菌落計數(shù)器校準(zhǔn)規(guī)范

JJF1751—20191菌落計數(shù)器校準(zhǔn)規(guī)范1范圍本規(guī)范適用于具有掃描成像系統(tǒng),并根據(jù)成像結(jié)果進行處理,可以自動進行計數(shù)得到計數(shù)結(jié)果的菌落計數(shù)器的校準(zhǔn)。其他類型的菌落計數(shù)器,可參照本規(guī)范執(zhí)行。2引用文件本規(guī)范引用了下列文件:JJF1059.1測量不確定度評定與表示GB4789.2—2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)的測定GB/T20733—2006數(shù)碼照相機術(shù)語CIPADC-003-Translation-2003數(shù)碼相機分辨率的測量方法ISO12233:2000攝影電子靜物照相機分辨率測量(Photography—Electronic凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本規(guī)范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規(guī)范。3術(shù)語3.1分辨率resolution表示數(shù)字圖像拍攝系統(tǒng)或數(shù)字圖像拍攝系統(tǒng)組件分辨空間圖像細節(jié)能力的度量。3.2鑒別力detectionlimited菌落計數(shù)器可以識別最小菌落的能力,以儀器可以識別的最小菌落的直徑表示。4概述菌落計數(shù)器(以下簡稱儀器)是對經(jīng)過處理的平皿上的菌落進行自動分析計數(shù)的儀器,主要由圖像拍攝系統(tǒng)(主要包括光源和CCD圖像傳感器)、圖像處理系統(tǒng)以及計數(shù)顯示設(shè)備等組成。分析時,首先采用彩色圖像傳感器獲取平皿圖像,然后通過專業(yè)軟件對圖像上的菌落進行處理,處理后的圖像由計數(shù)系統(tǒng)進行菌落統(tǒng)計分析,得到該平皿上的菌落總數(shù)。5計量特性5.15.25.35.45.5示值誤差重復(fù)性鑒別力色溫分辨率JJF1751—201926校準(zhǔn)條件6.1環(huán)境條件6.1.1環(huán)境溫度:15℃~30℃。6.1.2環(huán)境相對濕度:不大于75%。6.1.3電源:電壓(220±22)V,頻率(50±1)Hz,并具有良好的接地。6.2校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及其他設(shè)備6.2.1模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)能覆蓋儀器量程的高、中、低三個測量范圍,相對擴展不確定度不超過2%。6.2.2模擬菌落大小標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。模擬菌落直徑范圍應(yīng)覆蓋(0.10~4.00)mm,擴展不確定度不超過0.04mm(k=2)。6.2.3分辨率測試圖卡。ISO12233分辨率測試圖卡或與該圖卡具有同等測試效果的分辨率測試圖卡。6.2.4色溫表。測量范圍(2000~9000)K,最大允許誤差±200K。7校準(zhǔn)項目和校準(zhǔn)方法7.1示值誤差儀器的示值誤差以模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測量值與標(biāo)準(zhǔn)值的相對誤差表示。開啟儀器,按照使用說明書進行調(diào)試,進入正常工作狀態(tài)。根據(jù)儀器量程的高、中、低三個測量范圍選擇相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)值的模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行掃描計數(shù)。每種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測量3次,記錄測量值,并按照公式(1)計算每個校準(zhǔn)點的示值誤差,取其絕對值最大者作為儀器的示值誤差。Δi=×100%(1)式中:Δi—示值誤差,%;Ii—測量平均值,CFU;Isi—標(biāo)準(zhǔn)值,CFU。7.2重復(fù)性測量重復(fù)性以模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)6次測量結(jié)果的相對實驗標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。儀器按照7.1的工作條件,取標(biāo)準(zhǔn)值為量程中間值的模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)掃描6次,按照公式(2)計算測量重復(fù)性。RSD=××100%(2)式中:RSD—相對實驗標(biāo)準(zhǔn)偏差,%;Ii—單次測量值,CFU;JJF1751—20193I—測量平均值,CFU;n—測量次數(shù)。7.3鑒別力儀器按照7.1的工作條件,將模擬菌落大小標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)置于拍攝腔內(nèi)成像,記錄儀器可以識別的最小模擬菌落的直徑,該最小模擬菌落的直徑即為儀器鑒別力。7.4分辨率儀器按照7.1的工作條件,將分辨率測試圖卡置于拍攝腔內(nèi)拍攝成像,直接保存成像結(jié)果,通過軟件讀出分辨率。7.5色溫儀器光源穩(wěn)定10min后,將色溫表置于拍攝腔內(nèi)進行測量。測量6次,取6次測量結(jié)果的平均值作為儀器光源的色溫。8校準(zhǔn)結(jié)果表達經(jīng)校準(zhǔn)的菌落計數(shù)器應(yīng)出具校準(zhǔn)證書,校準(zhǔn)證書應(yīng)符合JJF1071—2010中5.12的要求,證書內(nèi)頁推薦格式見附錄A。校準(zhǔn)記錄應(yīng)盡可能詳盡地記載測量數(shù)據(jù)和計算結(jié)果,推薦的校準(zhǔn)記錄格式見附錄B。菌落計數(shù)器測量結(jié)果的測量不確定度應(yīng)按JJF1059.1的要求評定,儀器示值誤差測量結(jié)果的不確定度評定示例見附錄C。9復(fù)校時間間隔復(fù)校時間間隔建議一般不超過1年。由于復(fù)校時間間隔的長短是由儀器的使用情況、使用者、儀器本身質(zhì)量等諸因素所決定的,因此送校單位可以根據(jù)實際使用情況自主決定復(fù)校時間間隔。JJF1751—20194附錄A校準(zhǔn)證書內(nèi)頁推薦格式校準(zhǔn)證書編號:校準(zhǔn)記錄編號:第頁,共頁一、外觀二、校準(zhǔn)結(jié)果校準(zhǔn)項目示值誤差重復(fù)性鑒別力分辨率色溫校準(zhǔn)結(jié)果序號12345三、說明5附錄B送檢單位:制造廠:校準(zhǔn)依據(jù):原始記錄格式(參考)第頁,共頁菌落計數(shù)器校準(zhǔn)記錄校準(zhǔn)記錄編號:菌落計數(shù)器校準(zhǔn)記錄校準(zhǔn)證書編號:型號規(guī)格:出廠編號:校準(zhǔn)條件:溫度:校準(zhǔn)條件:溫度:標(biāo)準(zhǔn)器名稱型號規(guī)格出廠編號檢定證書號技術(shù)特征模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)模擬菌落大小標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分辨率測試圖卡色溫表1.外觀檢查:□符合;□不符合;□其他:2.示值誤差:Is/CFUIi/CFUI/CFUΔ/%3.重復(fù)性:Is/CFUIi/CFUI/CFURSD/%1234564.鑒別力:儀器可以識別的最小模擬菌落的直徑:mm。5.分辨率:6.色溫:序號123456測量值/K平均值/K校準(zhǔn)不確定度:結(jié)論:校準(zhǔn)員:核驗員:校準(zhǔn)日期:年月日6附錄C儀器示值誤差測量結(jié)果的不確定度評定示例C.1概述儀器示值誤差校準(zhǔn)操作步驟如下:將模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)置于儀器拍攝腔內(nèi)掃描計數(shù)。測量3次,取3次測量結(jié)果的平均值與標(biāo)準(zhǔn)值的相對誤差為儀器示值誤差。C.2測量模型用模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)儀器示值誤差公式表示為:Δ==-1式中:Δ—儀器示值誤差;I—測量平均值;Is—模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值。由此,儀器示值誤差的相對不確定度ucrel(Δ)由公式(C.2)來計算:u(Δ)=u(I)+u(Is)(C.1)(C.2)C.3不確定度來源根據(jù)校準(zhǔn)方法,示值誤差的不確定度來源分別為示值重復(fù)性引入的不確定度、分辨力引入的不確定度和模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值引入的不確定度。C.3.1重復(fù)性引入的不確定度u1rel(I)將模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)重復(fù)測量3次,測量結(jié)果見表C.1。表C.1模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的3次測量結(jié)果N123I/CFU181181184測量重復(fù)性引入的不確定度,按照極差法進行計算。根據(jù)測量結(jié)果,u1rel(I)==C.3.2儀器分辨力引入的相對不確定度184-1811.69×182u2rel(I)×100%=0.98%儀器的最小分辨力為1CFU,服從均勻分布,則u2rel(I)=×100%=0.16%儀器測量示值引入的相對擴展不確定度為:urel(I)==1.0%C.3.3模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值引入的相對不確定度urel(Is)模擬菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值的相對不確定度為2%,取k=2,則7urel(Is)==1%C.4相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度一覽表相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度一