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離體腸段平滑肌的生理特性
實(shí)驗(yàn)中心機(jī)能實(shí)驗(yàn)室張福梅實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.通過(guò)觀察各種因素對(duì)離體小腸平滑肌運(yùn)動(dòng)的影響,加深對(duì)平滑肌生理特性的了解。2.學(xué)習(xí)動(dòng)物離體組織器官灌流的實(shí)驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)原理
哺乳動(dòng)物消化管平滑肌具有肌組織共有的特性,如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性等。但是消化道平滑肌肉有其特點(diǎn),即興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性、自動(dòng)節(jié)律性,對(duì)化學(xué)、溫度和機(jī)械牽張刺激較敏感等。
將離體組織器官至于模擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中,可以在一定時(shí)間內(nèi)保持其功能。本實(shí)驗(yàn)以臺(tái)氏液作灌流液,在體外觀察及記錄家兔離體腸段的一般生理特性。
實(shí)驗(yàn)對(duì)象:家兔實(shí)驗(yàn)藥品:臺(tái)氏液、1:10000腎上腺素、1:10000乙酰膽堿、1%CaCl2、1mol/LHCl溶液、1mol/LNaOH儀器:恒溫平滑肌浴槽、BL-420F生物信號(hào)采集系統(tǒng)、張力傳感器、家兔手術(shù)器械實(shí)驗(yàn)步驟
1.將恒溫平滑肌浴槽的水浴溫度調(diào)節(jié)為38℃.
2.制備離體兔腸段
用立掌猛擊兔后頭延髓部,致其昏迷后立即剖開(kāi)腹腔,找到胃幽門(mén)與十二指腸交界處。在十二指腸起始端扎一線,剪取十二指腸,放入冷臺(tái)氏液內(nèi)。先用20mL注射器沖洗腸內(nèi)容物,沖洗干凈后剪成若干約1.5cm長(zhǎng)的小腸段(每一實(shí)驗(yàn)小組一段)。在其兩端結(jié)扎,一端做一短線環(huán)固定在通氣的L管下方,另一端扎線與張力傳感器相連。將腸段完全浸浴在調(diào)好溫度的恒溫平滑肌浴槽中,并調(diào)整好臺(tái)氏液充氣量(小氣泡接連不斷)。3.開(kāi)啟計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng),接通與張力傳感器相連的通道。固定L管并調(diào)節(jié)扎線與張力傳感器,使腸段運(yùn)動(dòng)自如又能牽動(dòng)傳感器(注意:扎線不可貼壁或過(guò)緊過(guò)松)。調(diào)節(jié)增益與掃描速度,使腸段的運(yùn)動(dòng)曲線清晰地顯示在顯示器上并記錄腸段活動(dòng)曲線。4.實(shí)驗(yàn)觀察
⑴觀察、記錄38℃臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮運(yùn)動(dòng)曲線;⑵觀察、記錄25℃臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮運(yùn)動(dòng)曲線;
⑶待臺(tái)氏液溫度穩(wěn)定在38℃后,加入1—2滴腎上腺素(1:10
000),觀察并記錄曲線變化,清洗2—3次。⑷待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常運(yùn)動(dòng)曲線后,加入1—2滴乙酰膽堿(1:10000),觀察并記錄曲線變化,清洗2—3次。⑸待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常運(yùn)動(dòng)曲線后,加入1—2滴1%CaCl2,觀察并記錄曲線變化。⑹待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常運(yùn)動(dòng)曲線后,加入1—2滴1mol/LNaOH
,觀察并記錄曲線變化,清洗2—3次。⑺待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常運(yùn)動(dòng)曲線后,加入1—2滴1mol/LHCl溶液,觀察并記錄曲線變
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