第七章 含量測定-uv

1第七章中藥制劑的含量測定技術(shù)【學(xué)習(xí)目標(biāo)】知識目標(biāo)掌握紫外-可見分光光度法、薄層掃描法、高效液相色譜法、氣相色譜法測定中藥制劑含量的原理和方法熟悉紫外-可見分光光度計(jì)、薄層掃描儀、液相色譜儀、氣相色譜儀的工作原理、使用方法及操作注意事項(xiàng)了解容量分析法和揮發(fā)油測定法的原理和方法技能目標(biāo)熟練掌握紫外-可見分光光度法、薄層掃描法、高效液相色譜法、氣相色譜法的測定中藥制劑含量的基本操作和技能學(xué)會正確查閱《中國藥典》，學(xué)會正確選取儀器、試藥，學(xué)會配制試液，學(xué)會計(jì)量器具和檢驗(yàn)儀器的操作，規(guī)范操作，并學(xué)會正確計(jì)算、處理各種數(shù)據(jù)、判定檢測結(jié)果2講授內(nèi)容紫外-可見分光光度法簡述方法應(yīng)用實(shí)例薄層掃描法簡述方法應(yīng)用實(shí)例 高效液相色譜法簡述方法應(yīng)用實(shí)例 氣相色譜法簡述方法應(yīng)用實(shí)例——川貝枇杷糖漿容量分析法北豆根片中總生物堿的測定克痢痧膠囊中雄黃的測定萬氏牛黃清心丸中朱砂的測定其他分析法揮發(fā)油測定法氮測定法《中國藥典》一部含量測定方法匯總表4類別分析方法品種數(shù)項(xiàng)目數(shù)新增項(xiàng)儀器分析法高效液相色譜法850956709氣相色譜法505224薄層掃描法292912紫外-可見分光光度法17178原子吸收分光光度法221化學(xué)分析法滴定分析27279氮測定法11119揮發(fā)油測定法441重量法330鞣質(zhì)測定法111原理：被測物質(zhì)、紫外或可見光區(qū)優(yōu)點(diǎn)靈敏度高準(zhǔn)確度儀器設(shè)備簡單操作簡便缺點(diǎn)不具分離功能→總成分的測定定量分析的依據(jù)朗伯-比爾定律方法對照品比較法吸收系數(shù)法比色法5紫外-可見分光光度法紫外-可見分光光度法含量計(jì)算對照品比較法吸收系數(shù)法6紫外-可見分光光度法吸光度測量的條件選擇測定波長的選擇：

max吸光度A讀數(shù)范圍：0.3～0.77?調(diào)節(jié)光路?樣參光學(xué)性質(zhì)和厚度相同樣品池樣品溶液，參比池空白溶液樣品池參比池配制樣品的溶劑空白溶液ATA????==?????????????%1000含量測定方法：對照品比較法供試品溶液和對照品溶液各2份平行操作每份結(jié)果對平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)對照品溶液中所含被測成分的量應(yīng)為供試品溶液中被測成分規(guī)定量的100%±10%所用溶劑應(yīng)完全一致止咳寶片（嗎啡）、燈盞細(xì)辛注射劑（總咖啡酸酯）、泌石通膠囊（多糖）、黃楊寧片（環(huán)維黃楊星D）8紫外-可見分光光度法紫外-可見分光光度法含量測定方法：對照品比較法例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量測定本品為黃楊寧經(jīng)加工制成的片劑。每片含環(huán)維黃楊星D0.5mg或1mg可用對照品比較法測其含量。環(huán)維黃楊星D9紫外-可見分光光度法10含量測定方法：對照品比較法例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量測定測定原理：酸性染料比色法紫外-可見分光光度法-黃楊寧片【含量測定】對照品溶液的制備取環(huán)維黃楊星D對照品25mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加甲醇70ml使溶解，用0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置100ml量瓶中，用0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml含環(huán)維黃楊星D10μg）。供試品溶液的制備取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于環(huán)維黃楊星D0.5mg），置50ml量瓶中，加0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液至近刻度，80℃水浴恒溫1.5小時(shí)后取出，冷卻至室溫，加0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液至刻度，搖勻，離心6分鐘（每分鐘轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)），取上清液，即得。測定法精密量取對照品溶液與供試品溶液各5ml，分別置分液漏斗中，各精密加入溴麝香草酚藍(lán)溶液（取溴麝香草酚藍(lán)18mg，置250ml量瓶中，加甲醇5ml使溶解，加0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液至刻度，搖勻，即得）5ml，搖勻，立即分別精密加入三氯甲烷10ml，振搖2分鐘，靜置1.5小時(shí)，分取三氯甲烷層，置含0.5g無水硫酸鈉的具塞試管中，振搖，靜置，取上清液，照紫外-分光光度法（附錄ⅤA），在410nm的波長處分別測定吸光度，計(jì)算，即得。11含量測定方法--吸收系數(shù)法六味地黃顆粒中牡丹皮的含量測定取裝量差異項(xiàng)下的本品約2g，研細(xì)，精密稱定，用水蒸汽蒸餾，收集餾出液約450ml，置500ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。照分光光度法在274nm波長處測定吸收度，按丹皮酚（C9H10O3）的吸收系數(shù)為862計(jì)算，即得。藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每袋（裝量為5g）含牡丹皮按丹皮酚（C9H10O3）計(jì)，不得少于6.0mg。12紫外-可見分光光度法含量（mg/g）=A供×1%×500.0×1000×平均裝量862×m供含量測定方法--標(biāo)準(zhǔn)曲線法多用于可見分光光度法適用于批量樣品的分析曲線可多次使用主要用于總黃酮的含量測定。如《中國藥典》獨(dú)一味膠囊（片）、消咳喘糖漿、諾迪康膠囊、夏枯草口服液、垂盆草顆粒和漢桃葉片中的總黃酮的含量測定；另新血寶膠囊和復(fù)方皂礬丸中硫酸亞鐵的含量測定也用此法13紫外-可見分光光度法含量測定方法--標(biāo)準(zhǔn)曲線法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（又稱工作曲線）：按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法，配制一系列不同濃度（Ci）的對照品溶液（5～7份），在相同條件下分別測其吸光度（Ai），以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度C為橫坐標(biāo)繪制A-C曲線，即得標(biāo)準(zhǔn)曲線（又稱工作曲線）。測定：按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法，配制供試品溶液，在相同條件下測定供試品溶液的A值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出與之對應(yīng)的濃度，即可求出被測成分的濃度。也可將一系列對照品溶液的濃度與相應(yīng)的吸光度進(jìn)行一元線性回歸，求出回歸方程（相關(guān)系數(shù)r≥0.999），將供試品溶液的吸光度代入回歸方程，計(jì)算出被測成分的濃度（C供）14紫外-可見分光光度法樣品A值對照品溶液：一系列不同濃度的對照品溶液相同條件下A為縱坐標(biāo)，C為橫坐標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線（工作曲線）樣品的濃度和含量一系列A值紫外-可見分光光度法--標(biāo)準(zhǔn)曲線法消咳喘糖漿中總黃酮的測定對照品溶液的制備取蘆丁對照品適量，精密稱定，加60%乙醇制成每1ml含蘆丁60μg的溶液，即得。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對照品溶液0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml與5ml，分別置10ml量瓶中，各加0.1mol/L三氯化鋁溶液2ml、1mol/L醋酸鉀溶液3ml，加60%乙醇至刻度，搖勻，放置30分鐘；以相應(yīng)的溶液為空白。照紫外-可見分光光度法（附錄ⅤA），在420nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定法精密量取本品2ml，置50ml量瓶中，加60%乙醇至刻度，搖勻，精密量取1ml，置10ml量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自“加0.1mol