SN-T 5655.7-2023 商品化試劑盒檢測方法 預(yù)包裝食品致敏原免疫分析法 第7部分：扁桃仁

學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載0ICS67.50學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載0CCSX04中華人民共和國出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)7SN/T

5655.—20237商品化試劑盒檢測方法預(yù)包裝食品致敏原免疫分析法

7

:

i t tCommercalkitesi t tImmunoassayoffoodalergensinfoodstAPar7tA-

- -

--

- -

-中華人民共和國海關(guān)總署 發(fā)

布學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7前言本文件按照GB/T1.標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件為SN/T5655

《商品化試劑盒檢測方法預(yù)包裝食品致敏原免疫分析法》的第7部分。SN/T5655已經(jīng)發(fā)布了以下部分:———第1部分:麩質(zhì);———第2部分:甲殼綱類動物;———第3部分:蛋類;———第4部分:花生;———第5部分:大豆;———第6部分:乳;———第7部分:扁桃仁;———第8部分:腰果;———第9部分:榛子;———第10部分:巴西堅果;———第11部分:夏威夷果;———第12部分:開心果;———第13部分:胡桃。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中華人民共和國海關(guān)總署提出并歸口。本文件起草單位:中華人民共和國廣州海關(guān)、中華人民共和國上海海關(guān)。本文件主要起草人:王贏、劉津、樊彥莉、劉靜宇、梁穎婕、董潔。學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7引 言食品致敏原是普通食品中正常存在的天然或人工添加物質(zhì),被過敏體質(zhì)人群消耗后能夠誘發(fā)過敏反應(yīng)。SN/T5655《商品化試劑盒檢測方法 預(yù)包裝食品致敏原免疫分析法》規(guī)定了預(yù)包裝食品中致敏原成分的酶聯(lián)免疫吸附定量檢測和膠體金免疫層析定性檢測方法,旨在滿足預(yù)包裝食品致敏原標(biāo)識、生產(chǎn)質(zhì)控和食品安全檢驗(yàn)監(jiān)管的檢測需求。SN/T5655《商品化試劑盒檢測方法 預(yù)包裝食品致敏原免疫分析法》擬由下列13個部分構(gòu)成?！?部分:麩質(zhì)?！?部分:甲殼綱類動物。———第3部分:蛋類?！?部分:花生?！?部分:大豆?！?部分:乳?！?部分:扁桃仁?！?部分:腰果?！?部分:榛子?！?0部分:巴西堅果?！?1部分:夏威夷果?！?2部分:開心果?！?3部分:胡桃。學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7商品化試劑盒檢測方法預(yù)包裝食品致敏原免疫分析法第7部分:扁桃仁1

范圍本文件規(guī)定了預(yù)包裝食品中扁桃仁的酶聯(lián)免疫吸附和膠體金免疫層析測定方法。第一法酶聯(lián)免疫吸附法適用于預(yù)包裝食品中扁桃仁致敏原成分的定量檢測。第二法膠體金免疫層析法適用于預(yù)包裝食品中扁桃仁致敏原的定性檢測,也適用于預(yù)包裝食品生產(chǎn)過程中為監(jiān)控扁桃仁致敏原目的對生產(chǎn)原料和環(huán)境采樣的定性檢測。2

規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法l ii iii i

i i

it iAOACGuidel ii iii i

i i

it iAnalyss.AppendixM:ValdatonproceduresforquanttatvefoodalergenELISA

methods:com-muniyguidanceandbestpractces3

術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。13.1扁桃仁

almondsRP (薔薇科(osaceae)李亞科(runoideae)桃屬

AmygdalusL.)RP (注:又稱為巴旦木或美國大杏仁。23.2-i E酶聯(lián)免疫吸附測定

enzymelnkedimmunosorbent-i E可溶性抗原或抗體結(jié)合到微孔板等固相載體上,基于免疫反應(yīng)和酶催化顯色的一種定性或定量檢測方法。33.3

G膠體金免疫層析

coloidalgoldassay;ICAG以膠體金作為示蹤標(biāo)志物的一種免疫層析檢測技術(shù)

。注:通常為試紙條形式。1學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7第一法 酶聯(lián)免疫吸附法4

原理利用抗原-抗體特異性結(jié)合反應(yīng),對樣品中扁桃仁致敏原含量進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附測定。樣品中游離的扁桃仁蛋白被微孔中預(yù)先包被的扁桃仁特異性抗體捕獲,形成抗原-抗體復(fù)合物。加入過氧化物酶標(biāo)記抗體后,形成酶標(biāo)記抗體-抗原-抗體夾心復(fù)合物,其他物質(zhì)在洗滌步驟被除去。加入底物/發(fā)色劑呈顯色反應(yīng)。通過測定450nm

波長下吸光度值得出樣品中扁桃仁致敏原含量。樣品中扁桃仁致敏原含量與吸光度值成正比。5

試劑和材料除特別說明外,實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合

GB/T6682規(guī)定的三級水,所有試劑均為分析純。1 l ii ii i i

ii

it i5. 扁桃仁致敏原酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒1 l ii ii i i

ii

it iProcedurestoValdateCharacterstcsofaMethodofAnalyssAppendixM:ValdatonproceduresforquanttatvefoodalergenELISA

methods:communiyguidanceandbestpractces進(jìn)行評價,評價結(jié)果見附錄

A。注:試劑盒詳細(xì)信息見附錄B。25.脫脂奶粉(不含扁桃仁致敏原)。2 13 145.

1×洗滌緩沖液:按照1∶10比例稀釋試劑盒中10×洗滌緩沖液濃縮液[見B.c)], 13 14洗滌緩沖液可貯于2℃~8℃條件下保存4周。1條微孔板需約15mL1×洗滌緩沖液洗滌。5.

1×致敏原提取緩沖液:按照1∶10比例稀釋試劑盒中10×致敏原提取緩沖液濃縮液[見B.d)],稀釋后的1×致敏原提取緩沖液可貯于2℃~8℃條件下保存12周;稀釋前,若10×致敏原提取緩沖液濃縮液中有結(jié)晶,則先將其置37℃水浴中溫育并搖動混勻,直至結(jié)晶完全消失。 155.

1×酶標(biāo)記物:用水按照1∶11比例稀釋11×酶標(biāo)記物濃縮液[見B.b)]。 15檢測需求量即用即配。稀釋后的1×酶標(biāo)記物應(yīng)當(dāng)次用完,不應(yīng)長期保存。如移取100μL11×酶標(biāo)記物濃縮液到1mL水中稀釋混勻,足夠1條微孔反應(yīng)用。6

儀器和設(shè)備1236. 酶標(biāo)儀:具450nm

波長。1236. 分析天平:感量0.1g。6. 渦旋混勻儀。45 3 66. 冷凍離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥4000r/min,溫度45 3 66. 水浴鍋:7℃,0℃。6 2 1736. 單道移液器:06 2 1736. 八道移液器:0μL~300μL。2兔兔ｗｗｗ．ｂ學(xué)ｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載

m ×20×f

×V 兔兔ｗｗｗ．ｂ學(xué)ｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載

m ×20×f

×V …………(1)77

分析步驟17.樣品處理111 0(7.. 普通樣品:針對固體樣品,對不少于50g樣品進(jìn)行均質(zhì),稱取1.0g均質(zhì)樣品到50mL11 0(中,加入20mL預(yù)熱至60℃的1×致敏原提取緩沖液

5.4)。針對液體樣品,對不少于50mL樣品進(jìn)行均質(zhì),吸取1mL均質(zhì)樣品到50mL離心管中,加入19mL預(yù)熱至60

℃的1×致敏原提取緩沖液(35.4)。按照7.2.

(312 00 ( (1317.. 調(diào)味料、雪葩冰糕、可可類樣品:對不少于50g樣品進(jìn)行均質(zhì),稱取12 00 ( (131離心管中,加入1.0g脫脂奶粉

5.2)。再加入20mL預(yù)熱至60℃的1×致敏原提取緩沖液

5.4)。7.. 將經(jīng)過7.2.

或7.2.

處理的樣品,渦旋混勻,置于60℃水浴中孵育10min后,用冰水快速冷4卻,

℃下4000r/min離心10min,取上清液進(jìn)行檢測。至此稀釋倍數(shù)為20倍。427. 測定221 127.. 將預(yù)包被有扁桃仁致敏原特異性抗體的微孔板[見B.a)]插入微孔板架,并做好標(biāo)記,標(biāo)準(zhǔn)21 12和樣品均設(shè)置雙平行。宜一次檢測不要超過3條微孔板條(4個板孔),以避免過大的孔間時間差造成對定量結(jié)果的影響。22 1 2(( 2(12117.. 平行加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品1~5[見

B.e)~i)]和樣品至微孔中,室溫(0

℃22 1 2(( 2(121110min。孵育結(jié)束后,倒去微孔中的液體,每個微孔加入250μL1×洗滌緩沖液

5.3),進(jìn)行洗滌后,在吸水紙上拍干,洗滌3次。洗滌結(jié)束后,每個微孔加入100μL1×酶標(biāo)記物

5.5),室溫(0℃~25℃)孵育10min。孵育結(jié)束后,倒去微孔中的液體,每個微孔每次加入250μL1×洗滌緩沖液

5.3)洗滌并在吸水紙上拍干,洗滌3次。洗滌結(jié)束后,每個微孔加入100μL底物/發(fā)色劑[見B.j)],水平振搖使其均勻混合,室溫(0℃~25℃)避光孵育10min。孵育結(jié)束后,加入100μL終止液[見B.k)],水平振搖使反應(yīng)完全,0min內(nèi)讀取450nm

波長吸光度值。37. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作和測定結(jié)果計算3 ic以標(biāo)準(zhǔn)品2~5質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品平均吸光度值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 ic扁桃仁致敏原濃度()。也可使用試劑盒配套分析軟件

RIDASOFT

Win中cubi

splne模式進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和測定結(jié)果計算。8

分析結(jié)果描述18. 結(jié)果分析11固體樣品中扁桃仁致敏原含量按公式()計算:1sXs=

cs式中:sXs

———樣品中扁桃仁致敏原含量,單位為毫克每千克(mg/kg);sc ———樣品液中扁桃仁致敏原濃度,單位為為毫克每升(mg/L);f

———樣品稀釋倍數(shù);,V

———定容體積

0.02L;,km

———樣品的質(zhì)量,單位為千克(g);k3學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載720

———標(biāo)準(zhǔn)品濃度中包含的20倍稀釋。2液體樣品中的扁桃仁致敏原含量按公式()計算:2lXl=c

×f …………(2)l式中:lXl

———樣品中扁桃仁致敏原含量,單位為毫克每千克(mg/L);lc ———樣品液中扁桃仁致敏原濃度,單位為為毫克每升(mg/L);f

———樣品稀釋倍數(shù)。1根據(jù)7.

制備樣品液時的20倍稀釋倍數(shù)已經(jīng)包括在標(biāo)準(zhǔn)曲線中,樣品稀釋倍數(shù)f

只考慮除此1220倍以外的稀釋倍數(shù)。計算結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后兩位有效數(shù)字。28. 結(jié)果表述扁桃仁致敏原測定結(jié)果用于標(biāo)簽標(biāo)識管理。扁桃仁致敏原測定結(jié)果小于定量限時,結(jié)果表述為“未檢出扁桃仁致敏原”;扁桃仁致敏原測定結(jié)果大于定量限時,結(jié)果表述為“檢出扁桃仁致敏原”并報告具體測定值。9

質(zhì)量控制19. 試劑失效1出現(xiàn)以下情況之一表明試劑失效,不應(yīng)進(jìn)行測定或測定結(jié)果作廢:a)

貯存在試劑瓶中的發(fā)色劑顏色出現(xiàn)藍(lán)色;2 2b)

加入終止液后標(biāo)準(zhǔn)品5(0mg/kg)吸光度值2 229. 變異系數(shù)2在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的變異系數(shù)不應(yīng)超過10%。10

檢出限和定量限1 6 L本方法對扁桃仁致敏原的檢出限為0.00mg/kg(L),定量限為0.251 6 L11

防污染措施1211. 食品樣品的均質(zhì)可能產(chǎn)生粉塵,為避免污染應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行樣品均質(zhì)的前處理操作。1211. 設(shè)備和器具用水沖洗后,用60%乙醇或異丙醇徹底清潔,以消除谷物粉塵污染。311. 在試驗(yàn)過程中應(yīng)戴手套操作。在稱量、均質(zhì)樣品、樣品提取及試劑盒檢測四個檢測階段更換3手套。第二法 膠體金免疫層析法12

原理利用抗原-抗體特異性結(jié)合反應(yīng),對樣品中的扁桃仁致敏原進(jìn)行膠體金免疫層析試紙條檢測。樣品中的扁桃仁致敏原與預(yù)包被在反應(yīng)管內(nèi)的標(biāo)記抗體發(fā)生反應(yīng),形成抗原-抗體結(jié)合物。此抗原-抗體結(jié)4兔學(xué)兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023兔學(xué)兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7合物被預(yù)包被在免疫層析試紙條上的特異性抗體捕獲,形成抗體-抗原-抗體的夾心復(fù)合物并顯色,通過目測判讀檢測結(jié)果。13

試劑和材料除特別說明外,實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合

GB/T6682規(guī)定的三級水,所有試劑均為分析純。1 iiii ii

ii

iti13. 扁桃仁致敏原膠體金免疫層析檢測試劑盒:1 iiii ii

ii

itiStudyProcedurestoValdateCharacterstcsofaMethodofAnalyssAppendixM∶

Valdatonproce-duresforquanttatvefoodalergenELISA

communiyguidanceandbestpractces進(jìn)行評價,評價結(jié)果見附錄C。注:試劑盒詳細(xì)信息見附錄

D。213. 吸附緩沖液,按照附錄E執(zhí)行。2 :

0 22 , 2313.PBS-吐溫

緩沖液

8.gNaCl,0.gKCl,1.44gNaHPO4

0.24g :

0 22 , 234調(diào)pH

至7.2~7.,用蒸餾水定容至1L。44513. 氯化鈉(NaCl)。4513. 棉簽拭子。14

儀器和設(shè)備1214. 分析天平:感量0.1g。1214. 勻漿機(jī)。314. 渦旋混勻儀。3414. 離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥4000r/min。45 1 514. 單道移液器:00μL~1000μL,5 1 515

分析步驟115. 環(huán)境拭子的采樣和檢測111 1 1

512 113115.. 吸取1mLPBS-吐溫緩沖液(3.)到潔凈的11 1 1

512 113115..

用浸潤的棉簽拭子(5.1.1)的棉頭,擦拭大約10cm×10cm

面積的待檢測環(huán)境表面。15.. 將擦拭取樣后的棉簽拭子(5.1.2)放回裝有PBS-吐溫緩沖液的離心管中,充分浸洗并擠壓使棉頭與緩沖液充分融合和釋放,擠干棉簽拭子,并丟棄。14 115.. 從離心管中取0.

mL14 11注:若棉簽采樣拭子(5.1.2)含有肉眼清晰可見的致敏原顆粒,則可能含有的致敏原超過1000mg/kg,建議將棉1簽拭子采樣處理后離心管中樣品液進(jìn)一步稀釋,再用于檢測。215. 清潔用水的采樣和檢測21直接取0.

mL清潔用水用于檢測。1315. 食品樣品前處理和提取33115.. 液體樣品:量取不少于5mL樣品,進(jìn)行均質(zhì)。3132 0 1

42 415.. 固體樣品:稱取50.0g樣品,向其中加入450mL水和4.32 0 1

42 4中于室溫(0℃~25℃)000r/min,離心5min,取上清液用于檢測。無離心條件時,可用粗濾紙過5學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載17.2

本方法對環(huán)境表面的拭子采樣的檢出限為學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載17.2

本方法對環(huán)境表面的拭子采樣的檢出限為1μg/100cm

(當(dāng)采樣面積為10cm×10cm

時),或7濾,得到濾清液用于檢測。若離心后產(chǎn)生脂肪層,取脂肪層下的清液用于檢測。脂肪含量高的樣品,宜進(jìn)行冷凍離心以去除脂肪。331

2022415..含多酚類的樣品:對于如啤酒、葡萄酒、可可、調(diào)味料、331

20224進(jìn)行樣品前處理。吸取1mL液體樣品或稱取1.0g均質(zhì)后的固體樣品,加入已含有9mL吸附緩沖液的樣品管中,室溫(0℃~25℃)孵育10min~15min,邊孵育邊振蕩。孵育結(jié)束后置離心機(jī)中于室溫(0℃~25℃)000r/min離心5min,取上清液用于檢測。注:若樣品中可能含有的致敏原濃度超過1000mg/kg,建議將樣品提取液進(jìn)一步稀釋后,再進(jìn)行檢測。密封好的上清液或?yàn)V清液在2℃~8℃避光保存不超過2d。415. 樣品的測定41 2 1 1

21

31 2向預(yù)包被標(biāo)記抗體的反應(yīng)管[見

D.a)]中加入0.

mL

的流動相緩沖液1 2 1 1

21

31 20.

mL于15.、5.、5.

步驟得到的樣品提取液,充分混勻,于室溫(0℃~25℃)孵育5min。向反1應(yīng)管中放入扁桃仁致敏原試紙條

[見D.b)],反應(yīng)5min,目測讀取檢測結(jié)果。1注:強(qiáng)酸性或強(qiáng)堿性樣品提取液調(diào)節(jié)pH

值至7.5±0.

后再檢測。515. 測定結(jié)果評估和表述551 C15.. 試紙條反應(yīng)區(qū)包括3條結(jié)果條帶,從上至下分別為質(zhì)控帶(

)、鉤狀效應(yīng)帶(H)51 C當(dāng)質(zhì)控帶(C)出現(xiàn)藍(lán)紫色條帶,檢測結(jié)果有效,否則檢測結(jié)果無效。5215.. 當(dāng)質(zhì)控帶(C)和鉤狀效應(yīng)帶(H)出現(xiàn)藍(lán)紫色條帶,檢測結(jié)果為陰性,結(jié)果表述為“未檢出扁桃52仁致敏原”。5315.. 當(dāng)質(zhì)控帶(C)、鉤狀效應(yīng)帶(H)和檢測帶(T)均出現(xiàn)藍(lán)紫色條帶,檢測結(jié)果為陽性,提示扁桃仁53致敏原含量不超過1000mg/kg,結(jié)果表述為“檢出扁桃仁致敏原”。5415.. 當(dāng)質(zhì)控帶(C)和檢測帶(T)出現(xiàn)藍(lán)紫色條帶,檢測結(jié)果為強(qiáng)陽性,提示扁桃仁致敏原含量54≥1000mg/kg,結(jié)果表述為“檢出扁桃仁致敏原”。55 C15.. 當(dāng)僅有質(zhì)控帶(

)出現(xiàn)藍(lán)紫色條帶,提示扁桃仁致敏原含量很高,發(fā)生鉤狀效應(yīng),應(yīng)對樣品55 C取液進(jìn)行稀釋后重新檢測。16

質(zhì)量控制116. 試劑失效1C試紙條未出現(xiàn)藍(lán)紫色質(zhì)控帶(

),檢測結(jié)果無效。C216. 內(nèi)部質(zhì)控2定期或必要時使用商品化加工食品扁桃仁致敏原質(zhì)控品或?qū)嶒?yàn)室自行制備的人工添加樣品進(jìn)行檢測質(zhì)量控制。17

檢出限117. 本方法對食品樣品及清潔用水中扁桃仁致敏原的檢出限為1mg/kg(L)。121μg/采樣拭子(當(dāng)采樣面積是自行確定時,應(yīng)明確所記錄的采樣范圍)。6學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載718

方法局限性本文件的膠體金免疫層析方法,適用于檢測扁桃仁致敏原,檢測結(jié)果為定性檢測結(jié)果,無法獲得定量檢測結(jié)果。若樣品中含有特別高濃度的扁桃仁(≥1000mg/kg),則檢測帶的顏色可能會變淺,甚至完全消失。同時高濃度樣品也會影響鉤狀效應(yīng)帶的形成。19

防污染措施同第11章。7學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載1)

本評價結(jié)果僅適用于rbipharmRIDASCREEN

FAST學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載1)

本評價結(jié)果僅適用于rbipharmRIDASCREEN

FASTAlmond試劑盒。給出這一信息是為了方便本文件的7附錄

A(資料性)扁桃仁致敏原酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒評價結(jié)果1)1A. 線性和范圍16線性范圍為0.25mg/kg~20.0mg/kg。62A. 檢出限和定量限21 6對扁桃仁的檢出限為0.00mg/kg(L),定量限為0.251 63A. 正確度30 0對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的冰淇淋基質(zhì)回收率范圍為78.0%~96.0%0 0焙處理的扁桃仁的冰淇淋基質(zhì)回收率范圍為82.0%~120.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的巧克力基質(zhì)回收率范圍為101.0%~112.0%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的巧克力基質(zhì)回收率為88.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的餅干基質(zhì)回收率范圍為89.0%~112.0%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的餅干基質(zhì)回收率范圍為99.0%~116.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的麥片基質(zhì)回收率范圍為104.0%~107.0%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的餅干基質(zhì)回收率范圍為104.0%~106.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的酸奶基質(zhì)回收率范圍為108.0%~116.0%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的酸奶基質(zhì)回收率范圍為104.0%~110.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的沙拉醬基質(zhì)回收率范圍為95.0%~108.0%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的沙拉醬基質(zhì)回收率范圍為87.0%~100.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的面條基質(zhì)回收率范圍為94.%~106.%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的面條基質(zhì)回收率范圍為88.%~104.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的玉米粉基質(zhì)回收率范圍為100.0%~108.0%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的玉米粉基質(zhì)回收率范圍為104.0%~114.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的奶粉基質(zhì)回收率范圍為104.0%~110.0%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的奶粉基質(zhì)回收率范圍為92.0%~100.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的蛋糕基質(zhì)回收率范圍為112.0%~114.0%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的蛋糕基質(zhì)回收率范圍為96.0%~108.0%;對人工加標(biāo)未烘焙處理的扁桃仁的大豆粉基質(zhì)回收率范圍為100.0%~108.0%,對人工加標(biāo)的經(jīng)過烘焙處理的扁桃仁的餅干基質(zhì)回收率范圍為93.0%~100.0%。對人工加標(biāo)的各種調(diào)料(茴香、羅勒、香芹籽、肉桂、含10%丁香的餅干、可可、孜然、姜黃、咖喱、茴香種子、葫蘆巴、大蒜、生姜、牛至、黑芥菜籽、黃芥菜籽、肉豆蔻、辣椒粉、黑胡椒粉)基質(zhì)的回收率范圍為83.0%~113.0%。4A. 特異性4對谷物類、豆類、肉類、堅果、調(diào)料、蛋等76種食品樣品交叉反應(yīng)率為0,與杏核和櫻桃核有大約5%的交叉反應(yīng)。與經(jīng)過不同程度烘烤的榛子和花生均無交叉反應(yīng)。5A. 精密度5對麥片、橙汁、酸奶、沙拉醬、面條、餅干、玉米粉、冰淇淋、巧克力、奶粉、蛋糕、大豆粉進(jìn)行不同濃度使用者。如果采用其他產(chǎn)品可以得到相同或更好的檢測效果,經(jīng)實(shí)驗(yàn)評估后可以使用這些等效產(chǎn)品。8學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7的人工加標(biāo),變異系數(shù)范圍為3.7%~8.4%,平均值為5.6%,回收率范圍為92.0%

~114.0%,回收率平均值為104.0%。6A. 耐變性69 1 9分別對3個實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行耐變性實(shí)驗(yàn):樣品/標(biāo)準(zhǔn)品加樣量(0μL,10μL),孵育時間9 1 91311min),孵育溫度(8℃,0℃)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,139學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7附 錄 B(規(guī)范性)扁桃仁致敏原酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒2)1B. 試劑盒組成1::

71a)

預(yù)包被扁桃仁致敏原特異性抗體的48孔可拆分微孔板

8×6::

71b)

11×酶標(biāo)記物濃縮液

0.

mL/瓶×1瓶;c)

10×洗滌緩沖液濃縮液:00mL/瓶×1瓶;166 530331d)

10×致敏原提取緩沖液濃縮液:00mL/166 530331e)

標(biāo)準(zhǔn)品1:2.

mL/瓶×1瓶,扁桃仁含量為0.

mg/kg;f)

標(biāo)準(zhǔn)品2:2.

mL/瓶×1瓶,扁桃仁含量為2.

mg/kg;g)

標(biāo)準(zhǔn)品3:1.

mL/瓶×1瓶,扁桃仁含量為5.

mg/kg;h)

標(biāo)準(zhǔn)品4:1.

mL/瓶×1瓶,扁桃仁含量為10.

mg/kg;i)

標(biāo)準(zhǔn)品5:1.

mL/瓶×1瓶,扁桃仁含量為20.

mg/kg;j)

底物/發(fā)色劑:0mL/瓶×1瓶;1k)

終止液:4mL/瓶×1瓶。16 2注:可按照操作說明,配置增加濃度分別為0.25mg/kg及1.5mg/kg扁桃仁含量的標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)6 2需求使用。2B. 試劑盒驗(yàn)收和保存22122 223243B.. 每個批號試劑盒應(yīng)進(jìn)行回收率測試的驗(yàn)收試驗(yàn),2122 223243B.. 試劑盒于2℃~8℃避光保存,使用前回復(fù)至室溫(0℃~25℃)。B..不同批號試劑盒中組分不應(yīng)混用。B.. 超過有效期的試劑盒不應(yīng)使用。B. 試劑盒評估31B.. 定期進(jìn)行回收率評估,回收率應(yīng)在80%~120%之間。31324B.. 回收率評估可使用商品化扁桃仁致敏原質(zhì)控品或?qū)嶒?yàn)室自行制備的人工添加樣品。324B. 標(biāo)準(zhǔn)曲線譜圖1標(biāo)準(zhǔn)曲線譜圖示例見圖B.。12)

2)

rbipharmRIDASCREEN

FASTAlmond試劑盒是適合的市售產(chǎn)品實(shí)例。給出這一信息是為了方便本文件的使用者。如果采用其他產(chǎn)品可以得到相同或更好的檢測效果,經(jīng)實(shí)驗(yàn)評估后可以使用這些等效產(chǎn)品。10學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載71圖B. 標(biāo)準(zhǔn)曲線譜圖示例111學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7SN/T5655.—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載7附 錄 C(資料性)扁桃仁致敏原膠體金免疫層析檢測試劑盒評價結(jié)果3)1C. 檢出限1對食品樣品及清潔用水中扁桃仁致敏原的檢出限為1mg/kg(L)。對環(huán)境表面的拭子采樣的檢出限為1μg/100cm2(當(dāng)采樣面積為10cm×10cm

時),或1μg/采樣拭子(當(dāng)采樣面積是自行確定時,應(yīng)明確所記錄的采樣范圍)。2C. 特異