臨床檢驗(yàn)免疫學(xué) 概論抗原抗體反應(yīng)

臨床免疫學(xué)概論李聞文中南大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系2021，10第一章臨床免疫學(xué)概述前言：免疫學(xué)〔immunology〕是研究免疫系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能，了解在免疫應(yīng)答反響中對機(jī)體有益的防衛(wèi)功能與有害的病理損傷機(jī)制，研究有效的免疫措施，實(shí)現(xiàn)以防病、治病為目的的一門現(xiàn)代醫(yī)學(xué)學(xué)科。最早的免疫學(xué)是研究抗感染、是微生物學(xué)的一局部，近半個世紀(jì)以來，免疫學(xué)開展很快，如腫瘤免疫、移植免疫、超敏反響、自身免疫等，形成單獨(dú)的學(xué)科。上世紀(jì)九十年代免疫學(xué)和微生物還是一本教材，免疫學(xué)又分為根底免疫學(xué)和臨床免疫學(xué)。臨床免疫學(xué)應(yīng)用免疫學(xué)根底理論與技術(shù)研究疾病的機(jī)制、診斷、治療和預(yù)防。臨床上有些疾病可用免疫學(xué)理論進(jìn)行解釋，用免疫學(xué)方法檢測免疫細(xì)胞、免疫分子。生產(chǎn)免疫分子用于治療如干擾素。第一節(jié)臨床免疫學(xué)臨床免疫學(xué)〔clinicalimmunology〕是免疫學(xué)理論與技術(shù)相結(jié)合，用于研究臨床疾病的免疫病理機(jī)制、診斷與鑒別診斷、評價治療效果和判斷預(yù)后的多個分支學(xué)科的總稱。隨著免疫生物學(xué)、分子免疫學(xué)和免疫遺傳學(xué)的快速開展，許多與臨床疾病有關(guān)的免疫細(xì)胞的生物效應(yīng)機(jī)制、免疫調(diào)節(jié)與信號傳導(dǎo)功能、細(xì)胞凋亡途徑、免疫分子的特性、免疫基因組的遺傳與調(diào)控特性都逐漸被說明，免疫學(xué)檢測手段也越來越先進(jìn)、準(zhǔn)確和微量。使臨床上許多與免疫相關(guān)疾病的診斷、發(fā)病機(jī)制研究、免疫生物治療、基因治療等應(yīng)用于臨床。一、免疫病理與免疫性疾病是指自身免疫性疾病、免疫缺陷病、免疫增殖病的發(fā)病機(jī)制，主要研究免疫細(xì)胞、炎性細(xì)胞、免疫分子等免疫應(yīng)答異常引起的病理損傷。二、移植免疫移植免疫學(xué)是通過組織、細(xì)胞或器官移植代替喪失功能的相應(yīng)者。通過檢測HLA抗原及組織配型來選擇移植物，采用免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)方法監(jiān)測排斥反響，利用免疫抑制控制排斥反響，保證移植物的成活。三、腫瘤免疫研究腫瘤相關(guān)抗原和腫瘤的免疫學(xué)診斷，腫瘤的發(fā)生開展與機(jī)體的免疫狀態(tài)，機(jī)體對腫瘤的免疫反響和抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制的一門學(xué)科。第二節(jié)免疫檢測是研究免疫學(xué)技術(shù)在臨床領(lǐng)域中的應(yīng)用免疫檢測分為二個局部，一局部為利用免疫檢驗(yàn)原理檢測免疫活性細(xì)胞、抗原、抗體、補(bǔ)體、細(xì)胞因子、粘附分子等；另一局部是檢測微量物質(zhì)如激素、酶、血漿微量蛋白、血液藥物濃度、微量元素等，在臨床上幫助或確定診斷、分析病情、調(diào)整治療方案和判斷預(yù)后提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。要求檢驗(yàn)的特異性、敏感性和穩(wěn)定性。對臨床保證不誤診和漏診。

臨床免疫學(xué)重點(diǎn)在于檢驗(yàn)，如凝集反響、沉淀反響、免疫電泳技術(shù)，三大標(biāo)記技術(shù)討論較為完整，免疫細(xì)胞、免疫分子檢測，與臨床關(guān)系密切。結(jié)合病人病癥，采取適當(dāng)標(biāo)本進(jìn)行特定的免疫學(xué)檢測，為臨床診斷提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。免疫學(xué)治療開展很快，如IFN抗病毒方面，器官移植、超敏反響、免疫增殖病有待臨床免疫深入研究。第二章抗原抗體反響是指抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生的特異性結(jié)合的反響，體內(nèi)外均可發(fā)生，因抗體存在于血清也稱為血清學(xué)試驗(yàn)。第一節(jié)抗原抗體反響的原理抗原與抗體特異結(jié)合決定于抗原表位與抗體超變區(qū)兩分子間結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性。這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的，結(jié)合是抗原決定簇與抗體超變區(qū)的溝槽分子外表的結(jié)合，結(jié)合分為特異性結(jié)合階段和可見反響階段。

一、抗原抗體結(jié)合力抗原抗體結(jié)合是一種非共價的結(jié)合，即結(jié)合是可逆的。

1.靜電引力是抗原和抗體帶有相反電荷的氨基和羧基基團(tuán)之間相互吸引的力，又稱庫倫引力。兩個電荷引力越近，靜電引力越強(qiáng)。2.范登華引力原子、分子間互相接近時分子極化作用發(fā)生的一種吸引力，其能量小于靜電引力。

3.氫鍵結(jié)合力是供氫體上的氫原子與受氫體上的氫原子間的引力，如分子中的氫原子和電負(fù)性的氮、氧等原子間相互吸引力，氫鍵結(jié)合力比范登華引力強(qiáng)。4.疏水作用力在水溶液中兩個疏水基團(tuán)相互接觸，由于對水分子排斥而趨向聚集的力，當(dāng)抗原表位與抗體超變區(qū)靠近時，相互間正、負(fù)極消失，周圍的親水層也立即消失、從而排斥兩者間的水分子，使抗原抗體進(jìn)一步相互吸引，促進(jìn)其結(jié)合，這種力最強(qiáng)。二、抗原抗體親和性和親和力親和性〔affinity〕：抗體分子上一個抗原結(jié)合點(diǎn)與相應(yīng)抗原決定簇之間的相適性而存在的引力，為固有的結(jié)合力。親和性可用平衡常數(shù)K表示

K=K1/K2

K值越大，親和性越高，親和力越高，與抗原結(jié)合越牢固。

抗體的親和力是指抗體結(jié)合部位與抗原表位之間結(jié)合的強(qiáng)度，與抗體結(jié)合價直接相關(guān)，如IgG為兩價，親和力為單價的103倍，IgM為5～10價，親和力為107倍。

三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體大多抗原為蛋白質(zhì)，抗體是球蛋白，在水中均溶解為膠體溶液，不會發(fā)生自然沉淀。因蛋白質(zhì)分子上有大量的氨基和羧基殘基，在水溶液中這些殘基帶電荷，由于靜電作用，蛋白質(zhì)分子周圍出現(xiàn)了帶相反電荷的電子云。第二節(jié)抗原抗體反響的特點(diǎn)一、特異性〔specificity〕特異性是指抗原分子上的抗原決定簇和抗體分子的超變區(qū)結(jié)合的特異性，由這兩個分子之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性決定的，抗體分子上有三個超變區(qū)。二、比例性〔proportionality〕指抗原抗體特異性結(jié)合反響時，生成肉眼可見結(jié)合物的量與反響物濃度的關(guān)系，只有二者比例適當(dāng)，才出現(xiàn)可見反響。如沉淀反響，比例適當(dāng)，抗原、抗體全部結(jié)合為等價帶，當(dāng)抗體過剩，稱為前帶，抗原過多，稱為后帶。

三、可遞性〔reversibility〕抗原抗體結(jié)合是非共價鍵結(jié)合，故結(jié)合是可逆的，在免疫學(xué)技術(shù)中的親和層析法，常用改變?nèi)芤旱膒H和離子強(qiáng)度促使免疫復(fù)合物解離，獲得純的抗原或抗體。第三節(jié)影響抗原抗體反響的因素二個因素：自身因素與環(huán)境因素。一、反響物自身因素〔一〕抗原理化性狀、抗原決定簇?cái)?shù)目、種類

可溶性抗原—沉淀反響

顆粒性抗原—凝集反響

單價抗原與抗體結(jié)合—不出現(xiàn)可見反響

紅細(xì)胞與IgG—不出現(xiàn)直接凝集〔二〕抗體關(guān)鍵因素1.來源不同動物的免疫血清，其反響性有差異。家兔免疫血清有較寬的等價帶，馬、人等價帶寬，均易形成可溶性免疫復(fù)合物。2.濃度抗體的濃度往往是與抗原相對而言，二者需適合濃度，故實(shí)驗(yàn)前選擇最正確濃度。3.特異性與親和力在免疫血清制備時，早期獲得的抗血清親和力低，特異性好，后期獲得的親和力高。二、反響環(huán)境條件〔一〕電解質(zhì)常用0.85%的NaCl促使沉淀和凝集物的形成?！捕乘釅A度pH過高過低都會影響反響?！踩硿囟茸钸m溫度為37℃，在一定范圍內(nèi)溫度越高，抗原抗體分子運(yùn)動越快，碰撞接觸時機(jī)越多，兩者結(jié)合反響速度越快，但溫度