復(fù)旦大學(xué)《生物制藥技術(shù)》教學(xué)-發(fā)酵工程制藥

菌種分離的一般過程(來源):土樣的采取->預(yù)處理->培養(yǎng)->菌落的選擇->產(chǎn)品的鑒定定義：用于構(gòu)成菌體細(xì)胞物質(zhì)(氨基酸，蛋白質(zhì)、核酸等)和含氮代謝物的營養(yǎng)物質(zhì)。**有機氮源與無機氮源混合使用，早期用無機氮源(速效),中期起用遲效氮源(如蛋白質(zhì))3、微量元素(無機鹽)培養(yǎng)基定義：廣義上講培養(yǎng)基是指一切可供微生物細(xì)胞生長繁殖所需的一組營養(yǎng)物質(zhì)和原料。(一)培養(yǎng)基組分應(yīng)適合微生物的營養(yǎng)特點(目的明確)(二)營養(yǎng)物的濃度與比例應(yīng)恰當(dāng)(營養(yǎng)協(xié)調(diào))[C/N=100:0.5~2(三)物理化學(xué)條件適宜(條件適宜)(四)根據(jù)培養(yǎng)目的選擇原料及其來源(經(jīng)濟(jì)節(jié)約)接種量=2、生理狀況穩(wěn)定(個體與群體)1、菌種細(xì)胞的生長活力強，轉(zhuǎn)種至發(fā)酵罐后能迅1、菌絲形態(tài)、菌體濃度和培養(yǎng)基外觀(色素、顆粒等)2、培養(yǎng)溫度：過低?過高?4、通氣與攪拌：通氣攪拌不足可引起菌絲結(jié)團(tuán)，菌絲5、斜面冷藏時間：冷藏時間對孢子的生產(chǎn)能力有影響1、菌種穩(wěn)定性檢查(測定生產(chǎn)能力，防止生產(chǎn)能力下降)優(yōu)點：操作簡單，周期短，染菌機會少，生產(chǎn)過程b.補料分批培養(yǎng)(加入不取出)d.連續(xù)培養(yǎng)(濃度恒定)2、排氣氧、排氣CO2和呼吸熵氨基氮指有機氮中的氮(NH2-N),氨氮指無機氨中的氮(NH3-N)1)溫度對發(fā)酵的影響與控制1)溫度對發(fā)酵的影響與控制2、根據(jù)生長階段選擇一前期t菌生長迅速，中期↓推遲衰老，產(chǎn)物合成，后期1刺激產(chǎn)物4、根據(jù)菌種生長情況一生長快，高溫短；生物熱：生長過程產(chǎn)熱，影響因素：菌種特性、生長階段、2)氧的影響及控制2)氧的影響及控制2、通氣(空氣流量)—通入空氣、廢氣3、發(fā)酵液的粘度一影響氧的遷移和CO2擴散5、泡沫—液態(tài)泡沫影響氣體交換與傳遞，消沫劑分布在氣液3、培養(yǎng)液溶解氧濃度CL的影響：當(dāng)CL高于菌體的C臨界時，菌體的呼吸不受影響5、CO?濃度的影響：影響菌體的呼吸，進(jìn)而影響菌體的代謝活動2、調(diào)整培養(yǎng)基中碳源成分：如葡萄糖，降低3、降低培養(yǎng)溫度：使溶氧值升高(影響菌體生長)a.發(fā)酵過程pH變化的原因b.pH對發(fā)酵的影響1、影響酶活性：某些酶被抑制時菌的新陳代謝受阻3、影響培養(yǎng)基某些成分和中間代謝物的解離：影響其利用5、影響菌體形態(tài)：高于7.5或低于6.5菌體易老化2、通氣不足或菌體生長過于旺盛：使溶解氧不足，有機酸大量積累4、生理酸性物質(zhì)應(yīng)用e.pH上升原因f.最佳PH的確定4)營養(yǎng)物質(zhì)的影響和控制4)營養(yǎng)物質(zhì)的影響和控制1、碳源及其濃度對發(fā)酵的影響(速效&遲效):2、氮源及其濃度對發(fā)酵的影響(混合氮源):補加無機氮源一當(dāng)PH偏高又需要補氮時，可補加生理酸性物質(zhì)硫酸銨(2作用)4、前體：有毒性(作用見上文)少量多次、連續(xù)流加5)菌體濃度的影響和控制5)菌體濃度的影響和控制微生物的種類和遺傳特性、營養(yǎng)物質(zhì)的種類和濃度、c.菌體濃度的控制：最適菌濃6)泡沫的影響和控制6)泡沫的影響和控制a.泡沫的產(chǎn)生原因2、培養(yǎng)基配比與原料組成：培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富，黏度大，產(chǎn)生泡3、菌種、