根底上的邊緣技術(shù)。36.酵母質(zhì)粒載體的主要類型有〔YIp〕、〔YEp〕、〔YRp〕和〔YCp〕。三、選擇題CAMaxamBGilbertCSangerDChargaffECrickAA金黃色葡萄球菌B大腸桿菌C芽孢桿菌D藍(lán)藻E鏈霉菌CA啟動子B篩選標(biāo)記CSD序列D加尾信號E增強(qiáng)子C4.隨機(jī)引物一般是由6個核苷酸組成的片段，原則上可設(shè)計(jì)多少種這樣的引物A42B44C46D48E410CA95%B96%C97%D98%E99%BA1985B1990C1995D1997E2003BA甲硫氨酸B賴氨酸C苯丙氨酸D亮氨酸E蘇氨酸BApUCBpBR322CpUR278DpGPD-2E柯斯質(zhì)粒C9.轉(zhuǎn)基因動物制備時，能使目的基因表達(dá)不影響鄰近基因表達(dá)的元件是A啟動子B增強(qiáng)子C絕緣子D沉默子EKozak序列A10.PCR引物設(shè)計(jì)時，按經(jīng)歷，引物自身存在的連續(xù)互補(bǔ)序列一般不超過A3bpB5bpC7bpD9bpE10bpA11.雙脫氧合成終止法測DNA序列時，加A體系中所得到的DNA片段都是以哪個核苷酸結(jié)尾AABCCGDTEUC1AKozak序列B啟動子CSD序列D起始密碼E帽子構(gòu)造C1A啟動子B核糖體識別位點(diǎn)C信號肽序列D報告基因E加尾信號B1A彩色PCRB差異顯示PCRC原位PCRD不對稱PCRE定量PCRD15.蛋白質(zhì)組成分析時，酸水解的主要缺點(diǎn)是破壞了以下哪種氨基酸A絲氨酸B脯氨酸C組氨酸D色氨酸E酪氨酸E16.人類基因組方案是哪年完成的A1985B1990C1995D1997E2003C17.胃蛋白酶專一性位點(diǎn)是由以下哪種氨基酸年形成的肽鍵A甲硫氨酸B賴氨酸C苯丙氨酸D亮氨酸E蘇氨酸D1A質(zhì)粒B粘粒C穿梭質(zhì)粒DTi質(zhì)粒EF質(zhì)粒C1A啟動子B核糖體結(jié)合位點(diǎn)C帽子構(gòu)造D起始密碼E絕緣子C20.PCR引物設(shè)計(jì)時，與非擴(kuò)增區(qū)的同源性不能超過A50%B60%C70%D80%E90%B21.合成終止法測DNA序列時，不用的DNA聚合酶是ADNA聚合酶IBDNA聚合酶IICTaqDNA聚合酶DKlenow片段E測序酶A2子一般位于啟動子與第幾個構(gòu)造基因之間A1B2C3D4E5E2A新霉素基因BDAD基因C博萊