糧油檢驗 大米直鏈淀粉含量的測定 編制說明

1《糧油檢驗大米直鏈淀粉含量的測定》編制說明根據(jù)國家標準化管理委員會下達的項目（編號為20153546-T-449）對現(xiàn)行《大米直鏈淀粉含量的測定》國家標準進行修訂，由湖北省糧油食品質量2015年立項擬修訂的GB/T15683-2008《大米直鏈淀粉含量的測先后出版了2017版、2019版（征求意見）和2020版。為了標準的穩(wěn)定性，特米直鏈淀粉含量的測定》，因標準修訂期間，ISO6647-1/2:2017和ISO6647-1/2:2019（征求意見稿）版本反復修改，ISO6647-1/2:2020版正式發(fā)布實施，針對以上的變化，標準修訂工作在2020年后又再次22015年立項修訂GB/T15683-2008《大米直鏈淀粉含量的測定》2023年6月—至今，最終確定了標準的主要內容，編寫標準文本和編制說表1標準主要起草人及其所做的工作參與人員承擔工作熊寧全面負責標準的修訂工作，制訂標準修訂工作方案，提出實驗的方向和內容等劉堅、孫婷琳、劉利負責文本、編制說明的編寫、修改完善，3征求意見的收集整理等劉堅、劉利、孫婷琳實驗方案的制定、檢測試驗劉利、吳莉莉、孫婷琳、劉堅、許詩堯、秦時聰負責查閱文獻、收集樣品、檢測試驗、數(shù)據(jù)匯總分析等國家糧食和物資儲備局標準質量中心徐廣超和張艷、南京財經(jīng)大學袁建對現(xiàn)行國際標準、實驗方案等進行技術指導河南工業(yè)大學周顯青對ISO標準進了了翻譯指導其他單位和參與人員參與標準的實驗驗證、方案優(yōu)化、文本及編制說明的修改按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則—2008相比，除結構調整和編輯性改動外，另外新增了第二法，第一法主要技檢測波長的選擇會導致檢測結果的差異，實驗表明，樣品在檢測波長720nm、4當前，國際和國內的相關標準情況比較如下。一是現(xiàn)行的國家標準。GB/T15683-2008《大米直鏈淀粉含量的測定》是等同采用了ISO6647-1:2007，將二是現(xiàn)行的國際標準。國際標準分別在2007、2015、2017、2020年進行修訂。農(nóng)業(yè)部2014年發(fā)布NY/T2639-2014《稻米直鏈淀粉的測定分光光度法》，參5表1樣品未脫脂與甲醇抽提回流脫脂的比對試驗樣品編號樣品未脫脂，%樣品回流抽提脫脂，%121.825.2227.830.4331.633.6422.326.5523.525.7678越南大米13.42糯米2.102.3020.923.1大米20#表2不同脫脂處理方式大米樣品直鏈淀粉含量檢測結果樣品對照組（85%甲醇）100%甲醇超聲1225.224.3330.430.2433.632.2526.526.7625.725.3782.303.00注：1-8為8個不同直鏈淀粉含量的大米樣品表3不同脫脂方式測得直鏈淀粉含量的配對t檢驗結果6實驗條件均值標準差均值的標準誤差分的95%置信區(qū)間上限下限上限側)甲醇回流-甲醇超聲0.2500.7540.266-0.3800.8800.93870.3800.3800.05說明甲醇超聲法與甲醇回流法間無顯著差異，可以作為直鏈表4不同脫脂樣品量的直鏈淀粉檢測結果分析樣品編號不同脫脂樣品量直鏈淀粉含量相對相差δ重復性限值r0.5(g)1.0(g)超聲脫脂923.324.02.870.692.7021.221.30.472.14923.824.20.512.7121.521.30.892.13注：9、10、11為三份直鏈淀粉含量不同的大米樣品7樣品10(秈米)1(越南大米)2(糯米)3(高粱米)4(薏仁米)5(青稞)綜上所述，確定大米樣品的脫脂條件為：脫脂樣品量0.5g,超聲溫度50℃,超聲時間50分鐘。3.1.3分散方式的選擇選取14份樣品，樣品中直鏈淀粉含量在1.5%-26.8%(720nm測定值)。選取煮沸法、浸泡過夜法和磁力攪拌法三種不同的方法進行分散淀粉，在720nm波長下測定樣品值，結果如下圖1和表6,對表6中的檢測結果，運用SPSS軟件按照配對t檢驗進行分析，設臨界水平a=0.05,數(shù)據(jù)分析結果見表7。8表6不同樣品溶液制備方式的直鏈淀粉含量檢測結果樣品編號直鏈淀粉含量/（%）煮沸法浸泡過夜法磁力攪拌法625.925.124.2782.302.6024.626.125.56.607.707.109.9026.826.225.123.824.325.524.025.625.1平α=0.05，數(shù)據(jù)分析結果見表7。煮沸法、浸泡過夜法、磁力攪拌法三組直鏈淀粉檢測結果之間，兩兩為一組的配對t檢驗，顯著性P值均大于0.05，說明表7不同樣品溶液制備方式測得直鏈淀粉含量的配對t檢驗結果實驗條件均值標準差均值的標準差差分的95%置信區(qū)間t下限上限煮沸法-過夜法-0.4421.0320.275-1.0380.153-1.600.132煮沸法-磁力攪拌法-0.6141.2430.332-1.330.103-1.840.087過夜法-磁力攪拌法-0.171.9100.243-.6970.354-0.7040.494取14份大米樣品，標準物質和樣品在同一波長進行檢測，現(xiàn)選取720nm、表8不同分光光度計使用波長的直鏈淀粉檢測結果樣品編號直鏈淀粉含量/（%）720nm680nm620nm625.924.525.6625.924.59782.3024.66.609.9026.823.824.03.0024.97.4026.624.424.53.8027.32.309.8027.727.027.1對上表中的檢測結果，運用SPSS軟件按照配對t檢驗進行分析，設臨界于0.05，表明三種不同檢測波長間兩兩存在顯著差異。考慮在后續(xù)的研究中，表9不同分光光度計使用波長測得直鏈淀粉含量的配對t檢驗結果實驗條件均值標準差均值準差差分的95%置信區(qū)間t下限上限720nm-680nm-0.4140.4160.111-0.654-0.1737-3.720.003620nm-680nm1.7500.2981.1042.3955.850.000720nm-620nm-2.1640.387-3.002-1.326-5.580.00030min的烘箱平衡方式可快速實現(xiàn)樣品中水分平衡，與ISO6647-1方法中的靜表10樣品平衡水分試驗樣品編號水分含量，%樣品編號水分含量，%樣品編號水分含量，%12121212121212121212121212121212平均值平均值平均值原始水分原始水分原始水分表11直鏈淀粉檢測方法一驗證試驗技術路線技術路線脫脂方式水分平衡方式分散方式檢測波長測試樣品備注1甲醇回流熱分散720nm粉末現(xiàn)行國標方法2甲醇回流磁力攪拌冷分散720nm粉末分散方式改進3甲醇回流烘箱平衡熱分散720nm粉末水分平衡方式改進4甲醇回流烘箱平衡磁力攪拌冷分散720nm粉末法改進5超聲脫脂熱分散720nm粉末脫脂方式改進6超聲脫脂磁力攪拌冷分散720nm粉末進7超聲脫脂烘箱平衡熱分散720nm粉末式改進8超聲脫脂烘箱平衡磁力攪拌冷分散720nm粉末脫脂、水分平衡、分散方法改進條技術路線用自制馬鈴薯直鏈淀粉與Sigma試劑制作標準曲線，其他步驟按照ISO6647-1：2020方法進行直鏈淀粉檢測，每條技術路線每個樣品平行測試6表12檢測結果樣品編號標準品路線1路線2路線3路線4路線5路線6路線7路線8平均相對標準偏差（%）23001sigma0.60.723002sigma21.422.924.522.121.822.721.823.323.222.422.722.520.421.523003sigma24.025.728.025.025.023.227.527.525.725.525.125.625.723.024.325.824.725.023005sigma22.425.626.525.824.223.427.226.925.324.425.924.326.522.324.624.424.224.623009sigma0.923022sigma25.325.828.926.325.722.825.727.826.027.525.725.527.023.623.925.724.925.523028sigma20.020.221.420.00.723036sigma21.221.220.120.02.023037sigma20.123.724.224.321.620.821.722.022.321.923.922.124.420.221.922.222.0先用格拉布斯（Grubbs）法判斷表12數(shù)=2.032。根據(jù)上述方法計算|vi|的表13實驗測定結果的Grubbs計算結果表樣品編號標準品λ23001sigma0.30.90.20.50.50.10.10.70.70.70.20.80.00.40.42300223003230052300923022230282303623037sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制0.40.52.90.20.00.72.00.62.20.10.00.10.30.10.70.20.20.70.22.42.70.92.30.60.30.22.90.00.80.42.00.10.30.70.70.50.60.30.80.12.02.42.03.30.72.02.30.10.30.02.70.72.92.02.50.70.02.03.22.10.70.42.30.10.00.80.20.10.30.30.22.20.32.50.60.20.90.30.40.30.60.80.72.50.32.33.73.93.72.03.52.42.23.72.82.83.94.13.23.3性。因此自制標準品與sigma試劑分別配制的標量之間不存在顯著性差異，其差異幅度Cohen'sd值均小于編號平均值±標準差tPCohen'sd11.250±0.67411.638±0.555-0.99970.3510.35321.525±1.90821.763±1.771-0.22870.8260.08124.963±0.95025.738±1.768-0.9470.3790.33224.575±1.24925.250±1.739-0.99470.3530.35114.988±1.07615.038±0.938-0.26770.7970.09525.475±1.35526.038±1.8000.57370.5850.20318.663±0.69119.163±1.4491.11470.3020.39417.688±2.00018.663±1.9321.17970.2770.4172303722.3±1.58622.038±1.602-0.49370.6370.174進行正態(tài)性檢驗。配對差值正態(tài)性檢驗見表15中S-W、偏度、峰度結果。由表15呈現(xiàn)顯著性，因此數(shù)據(jù)滿足正態(tài)分布。序號9、17、18、20、28五組配對差值的絕對值小于3。結合正態(tài)分布直方圖，正態(tài)圖基本上呈現(xiàn)出鐘形（中間高，兩端），說明每組配對樣本之間不存在顯著性差異。如果配對樣本T檢驗呈現(xiàn)顯著性，可借助效應量化Cohen'sd值對差異性進行量化分析。Cohen'sd值＜0.2表示差異幅度非常小；0.2≤Cohen'sd值＜0.5表示差異幅度較??；0.5≤Cohen'sd值<表15配對差值正態(tài)性檢驗結果及配對T檢驗結果S-W偏度峰度PCohen'sd1技術1配對技術20.3-0.592-10.0590.7962技術1配對技術30.61-0.386-0.8740.2750.2833技術1配對技術40.0550.0590.5114技術1配對技術50.9090.024-0.6220.041**0.5575技術1配對技術60.812-0.324-0.6680.028**0.6066技術1配對技術70.081-0.734-0.610.280.287技術1配對技術80.614-0.4-0.7080.340.2468技術2配對技術30.529-0.810.5110.7410.0849技術2配對技術40.002***0.7140.093技術2配對技術50.7980.218-0.5270.007***0.774技術2配對技術60.620.425-0.2270.000***1.114技術2配對技術70.4550.6790.6750.107技術2配對技術80.8630.311-0.410.6290.123技術3配對技術40.8920.311-0.5370.8810.038技術3配對技術50.7570.3890.1630.000***1.279技術3配對技術60.829-0.5340.3980.021**0.645技術3配對技術70.006***-0.833.2870.9490.016技術3配對技術80.000***3.4670.9310.022技術4配對技術50.821-0.016-0.1110.001***1.099技術4配對技術60.026**0.001***0.995技術4配對技術70.135-0.9240.20.8490.048技術4配對技術80.18-0.8350.5560.8510.048技術5配對技術7技術5配對技術8技術6配對技術7技術6配對技術8技術7配對技術8注：***、**、*分別代表1%、5%、性P值為0.041**,水平上呈現(xiàn)顯著性，因此技性差異。其差異幅度Cohen'sd值為：0.557,差異幅度中等。基于技術路線1與術路線6之間存在顯著性差異。其差異幅度Cohen'sd值為：0.608,差異幅度中同時，技術路線1、2、3、4、7、8與技術路線5,6兩兩之間，配對t檢驗結果顯著性P值均小于0.05,且Cohen'sd值均大于0.5,表明技術路線5、6的樣品4、7、8測得的樣品直鏈淀粉含量平均值與技術路線5、6的路線5,6的檢測結果較平均值普遍偏低。分析原因為超聲波的空化和乳化效應，使超聲處理后的樣品中形成微小的“乳滴”,脂質與常溫條件下徹底分離，導致檢測結果偏低。此外廖雪勤等發(fā)現(xiàn)，超聲處理會理時，常添加表面活性劑以降低乳化效應，本研究中烘箱平衡水分的步驟也起到了該功能。因此技術路線5、6相對其他組別檢測結果偏低。圖2平均值與技術路線5、6檢測結果比對3.2標準文本第二法新增的理由第二法中采用樣品和參考物質不脫脂、不平衡、不同分散方式對直鏈淀粉含量的測定，設計如下實驗，見表16。表16直鏈淀粉檢測方法二驗證試驗技術路線路線檢測測試樣品備注9不脫脂不平衡熱分散不脫脂不平衡新增第二法是修改采用ISO6647-2:2020,將此法作為標準文本的第二法，由于檢測波長的選擇會導致檢測結果的差異，實驗表明，樣品在檢測波長720nm、其余步驟和實驗條件均與ISO6647-2:2020保持一致。第一法中技術路線1和第二法中技術路線9、10結果對比如下表17,通過數(shù)據(jù)看出，除了樣品23003的結果差異大外，其他樣品結果差異不大。編號平均值技術路線1-9技術路線1-10技術路線1技術路線9技術路線10絕對偏差絕對偏差表18標準方法驗證單位序號驗證單位名稱1湖北省糧油食品質量監(jiān)督檢測中心2南京財經(jīng)大學3吉林省產(chǎn)品質量監(jiān)督檢驗院4國家糧食和物資儲備局科學研究院5深圳市計量質量檢測研究院表19技術路線1的驗證結果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量55555555接受的結果數(shù)量27232529平均值m/m，%11.0319.9925.6425.5714.9125.6118.9318.50重復性標準偏差（Sr）0.400.340.770.550.180.350.550.30重復性變異系數(shù)（CV）,%3.603.002.152.89重復性限值（r）0.962.150.490.990.85再現(xiàn)性標準偏差（SR）0.892.032.250.440.76再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%8.0510.165.908.812.972.986.819.20再現(xiàn)性限值（R）2.495.694.236.312.133.614.77表20技術路線2的驗證結果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量44444345接受的結果數(shù)量23242424242227平均值m/m，%12.5021.6126.5026.5615.5026.8420.3721.25重復性標準偏差（Sr）0.170.600.640.640.420.670.210.53重復性變異系數(shù)（CV）,%2.792.402.422.682.512.49重復性限值（r）0.470.58再現(xiàn)性標準偏差（SR）0.642.50再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%5.114.944.795.167.614.066.1511.75再現(xiàn)性限值（R）2.993.563.843.303.053.516.99表21技術路線3的驗證結果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量54555555接受的結果數(shù)量292426292827平均值m/m，%11.9721.1627.6526.9515.9126.9320.2019.23重復性標準偏差（Sr）0.250.350.200.370.470.260.280.30重復性變異系數(shù)（CV）,%2.050.712.920.95重復性限值（r）0.690.970.550.710.790.83再現(xiàn)性標準偏差（SR）0.400.750.960.772.11再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%8.482.725.326.054.693.8010.95再現(xiàn)性限值（R）2.842.104.012.703.542.155.90表22技術路線4的驗證結果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量43354454接受的結果數(shù)量2428242223平均值m/m，%12.2421.6226.1125.4215.0825.7719.1816.90重復性標準偏差（Sr）0.430.230.290.430.540.280.290.42重復性變異系數(shù)（CV）,%3.473.572.48重復性限值（r）0.630.820.780.81再現(xiàn)性標準偏差（SR）0.512.370.840.40再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%12.342.375.969.347.853.286.602.36再現(xiàn)性限值（R）4.234.366.653.312.373.55表23技術路線7的驗證結果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量55555555接受的結果數(shù)量272928平均值m/m，%11.3620.4726.0125.7214.3824.9418.9918.54重復性標準偏差（Sr）0.400.500.600.160.240.310.410.48重復性變異系數(shù)（CV）,%3.552.422.290.612.172.59重復性限值（r）0.440.670.88再現(xiàn)性標準偏差（SR）0.79再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%9.945.194.904.785.477.587.529.74再現(xiàn)性限值（R）3.162.973.573.452.205.294.005.05表24技術路線8的驗證結果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量34555555接受的結果數(shù)量21272927平均值m/m，%11.8122.9026.1426.1314.1723.6318.9519.13重復性標準偏差（Sr）0.340.180.540.560.330.300.570.47重復性變異系數(shù)（CV）,%2.870.802.052.132.343.022.44重復性限值（r）0.950.520.930.84再現(xiàn)性標準偏差（SR）2.290.92再現(xiàn)性變異系數(shù)（CV）,%9.2010.015.195.4610.353.887.328.30再現(xiàn)性限值（R）3.046.423.803.994.112.563.894.44表25技術路線9的驗證結果項目樣品2300123002230032300523009230222302823036參加實驗室數(shù)量55555555結果數(shù)量2227232728接受的實驗室數(shù)量34344444接受的結果數(shù)量21212121平