生物化工shuaige li消毒滅菌

1李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering生物化學(xué)工程基礎(chǔ)

BiochemicalEngineering李強化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室2李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering六.微生物的滅菌3李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering本章主要內(nèi)容6.1基本概念和滅菌的必要性

6.2滅菌方法

6.3過濾除菌4李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering6.1基本概念和滅菌的必要性清潔

用清水或去污劑清除物體表面的污垢及部分微生物的過程。消毒

清除或殺滅外環(huán)境中除細菌芽胞外的各種微生物的過程。滅菌

清除或殺滅物品中一切微生物，包括細菌芽胞的過程。5李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering6.1基本概念和滅菌的必要性概念的鑒別消毒——相對的，不一定達到無菌的要求滅菌——絕對的，一定可達到無菌的要求。6李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering為什么要滅菌?純種培養(yǎng)：一種微生物，或者限定的幾種微生物染菌：發(fā)酵培養(yǎng)體系污染了其它的微生物7李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering1.雜菌對發(fā)酵過程的影響1)使生物反應(yīng)的基質(zhì)或產(chǎn)物，因雜菌的消耗而損失2)改變了發(fā)酵液的某些理化性質(zhì)，使產(chǎn)物的提取變得困難3)污染的雜菌可能會分解產(chǎn)物，使生產(chǎn)失敗4)污染的雜菌大量繁殖，改變代謝規(guī)律，難于判斷發(fā)酵過程5)發(fā)生噬菌體污染，微生物細胞被裂解，使生產(chǎn)失敗8李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering

2.染菌原因或可能途徑種子培養(yǎng)基空氣系統(tǒng)取樣設(shè)備（閥門、焊接）其它操作不明原因9李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering3.如何防止染菌1)使用的培養(yǎng)基和設(shè)備須經(jīng)滅菌；2)使用的空氣應(yīng)經(jīng)除菌處理(好氣)3)設(shè)備應(yīng)嚴密，生物反應(yīng)器中要維持高于環(huán)境的壓力4)培養(yǎng)過程中加入的物料應(yīng)經(jīng)過滅菌5)使用無污染的純種等。10李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering4.需要滅菌（除菌）的物品和物質(zhì)器皿、設(shè)備類：三角瓶、培養(yǎng)皿、反應(yīng)器系統(tǒng)、EP管、過濾器、培養(yǎng)板、取樣頭、接種環(huán)、接種針、移液管、平板耙、離心管、紗布。。。物質(zhì)類：各種培養(yǎng)基成分、補料成分、消泡成分、抗生素溶液、緩沖液、無菌水。。。11李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering6.2滅菌方法1)化學(xué)藥劑滅菌2)射線滅菌3)微波滅菌4)熱滅菌*

干熱滅菌濕熱滅菌12李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering1)化學(xué)藥劑滅菌常用的化學(xué)藥劑有：

甲醛、氯(或次氯酸鈉)、高錳酸鉀、環(huán)氧乙烷、季銨鹽(如新潔爾滅)、酒精、來蘇水(苯酚)等…..13李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering化學(xué)消毒劑的殺菌機制①促進菌體蛋白質(zhì)變性或凝固如酚類（高濃度）、醇類、重金屬鹽類（高濃度）、酸堿類、醛類；②干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝，破壞蛋白與核酸的基團，如某些氧化重金屬鹽類（低濃度）與細菌蛋白的-SH基結(jié)合；③損傷細菌的細胞膜如酚類（低濃度）、表面活性劑、脂溶劑等能降低細菌菌膜和病毒包膜的表面張力并增加其通透性。14李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering影響消毒滅菌效果的因素一、消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時間1.

理化性質(zhì)不同，對微生物的作用大小各異。2.同一種消毒劑的濃度不同，其消毒效果也不同。一般消毒劑在高濃度時殺菌作用大（醇類例外）。3.消毒劑在一定濃度下，對細菌的作用時間越長，滅菌效果也愈好。15李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering影響消毒滅菌效果的因素二、微生物的種類與數(shù)量1.不同微生物對不同化學(xué)消毒劑的敏感性不同。2.同一消毒劑對不同微生物的殺菌效果不同。3.微生物的數(shù)量越大，所需消毒的時間就越長16李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering影響消毒滅菌效果的因素三、溫度消毒劑的殺菌作用實質(zhì)是化學(xué)反應(yīng)，其反應(yīng)速度隨溫度升高而加快。因此，溫度升高可提高消毒效果。17李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering影響消毒滅菌效果的因素四、酸堿度消毒劑的殺菌作用受酸堿度的影響。（戊二醛溶液中加入碳酸氫鈉后才有殺菌作用。）五、有機物環(huán)境中有機物的存在，能夠影響消毒劑的效果18李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering酒精殺菌時濃度的影響19李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering酒精殺菌時濃度的影響20李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering常用消毒劑的種類、作用機理與用途類別作用機制常用消毒劑用途酚類蛋白質(zhì)變性，損傷細胞膜，滅活酶類石炭酸、來蘇水（甲酚）地面、器具表面的消毒，皮膚消毒等醇類蛋白質(zhì)變性與凝固，干擾代謝乙醇皮膚消毒重金屬類使蛋白質(zhì)變性與沉淀，滅活酶類紅汞、硫柳汞、硝酸銀、蛋白銀非金屬器皿的消毒氧化劑類氧化作用，沉淀蛋白質(zhì)高錳酸鉀、過氧化氫、過氧乙酸、碘酒、氯、漂白粉、漂粉精、氯胺、二氯異氰尿酸鈉、二氯異氰尿酸鈉皮膚、蔬菜、水果、塑料、玻璃器材、水及游泳池、地面、墻壁、家具、室內(nèi)空氣及表面、浸泡衣服表面活性劑類損傷細胞膜，滅活氧化酶等酶活性，沉淀蛋白質(zhì)新潔爾滅、杜滅芬金屬器械、塑料、橡皮類消毒烷化類使菌體蛋白質(zhì)及核酸烷基化甲醛、環(huán)氧乙烷、戊二醛物品表面、空氣消毒染料類抑制細菌繁殖，干擾氧化過程龍膽紫淺表創(chuàng)傷消毒酸堿類破壞細胞膜和細胞壁，凝固蛋白質(zhì)醋酸加等量水蒸發(fā)、生石灰空氣消毒、地面消毒21李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering2)射線滅菌利用紫外線、高能電磁波或放射性物質(zhì)產(chǎn)生的高能粒子（x、γ射線）進行滅菌的方法。22李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering紫外線燈管滅菌法最佳殺菌波長：253.7nm有效距離：物品：25～60cm,

空氣：＜2m照射時間：燈亮5～7min后開始計算，＞30min適用：室內(nèi)空氣、物體表面特點：簡單、方便、一般情況下無損物品23李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering影響紫外線殺菌作用的因素穿透力：穿透力弱溫度：最佳溫度27～40℃濕度：適宜濕度：40～60％24李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering電離輻射滅菌法（包括高速電子、χ射線和γ射線）具有較高的能量和穿透力，對微生物有致死作用。常用于大量一次性塑料制品的滅菌；亦可用于食品、藥品和生物制品的消毒或滅菌。25李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering

3）微波滅菌波長為1～1000mm的電磁波可穿透玻璃、陶瓷和薄塑料等物質(zhì)，但不能穿透金屬表面。主要用于食品、非金屬器械、檢驗室用品、無菌室和食品用具及其他用品的消毒。26李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering4）干熱滅菌條件為在160－180℃下保溫1h。微生物主要是由于氧化作用而死亡。27李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering5）濕熱滅菌是最常用的滅菌方法利用飽和蒸汽進行滅菌。由于蒸汽有很強的穿透力，在冷凝時放出大量冷凝熱，容易使微生物蛋白質(zhì)凝固而殺滅。通常用蒸汽對培養(yǎng)基滅菌的條件是：121℃(約1×105Pa表壓),維持20～30min。28李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering濕熱滅菌的優(yōu)點蒸汽的價格低廉，來源方便，無污染、滅菌效果可靠。蒸汽滅菌中值得注意的問題：將飽和蒸汽通入培養(yǎng)基中滅菌時，冷凝水會使培養(yǎng)基的濃度下降(變化)，所以在配制培養(yǎng)基時應(yīng)扣除冷凝水的體積以保證培養(yǎng)基在滅菌后保持應(yīng)有的濃度。29李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering干熱和濕熱的穿透力及滅菌效果比較蛋白質(zhì)含水量（%）50251860凝固所需溫度567680-90145160-170結(jié)論一：蛋白質(zhì)在濕熱中較易凝固變性。30李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering干熱和濕熱的穿透力及滅菌效果比較熱型溫度（度）時間（h)布層內(nèi)溫度20層40層100層滅菌效果干熱130-1404867270.5不完全濕熱105.33101101101完全結(jié)論二：濕熱的穿透力比干熱強。31李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering干熱滅菌和濕熱滅菌法效果比較干熱滅菌法濕熱滅菌法導(dǎo)熱速度慢快穿透力弱強滅菌時間長短所需溫度高低破壞性大小32李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering各種滅菌設(shè)備33李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering各種反應(yīng)器（發(fā)酵罐）34李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering各種反應(yīng)器（發(fā)酵罐）35李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering滅菌標記36李強

化工系生化所抗體與生物催化工程實驗室生物化學(xué)工程基礎(chǔ)BiochemicalEngineering6.3過濾除菌即利用過濾方法阻留微生物，達到除菌的目的。只適用于澄清流體、或者不能高溫的液體的除菌和大量制備無菌空氣，在產(chǎn)品提取過程中