尿液生成的影響因素與急性腎功能不全

尿液生成的影響因素及急性腎功能不全[目的]1．學(xué)習(xí)輸尿管插管和尿液的收集方法。2．觀察靜脈注射生理鹽水、葡萄糖、去甲腎上腺素等藥物對(duì)尿量的影響，分析這些因素的作用機(jī)制。3.復(fù)制中毒性腎功能不全的動(dòng)物模型。4．觀察升汞中毒家兔的一般狀態(tài)，尿的變化，測(cè)定酚紅及血尿素水平以了解腎臟功能情況，并觀察腎臟形態(tài)改變。[動(dòng)物]家兔，體重2.5~3.5kg，性別不拘[藥品]1%氯化高汞溶液（生理鹽水配制，于實(shí)驗(yàn)前1天皮下或肌肉注射，使用6.5號(hào)針頭），20%烏拉坦，0.9%NaCl溶液，5%醋酸溶液，0.06%酚紅。20%烏拉坦，1%普魯卡因，生理鹽水（37-38℃）、200g/L葡萄糖、0.1g/L去甲腎上腺素、10g/L呋塞米（速尿）、100g/LNaOH、斑氏試劑。[器材]手術(shù)器械，輸尿管插管，50ml注射器，量杯，酒精燈，試管夾，顯微鏡，培養(yǎng)皿。[方法]實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備。取家兔兩只，一只為正常對(duì)照，一只為中毒實(shí)驗(yàn)兔。于實(shí)驗(yàn)前一天稱重后，皮下或肌肉注射氯化高汞（1.2ml/kg），造成急性中毒性腎病備用，對(duì)照組則在相同部位注同量的生理鹽水，作為對(duì)照備用。手術(shù)準(zhǔn)備(1)靜脈麻醉從兔耳緣靜脈注射20%烏拉坦（1g/kg體重）。待兔麻醉后，將其仰臥，先后固定四肢及兔頭。(2)腹部手術(shù)下腹部剪毛，普魯卡因局麻，在恥骨聯(lián)合向上沿中線做長(zhǎng)約4cm的切口，沿腹白線切開腹膜，暴露出膀胱，并將膀胱翻向體外，在膀胱底部找到并分離兩側(cè)輸尿管，在輸尿管靠近膀胱處用線結(jié)扎，略等片刻，待輸尿管略充盈后，用眼科剪剪一小口，向腎臟方向插入一根細(xì)塑料管，結(jié)扎，收集尿液。手術(shù)完畢后，用溫?zé)岬纳睇}水紗布覆蓋手術(shù)創(chuàng)口。3.觀察項(xiàng)目記錄正常尿流量（ml/5min）。尿蛋白定性檢查。取正常及中毒兔尿各約5ml分別放入離心管中，以1000rpm/min速度離心5min。傾出上清液于試管中，試管夾夾住試管，在酒精燈上加熱至沸騰。（注意：試管口不要對(duì)著人，小心加熱，切勿讓讓試管內(nèi)尿液溢出）。若有混濁，加入5%醋酸3-5滴，再煮沸。若尿變清，是尿內(nèi)無機(jī)鹽所致；若混濁加重，則表示尿中含有蛋白。按6-9ml/kg體重劑量靜脈快速注射37-38℃的生理鹽水，連續(xù)記錄尿量，取尿量最多時(shí)的數(shù)據(jù)。取尿液2滴，作尿糖定性試驗(yàn)，觀察尿糖。試管內(nèi)盛1ml斑氏試劑，加入尿液2滴，在酒精燈上加熱至沸。冷卻后觀察試液和沉淀物的顏色，如由藍(lán)綠色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色或磚紅色，表示尿糖試驗(yàn)陽性。靜脈注射200g/L葡萄糖5ml，記錄尿量變化。當(dāng)尿量顯著變化時(shí)，取流出的尿液2滴，作尿糖定性試驗(yàn)，觀察尿糖。靜脈注射0.1g/L去甲腎上腺素0.3ml，記錄尿量變化。按5mg/kg體重劑量靜脈注射10g/L呋塞米，記錄尿量變化。靜脈注射6g/L酚紅0.5ml，用盛有100g/LNaOH溶液5ml的培養(yǎng)皿收集尿液，計(jì)算從注射酚紅起到尿中剛出現(xiàn)酚紅所需的時(shí)間（酚紅在堿性液中呈紅色，可在培養(yǎng)皿下墊一白紙以便及時(shí)觀察到）。形態(tài)學(xué)觀察?？諝忉樚幩兰彝茫〕瞿I臟，稱重，測(cè)腎體比。觀察并比較正常家兔腎臟，如體積大小，皮質(zhì)條紋及色澤等。鑒定糖尿的結(jié)果沸水浴加熱后的現(xiàn)象葡萄糖含量（g/dl）透明藍(lán)色無加熱時(shí)無變化，僅冷卻后有少量沉淀微量，約0.5以下加熱1分鐘后即出現(xiàn)少量黃綠色沉淀少量，約0.5－1加熱10－15秒后即出現(xiàn)土黃色沉淀中量，約1－2加熱時(shí)很快出現(xiàn)多量磚紅色沉淀大量，約2以上尸檢結(jié)果（本組）

二、表一實(shí)驗(yàn)過程與結(jié)果組別分組體重（Kg）性別實(shí)驗(yàn)前體征實(shí)驗(yàn)中體征尸解分析腎體比%補(bǔ)充乙2（本實(shí)驗(yàn)組）生理鹽水組2.074雄實(shí)驗(yàn)前一天雙耳直立，活潑好動(dòng)。實(shí)驗(yàn)日單耳直立，不活潑。心跳呼吸正常。1、膀胱初始不充盈，尿液濃黃色。2、左腎下方輸尿管來插管，等待30min無尿。3、生理鹽水18.5ml，等待5min無尿，又10ml生理鹽水，等待5min無尿，觀察左側(cè)腎略腫大；而后從膀胱抽取尿液測(cè)血糖“+++”，蛋白檢測(cè)結(jié)果為不含蛋白。4、換側(cè)插管（右），尿液呈紅色，測(cè)血糖“++”。注射生理鹽水無尿，注射呋塞米無尿。處死，左腎：9.1g，表面光滑，質(zhì)地相對(duì)較硬，明顯腫大充血，解剖后發(fā)現(xiàn)皮質(zhì)髓質(zhì)分界不清，皮質(zhì)少，有較大暗紅色斑塊。右腎：7.3g，表面光滑，質(zhì)地相對(duì)較軟，沒有腫大，解剖后發(fā)現(xiàn)皮質(zhì)髓質(zhì)分界不清，皮質(zhì)少。7.9乙6生理鹽水組2.045雄呼吸，心跳正常1、膀胱充盈，2、正常尿量：0.08ml/5min尿蛋白陰性尿糖陰性。3、靜注生理鹽水后尿量最多時(shí)為0.2ml/5min，4、靜注葡萄糖后尿量最多時(shí)為0.3ml/5min尿糖仍為陰性，5、靜注去甲腎上腺素后尿量為0.06ml/5min，6、靜注呋塞米后尿量為2.75ml/5min（20min后降為1.90ml/5min）7、靜注酚紅，從注射酚紅到尿液中剛出現(xiàn)酚紅的時(shí)間為5分29秒左腎9.1g，右腎8g（結(jié)扎的為左腎）紋理清晰。8.4乙7氯化高汞組0.081.95雌耳朵較堅(jiān)挺，耳緣靜脈明顯未處理時(shí)每5min尿量分別為110（紅）,95,99,80（開始變黃）,50,20ul，上述所有尿液收集尿蛋白+，膀胱取尿尿糖+++。2、注射生理鹽水，得黃色尿液5min量分別為110,100,100,90,120,180,160ul。3、注射葡萄糖5min尿量分別是350,300,200,300,295,290ul，尿糖++。4、注射去甲，5min尿量60,100,90ul。5、注射呋塞米尿量240,280,120,100ul。6、注射酚紅觀察10min未見酚紅排除。尸檢結(jié)果：右腎7.9g，長(zhǎng)3cm，寬2cm，厚1cm。左腎7.8g，長(zhǎng)3.5cm，寬2cm，厚1.5cm。觀察到左右腎臟外形飽滿，質(zhì)地柔軟，包膜光滑，皮質(zhì)髓質(zhì)界限清楚，未有出血或皮質(zhì)蒼白的現(xiàn)象。8.1第一次葡萄糖注射入皮下，尿量增加可能原因1、生理鹽水效應(yīng)，2、疼痛造成的神經(jīng)性反射。三、乙7組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表二正常時(shí)每5min的尿流量編號(hào)時(shí)間尿量（估計(jì)）顏色對(duì)應(yīng)次序15110紅121095紅231599紅342080黃452550黃563020黃6表三靜脈快速注射37-38℃的生理鹽水15ml后尿量編號(hào)時(shí)間（min）尿量（微升）顏色對(duì)應(yīng)次序15110黃7210100黃8315100黃942090黃10525120黃11630180黃12735160黃13表四靜脈注射200g/L葡萄糖5ml后尿量編號(hào)時(shí)間（min）尿量（微升）顏色對(duì)應(yīng)次序15350黃14210300黃15315200黃16420300黃17525295黃18630290黃19表五靜脈注射0.1g/L去甲腎上腺素0.3ml后尿量編號(hào)時(shí)間（min）尿量（微升）顏色對(duì)應(yīng)次序1360黃2028100黃2131390黃22表六靜脈注射10g/L呋塞米1ml后尿量編號(hào)時(shí)間（min）尿量（微升）顏色對(duì)應(yīng)次序15240黃23210280黃24315120黃25420100黃26四、圖一尿量變化（對(duì)照組乙6）圖二尿量變化（實(shí)驗(yàn)組乙7）表七尿糖、蛋白尿與酚紅的比較乙6乙7正常尿量葡糖正常尿量葡糖尿糖－－＋＋＋＋＋尿蛋白－＋酚紅5分29秒10分鐘未見酚紅[實(shí)驗(yàn)討論]一、急性腎功能不全是否等同于腎功能衰竭？ 平常所指急性腎功能不全與急性腎功能衰竭沒有加以區(qū)分，很多情況下，默認(rèn)急性腎功能不全等同于急性腎功能衰竭。 但是，現(xiàn)在對(duì)腎功能損傷程度進(jìn)行分期時(shí)，明確分為腎功能不全代償期，腎功能不全失代償期，腎衰竭期，尿毒癥期。并未提及腎功能不全。本人建議將腎功能受損加入“正常期”，在此期，患者盡管存在腎臟受損，但化驗(yàn)?zāi)I功能正常，而此時(shí)不能定義患者腎臟未受損傷（可以表現(xiàn)為腎臟的儲(chǔ)備功能已降低）。此期過后，再有腎功能不全與腎功能衰竭的逐漸病變發(fā)展。棄用“急性腎功能不全”改用“腎功能衰竭”能夠有效提高臨床醫(yī)生對(duì)其提早重視，進(jìn)行積極治療。二、關(guān)于本組正常組少尿現(xiàn)象的分析 本組實(shí)驗(yàn)為正常組，初始膀胱不充盈，且在后期實(shí)驗(yàn)（生理鹽水注射與呋塞米注射）中導(dǎo)尿管均未能收集到尿液。在左側(cè)輸尿管進(jìn)行結(jié)扎后插管時(shí)，首次未能從膀胱抽取尿液，20分鐘后第二次從膀胱抽取到約1毫升尿液，提示此尿液經(jīng)右腎進(jìn)入膀胱。左腎插管后長(zhǎng)時(shí)間無尿，遂行右側(cè)輸尿管插管，導(dǎo)尿管中出現(xiàn)約2毫升紅色液體。 在左右側(cè)輸尿管多次插管后，只能選擇近腎端插管，導(dǎo)管深入腎門，到達(dá)腎盂。兩次插管后導(dǎo)尿管都無尿液，左側(cè)腎出現(xiàn)嚴(yán)重水腫（左側(cè)輸尿管插管時(shí)間大大大于右側(cè)）由于導(dǎo)尿管深入腎盂造成尿液反流，腎臟積水。三、各種影響因素對(duì)腎臟的影響 1）生理鹽水：（1）注射生理鹽水后，血容量增加，左心房被擴(kuò)張，刺激了容量感受器，傳入沖動(dòng)經(jīng)迷走神經(jīng)傳入中樞，可抑制下丘腦-垂體后葉系統(tǒng)釋放抗利尿激素，遠(yuǎn)曲小管、集合管對(duì)水重吸收減少，從而引起利尿。（2）血容量增加，心輸出量增加，引起動(dòng)脈血壓升高，刺激頸動(dòng)脈竇壓力感受器，反射性抑制抗利尿激素的釋放，尿量增加。（3）血容量增加，一起學(xué)姐膠體滲透壓降低，腎小球有效濾過壓升高，尿量增加；心輸出量增加，腎血液灌流增加，腎小球毛細(xì)血管血壓升高，引起腎小球有效濾過壓升高，尿量增多。 2）葡萄糖溶液 當(dāng)血糖濃度大于腎糖閾時(shí)，小管液中的葡萄糖濃度增大，使近端小管液的滲透壓增大，水重吸收減少，小管液中的Na+濃度與細(xì)胞內(nèi)的Na+濃度接近，Na+