TGDPPS 007-2023 水稻稻曲病菌分離鑒定與稻曲病抗性鑒定技術(shù)規(guī)范

ICS65.020.20CCSB15團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/GDPPS007—2023水稻稻曲病菌分離鑒定與稻曲病抗性鑒定技術(shù)規(guī)范TechnicalspecificationforisolationUstilaginoideavirensandevaluationofresistanceagainstricefalsesmut2023-12-22發(fā)布 2023-12-22實(shí)施廣東省植物保護(hù)學(xué)會(huì)??發(fā)布T/GDPPS007T/GDPPS007—2023前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由廣東省植物保護(hù)學(xué)會(huì)提出并歸口。本文件起草單位：廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所。I水稻稻曲病菌分離鑒定與稻曲病抗性鑒定技術(shù)規(guī)范范圍（系（系等材料對(duì)稻曲病抗性的室內(nèi)鑒定和抗性評(píng)價(jià)。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。NY/T3625 稻曲病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程DB35/T1575 水稻稻曲病菌分離鑒定技術(shù)規(guī)程術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。ricefalsesmut由病原真菌無(wú)性態(tài)為稻綠核菌Ustilaginoideavirens(Cooke)Takahashi，有性態(tài)為綠糙棒菌Villosiclavavirens]所引起的一種水稻穗部病害。該病菌主要為害谷粒，且在水稻灌漿乳熟期表現(xiàn)癥狀。3～4isolate從發(fā)病部位分離獲得，并經(jīng)過(guò)科赫氏法則驗(yàn)證的純培養(yǎng)物。inoculum用于人工接種水稻的病菌孢子懸浮液。試驗(yàn)品種（系）testingvariety（line）抗病性鑒定參試的水稻品種（系）。susceptiblecontrolvariety抗病性鑒定時(shí)選定的當(dāng)?shù)叵鄳?yīng)熟期的感病品種。resistanceidentification1稻曲病菌分離鑒定標(biāo)樣的采集與保存培養(yǎng)基SA200g1000mL水煮沸20mn，1000mL20g20g，攪拌均勻，121℃20min。（PSB）200g1000mL20min，1000mL20g，攪拌均勻，121℃20min。水瓊脂培養(yǎng)基（WA）20g1000mL，121℃20min。病原菌分離培養(yǎng)以常規(guī)組織分離法從稻曲球上分離病原物。在超凈工作臺(tái)上切除稻曲球外層組織，將最內(nèi)層的0.2cm0.3cm75%153PSA28℃培養(yǎng)。7dPSA培養(yǎng)基上。10d～15d后菌落mL1×104個(gè)100μLWA28℃培養(yǎng)至分生孢子萌發(fā)。病原菌鑒定病原菌形態(tài)學(xué)鑒定選取質(zhì)地致密、直徑2mm～3mm的黃色或白色小菌落，用滅菌接種針從菌落邊緣挑取菌絲塊，在光學(xué)顯微鏡下鏡檢觀察厚垣孢子和分生孢子的形態(tài)。病原菌分子鑒定按照DB35/T1575中4的規(guī)定。病原菌中長(zhǎng)期保存PSA28℃恒溫培養(yǎng)10d后，保存于4℃冰箱中，保存?zhèn)溆谩SA保存。稻曲病抗性評(píng)價(jià)2接種體繁殖與準(zhǔn)備5mm3塊，接100mLPSB28℃150rpm/min5d～7dPSBmL5×105個(gè)分生孢子，作為接種體。接種用分離物應(yīng)采用當(dāng)?shù)刂虏×^強(qiáng)、致病性較穩(wěn)定的優(yōu)勢(shì)菌株?？共⌒澡b定鑒定材料的種植與管理3%1d40粒～506片～7101棵～216.6cm20.0cm3次51行感病對(duì)照品種。3cm～5cm175kg/hm2。參試材料在全生育期內(nèi)不使用殺菌劑，1次井岡霉素。接種時(shí)期水稻破口前5d～8d（約幼穗分化第Ⅶ期）。避開(kāi)高溫時(shí)段，16：00～18：00進(jìn)行接種為宜。接種方法接種期管理90%。13h124h142次。若條件允許，宜安裝小型氣象自動(dòng)記錄儀。調(diào)查時(shí)間水稻臘熟期至黃熟期。調(diào)查方法與病情記載對(duì)參試材料進(jìn)行調(diào)查，每個(gè)重復(fù)連續(xù)調(diào)查10穴，每穴調(diào)查最嚴(yán)重的稻穗，記錄1個(gè)數(shù)據(jù)，共調(diào)查1次。原始數(shù)據(jù)記載采用附錄表A.1。抗病性評(píng)價(jià)3評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)稻曲病病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)描述見(jiàn)表1。表1 稻曲病病情級(jí)別分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)病情級(jí)別稻曲球數(shù)（個(gè)/穗）00113253～576～99≥10病情指數(shù)計(jì)算計(jì)算各參試材料相應(yīng)的病情指數(shù)（DI）。計(jì)算公式見(jiàn)式（1）：式中：DI-病情指數(shù)；Bi-各級(jí)病情級(jí)別病穗數(shù)；Bd-各級(jí)病情級(jí)別代表值；M-調(diào)查總穗數(shù)；

DI=ΣM×Md

×100···················································(1)Md-病情級(jí)別最高級(jí)代表值（即9）。評(píng)價(jià)結(jié)果據(jù)參試材料3次重復(fù)的病情指數(shù)（DI）的平均值評(píng)價(jià)其抗病性水平。參NY/T3625，評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2。表2 稻曲病抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)病情指數(shù)（DI）抗性水平0.0～5.0高抗5.1～10.0抗10.1～20.0中抗20.1～40.0中感40.1～60.0感60.1～100.0高感鑒定有效性判別當(dāng)設(shè)置的感病對(duì)照品種病情指數(shù)（DI）大于40時(shí)（即感至高感），該批次稻曲病抗性鑒定視為有效。評(píng)價(jià)報(bào)告格式抗性評(píng)價(jià)結(jié)果記載參附錄表格A.2，保存原始記錄資料。4試驗(yàn)后材料的處理接種后剩余的接種體應(yīng)作滅菌處理。調(diào)查后的稻株應(yīng)進(jìn)行無(wú)害化處理。5附 錄 A（資料性附錄）稻曲病抗性評(píng)價(jià)記載表表A.1稻曲病抗性鑒定調(diào)查記載表編號(hào)品種名稱稻曲球數(shù)（個(gè)/穗）水稻穴號(hào)12345678910重復(fù)I重復(fù)II重復(fù)III重復(fù)I重復(fù)II重復(fù)III注1：播種日期：注2：接種菌株編號(hào)：注3：注4：調(diào)查人：；接種