DB13-T1358-2011養(yǎng)殖用水中孔雀石綠快速測定方法激光拉曼光譜法

ICS65.150

B50

DB13

河北省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB13/T1358—2011

養(yǎng)殖用水中孔雀石綠快速測定方法激光拉曼光譜法

Thequalitativedeterminationofmalachitegreeninaquiculturewater

bysurface-enhancedlaserramanspectrometry

DB13/T1358—2011

養(yǎng)殖用水中孔雀石綠快速測定方法激光拉曼光譜法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了利用激光拉曼光譜法快速檢測水產(chǎn)品養(yǎng)殖、銷售用水或其他水體中微痕量孔雀石綠的

定性定量檢測方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于水產(chǎn)品養(yǎng)殖、銷售用水或其他水體中孔雀石綠的激光拉曼光譜法的現(xiàn)場快速篩查檢

測。

本方法在水中孔雀石綠的定量限為5.0μg/L。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法（GB/T6682—2008，ISO3696:1987，MOD）。

3原理

試樣經(jīng)高速離心后直接測定。樣品中的孔雀石綠分子與表面增強試劑混合后，分子吸附在表面增強

納米顆粒上，其拉曼散射信號可增強106倍以上，使用便攜式激光拉曼檢測儀通過自動判別其特征峰即

可定性檢測出孔雀石綠。通過對測定的拉曼譜圖進行基線調(diào)整和歸一化處理，應(yīng)用外標(biāo)法可進行定量分

析。

4試劑與材料

除另有規(guī)定，所有試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級水。

4.1孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)品：CAS2437-29-8，純度大于99％。

4.2表面增強試劑：OTR201，銀納米溶膠，或相當(dāng)者。

4.3無機鹽凝聚劑：1％氯化鈉水溶液。

4.4無機鹽離子促進劑：2％溴化鉀水溶液。

4.5孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/mL）：準(zhǔn)確稱取0.1000g孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)品，用乙腈溶解后，定

容到100mL，4℃避光保存。

5儀器與設(shè)備

5.1激光拉曼光譜儀。

5.2高速離心機：轉(zhuǎn)速不低于14000r/min（轉(zhuǎn)/分鐘）。

6分析步驟

1

DB13/T1358—2011

6.1樣品采集、保存

取具代表性樣品，裝于棕色瓶中，于2℃～5℃冷藏保存，并在24小時內(nèi)完成檢測。

6.2樣品制備

取1.0mL待測水樣，14000r/min離心5min，上清液即為待測液。

6.3儀器參考條件

a)激光功率：200mW

b)積分時間：10sec

c)平均次數(shù)：2

d)平滑參數(shù)：3

6.3.1定性測定

依次加入0.25mL表面增強試劑（4.2）、0.10mL無機鹽凝聚劑（4.3）、0.25mL待測液和0.10mL

無機鹽離子促進劑（4.4），混勻后開始檢測。根據(jù)譜圖435cm-1（±3cm-1）、1171cm-1（±3cm-1）

和1615cm-1（±3cm-1）處特征拉曼光譜，對水樣中的孔雀石綠進行評估：如同時存在上述特征峰，則

可判定樣品中含有孔雀石綠；否則，不能證明樣品中含有孔雀石綠，需要進一步實驗驗證。水中孔雀石

綠表面增強拉曼光譜圖參見附錄A。

6.5定量測定

對測定的拉曼譜圖進行基線調(diào)整和歸一化處理，基本操作如下：

(1)首先將測定的拉曼光譜數(shù)據(jù)進行基線調(diào)整；

(2)以1171cm-1（±3cm-1）處的特征拉曼峰作為定量基準(zhǔn)峰，對孔雀石綠特征拉曼峰進行歸一化

處理；

(3)歸一化后得到的特征拉曼峰強度可根據(jù)當(dāng)天測得的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行定量。

6.4計算

7.1繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。

7.2結(jié)果按式（1）計算：

…..…….

（1）

式中：

X—樣品中孔雀石綠的含量，單位為毫克每千克（mg/L）；

c—從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的孔雀石綠含量，單位為毫克每升（mg/L）；

V—樣品定容體積，單位為毫升（mL）；

m—樣品量取體積，單位為毫升（mL）。

6.5允許差

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均數(shù)的10%。

2

DB13/T1358—2011

6.6驗證試驗

對陽性樣品需經(jīng)相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)方法進行確證。

3

DB13/T1358—2011

AA

附錄A

（資料性附錄）

水中孔雀石綠表面增強拉曼光譜圖

40000

Intensity(a.u.)

0

40050060070080090010001100120013001400150016001700

RamanShift(cm-1)

圖A.1水中孔雀石綠表面增強拉曼光譜圖

________________________________

4

DB13/T1358—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)由GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院、歐普圖斯光學(xué)納米科技有限公司、國家果類及

農(nóng)副加工產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李揮、張敬軒、張會軍、張巖、劉春偉、賈茜、范斌、李強、龐坤

I

DB13/T1357—2011

AA

附錄A

（資料性附錄）

望都辣椒地理標(biāo)志保護區(qū)域圖

_________________________________

5

DB13/T1358—2011

AA

附錄A

（資料性附錄）

水中孔雀石綠表面增強拉曼光譜圖

40000

Intensity(a.u.)

0

40050060070080090010001100120013001400150016001700