2023-2024學(xué)年河北省衡水市景縣梁集中學(xué)高三沖刺模擬生物試卷含解析

2023-2024學(xué)年河北省衡水市景縣梁集中學(xué)高三沖刺模擬生物試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．精準(zhǔn)扶貧引進(jìn)某種經(jīng)濟(jì)植物，高三生物小組接手研究該植物是否適合本地生長的項目之一。因此設(shè)計了一個測定該根毛細(xì)胞液濃度的實驗方案，結(jié)果如下表。又測定了本地種植地的土壤溶液濃度，發(fā)現(xiàn)土壤溶液的濃度適合該植物生長，則本地土壤溶液的濃度最可能是（）濃度（mol/L）1．151．21．251．3質(zhì)壁分離狀況不分離剛分離顯著顯著A．≥1．2 B．≤1．2C．<1．2 D．1．15<土壤溶液<1．32．下列關(guān)于生命活動調(diào)節(jié)的敘述，正確的有①嚴(yán)重腹瀉后只需補充水分就能維持細(xì)胞外液正常的滲透壓②刺激支配肌肉的神經(jīng)，引起該肌肉收縮的過程屬于非條件反射③垂體功能受損的幼犬會出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象④突觸后膜上的受體與相應(yīng)神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合后，就會引起突觸后膜的電位變化為外負(fù)內(nèi)正⑤在草原上快速奔跑的狼體內(nèi)，興奮以局部電流的形式在神經(jīng)纖維上雙向傳導(dǎo)⑥抗生素消滅病菌的過程體現(xiàn)了人體的免疫防衛(wèi)功能⑦記憶細(xì)胞受到同種抗原再次刺激后，細(xì)胞周期變短⑧2、4-D、苯乙酸均為生長素類似物A．一項 B．兩項 C．三項 D．四項3．下列根據(jù)各概念圖作出的判斷，正確的是（）

A．若甲圖表示植物細(xì)胞內(nèi)糖類物質(zhì)，則甲圖可以表示多糖b和糖原a的關(guān)系B．若乙圖中a和b分別代表DNA和RNA，則乙圖可以代表硝化細(xì)菌的核酸C．丙圖可體現(xiàn)出細(xì)胞生物膜系統(tǒng)c、核糖體a和線粒體b的關(guān)系D．丁圖能體現(xiàn)生態(tài)系統(tǒng)消費者c、各種動物a和各種真菌b的關(guān)系4．纖維素分子水解成葡萄糖需三類酶協(xié)同催化。下表信息體現(xiàn)出酶的催化特性是種類作用部位作用化學(xué)鍵葡聚糖內(nèi)切酶纖維素分子內(nèi)部β-1，4糖苷鍵葡聚糖外切酶纖維素分子非還原端β-1，4糖苷鍵β-葡萄糖苷酶纖維素二糖β-1，4糖苷鍵A．專一性 B．高效性 C．多樣性 D．作用條件溫和5．下圖表示某反應(yīng)進(jìn)行時，有酶參與和無酶參與的能量變化則下列敘述錯誤的是()A．此反應(yīng)為吸能反應(yīng)B．曲線I表示無酶參與時的反應(yīng)C．E2代表有酶催化時所降低的活化能D．其他條件相同E4越大，則酶的催化效率越高6．內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定是機體進(jìn)行正常生命活動的必要條件。下列關(guān)于內(nèi)環(huán)境及其穩(wěn)態(tài)的敘述錯誤的是（）A．長跑后肌肉酸痛是運動時產(chǎn)生的乳酸積累所致B．內(nèi)環(huán)境是機體進(jìn)行正常生命活動和細(xì)胞代謝的場所C．甲型流感病毒的入侵可能會破壞人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)D．內(nèi)環(huán)境的變化會引起機體自動調(diào)節(jié)器官和系統(tǒng)的活動二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）預(yù)防新冠肺炎（COVID-19）的有效措施是接種疫苗，核酸疫苗已成為疫苗研發(fā)的新領(lǐng)域。圖是一種自擴增mRNA疫苗的設(shè)計、制備及作用機理的過程示意圖，其中樹突細(xì)胞是機體免疫過程中的一類吞噬細(xì)胞。請回答：（1）自擴增mRNA合成的原料是_____，能自我擴增是因為其中含有_____。包裹自擴增mRNA的脂質(zhì)體進(jìn)入樹突細(xì)胞的方式是___。（2）過程④、⑥都能獨立進(jìn)行是因為自擴增mRNA兩個編碼區(qū)中都含有____，核糖體在mRNA上的移動方向是______（填“3’→5”’或“5’→3”’）。（3）抗原肽被呈遞到樹突細(xì)胞膜表面后，與____接觸并使其活化，最終引起人體產(chǎn)生特異性免疫，獲得_____，具備對病毒的免疫力。（4）DNA疫苗通過抗原蛋白基因在動物細(xì)胞中表達(dá)引起機體免疫應(yīng)答。與DNA疫苗相比，mRNA疫苗的安全性更有優(yōu)勢，這是因為mRNA不需要進(jìn)入___，無整合到宿主細(xì)胞染色體基因組中的風(fēng)險，且易被_____水解，不會遺傳給子細(xì)胞。8．（10分）2019年亞馬遜河流域的森林持續(xù)發(fā)生大火，給當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的影響。如圖表示該生態(tài)系統(tǒng)的部分結(jié)構(gòu)和功能，圖中A--D代表生態(tài)系統(tǒng)的生物成分，其中B為食草動物，①～⑩則代表碳元素流動的相應(yīng)過程，回答下列問題：（l）圖中五種成分構(gòu)成___________；分析圖示可知，圖中沒有標(biāo)出的生態(tài)系統(tǒng)的組成成分是________。（2）該生態(tài)系統(tǒng)中碳元素以_____形式在A～D之間流動；圖示可以發(fā)生還原氫與氧氣結(jié)合的過程是______（填圖中序號）。（3）根據(jù)圖中營養(yǎng)結(jié)構(gòu)，若要使D同化的能量增加100kJ，則至少需要第一營養(yǎng)級提供的能量為________kJ；B用于生長、發(fā)育和繁殖的能量流動去向是________。（4）亞馬遜河流域的森林持續(xù)發(fā)生大火，給當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的影響，這說明生物多樣性具有______價值。運用恢復(fù)生態(tài)學(xué)重建了該森林曾有的植物和動物群落，該過程屬于群落的______演替。9．（10分）稻蟹生態(tài)系統(tǒng)中，河蟹為雜食性動物，可捕食小動物和雜草，稻田養(yǎng)蟹能提高經(jīng)濟(jì)效益。請回答下列問題：（1）河蟹屬于生態(tài)系統(tǒng)組成成分中的____________，河蟹同化的能量一部分用于自身的生長、發(fā)育和繁殖等生命活動，其余_______________。（2）錯綜復(fù)雜的食物網(wǎng)是稻蟹生態(tài)系統(tǒng)保持相對穩(wěn)定的重要條件，食物網(wǎng)是指____________。與熱帶雨林生態(tài)系統(tǒng)相比，該稻蟹生態(tài)系統(tǒng)在遭受害蟲侵襲后更易崩潰的原因是___________________。（3）生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)是可以循環(huán)利用的，但是該稻蟹生態(tài)系統(tǒng)申，物質(zhì)要持續(xù)依賴于系統(tǒng)外的供應(yīng)，請結(jié)合生態(tài)學(xué)知識解釋其原因：___________________________。10．（10分）蜘蛛絲是自然界中機械性能最好的天然蛋白纖維，其強度高于制作防彈衣的凱夫拉纖維，有廣泛的應(yīng)用前景，但如何大量獲取蜘蛛絲纖維的問題一直未解決。近期，中國科學(xué)家利用基因工程技術(shù)成功的在家蠶絲腺細(xì)胞中大量表達(dá)蜘蛛絲蛋白。（1）在轉(zhuǎn)基因過程中，若利用圖所示質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，需要用_____________酶來切割目的基因，該切割方法的優(yōu)點是_____________________________________________(答出一點即可)。（2）為獲取大量的蜘蛛絲基因，常采用_______________技術(shù)對該基因進(jìn)行擴增。擴增蜘蛛絲基因前，需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設(shè)計__________種引物。進(jìn)行擴增時需先加熱至90～95℃，加入引物后冷卻至55~60℃，以上調(diào)控溫度操作的目的是____________________。（3）載體中的啟動子是____________酶的識別結(jié)合位點，以便于驅(qū)動遺傳信息的表達(dá)過程；而載體本身的擴增，需借助于載體上的_________________；載體上的標(biāo)記基因的作用是_____________________________。（4）研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50％，這項成果用到的生物工程技術(shù)為____________________________。11．（15分）下圖是“?；~塘”簡化模式圖，請據(jù)圖回答下列問題：（1）圖中屬于生態(tài)系統(tǒng)基石的生物有_______，它們所需的能量最終都來自于_________。（2）蠶糞中碳元素可以以___________形式被魚食用，這是第_________營養(yǎng)級的同化能量流向魚，而魚產(chǎn)生的糞便可以作為肥料經(jīng)過____________________作用后被桑樹利用。（3）從能量流動的角度分析，蠶糞、豬糞等再度被利用，體現(xiàn)了桑基魚塘能實現(xiàn)能量的多級利用，提高了能量的__________________。該生態(tài)系統(tǒng)中的甘蔗必須在光照時間為11.5h～12.5h時才會開花，這體現(xiàn)了信息傳遞的作用是___________________。（4）科研小組又對蠶的能量流動情況進(jìn)行分析，結(jié)果如表（數(shù)字為能量值，單位是kJ/（cm2?a））蠶攝入的能量蠶糞便中的能量蠶用于生長發(fā)育和繁殖的能量蠶呼吸作用散失的能量47.825.4？21.2（4）據(jù)表分析，蠶用于生長發(fā)育和繁殖等的能量是_________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

植物的成熟細(xì)胞置于一定濃度的外界溶液中，當(dāng)外界溶液濃度大于細(xì)胞液濃度時，根據(jù)擴散作用原理，水分子會由細(xì)胞液中滲出到外界溶液中，通過滲透作用失水；由于細(xì)胞壁和原生質(zhì)層的伸縮性不同，細(xì)胞壁伸縮性較小，而原生質(zhì)層伸縮性較大，從而使二者分開，即質(zhì)壁分離；反之，外界溶液濃度小于細(xì)胞液濃度，則細(xì)胞通過滲透作用吸水，分離后的質(zhì)和壁又復(fù)原。【詳解】根據(jù)表格分析，該植物在濃度為1.15mol/L的溶液濃度中不分離，而在濃度為1.2mol/L的溶液中剛好發(fā)生質(zhì)壁分離，而細(xì)胞液濃度范圍等于未發(fā)生質(zhì)壁分離和剛剛發(fā)生質(zhì)壁分離的外界溶液的濃度范圍，說明該植物的細(xì)胞液濃度為1.15~1.2mol/L。該植物若適合在本地生長，說明其細(xì)胞能夠從土壤中吸收水分，則外界溶液濃度低于細(xì)胞液濃度，即本地土壤溶液濃度小于1.2mol/L。故選C。2、B【解析】

1、大量出汗時，血液主要丟失水分和一部分無機鹽；通常采用喝水和補充無機鹽的方法，來補充血液中丟失的這些成分；嚴(yán)重腹瀉時，人體主要丟失水分，以及一部分無機鹽和葡萄糖等一樣物質(zhì)；通常采用喝水、適量補充無機鹽以及靜脈滴注（或口服）葡萄糖溶液等方法來補充血液中丟失的這些成分。2、人工合成的對植物的生長發(fā)育有調(diào)節(jié)作用的化學(xué)物質(zhì)稱為植物生長調(diào)節(jié)劑，植物生長調(diào)節(jié)劑具有容易合成原料廣泛，效果穩(wěn)定等優(yōu)點。植物體內(nèi)具有生長素效應(yīng)的物質(zhì)，除IAA外，還有苯乙酸、吲哚丁酸等。【詳解】①嚴(yán)重腹瀉后，機體會丟失鹽分，若只補充水分，不能維持細(xì)胞外液正常的滲透壓，①錯誤；②刺激支配肌肉的神經(jīng)，引起該肌肉收縮的過程未經(jīng)過完整的反射弧，不屬于非條件反射，②錯誤；③垂體功能受損的幼犬，體內(nèi)會缺乏促甲狀腺激素，導(dǎo)致甲狀腺激素分泌減少，使得代謝減弱，故會出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象，③正確；④突觸后膜上的受體與相應(yīng)神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合后，不一定就會引起突觸后膜的電位變化為外負(fù)內(nèi)正，這由神經(jīng)遞質(zhì)的種類決定，④錯誤；⑤興奮在體內(nèi)沿著反射弧單向傳遞，故在草原上快速奔跑的狼體內(nèi)，興奮以局部電流的形式在神經(jīng)纖維上單向傳導(dǎo)，⑤錯誤；⑥抗生素不是人體免疫系統(tǒng)的產(chǎn)物，故抗生素消滅病菌的過程不能體現(xiàn)人體的免疫防衛(wèi)功能，⑥錯誤；⑦記憶細(xì)胞受到同種抗原再次刺激后，能迅速增殖分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生大量的抗體，故細(xì)胞周期變短，⑦正確；⑧2、4-D屬于人工合成的生長調(diào)節(jié)劑，苯乙酸是植物合成的有生長素效應(yīng)的物質(zhì)，⑧錯誤。故選B。3、B【解析】

多糖有纖維素、淀粉和糖原，纖維素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的主要成分，淀粉是植物細(xì)胞的儲能物質(zhì)，糖原是動物細(xì)胞的儲能物質(zhì)。核酸包括DNA和RNA，細(xì)胞生物既含有DNA又含有RNA。生物膜系統(tǒng)由細(xì)胞膜、細(xì)胞器膜和核膜構(gòu)成?！驹斀狻緼、糖原是動物細(xì)胞內(nèi)的多糖，植物細(xì)胞內(nèi)的多糖是淀粉和纖維素，A錯誤；B、硝化細(xì)菌為原核生物，細(xì)胞中含有DNA和RNA兩種核酸，B正確；C、核糖體沒有膜，不構(gòu)成生物膜系統(tǒng)，C錯誤；D、真菌一般屬于分解者，寄生的真菌屬于消費者；動物不都是消費者，部分動物屬于分解者，如某些原生動物和蚯蚓、白蟻等，D錯誤。故選B。4、A【解析】

酶是由紅細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化作用的有機物，大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)，少數(shù)每是RNA；酶的催化作用具有高效性、專一性，據(jù)此答題。【詳解】根據(jù)題干信息和表格信息分析，纖維素分子水解成葡萄糖需三類酶協(xié)同催化，三種酶（葡聚糖內(nèi)切酶、葡聚糖外切酶、β-葡萄糖苷酶）都作用于β-1，4糖苷鍵，但是作用的部位不同，即三種酶作用于不同部位的β-1，4糖苷鍵，說明酶的催化作用具有專一性。故選A。5、C【解析】

酶可以有效降低化學(xué)反應(yīng)所需的活化能，以保證細(xì)胞內(nèi)的反應(yīng)在常溫、常壓下高效地進(jìn)行，酶降低的活化能（E4）=沒有酶催化時化學(xué)反應(yīng)所需的能量（E1）-有酶催化時化學(xué)反應(yīng)所需的能量（E2）。曲線I是沒有酶催化條件下的能量變化，曲線II是有酶催化條件下的能量變化?！驹斀狻緼、反應(yīng)產(chǎn)物的能量值比反應(yīng)物的高，因此該反應(yīng)為吸能反應(yīng)，A正確；B、曲線I是沒有酶催化條件下的能量變化，B正確；C、酶降低的活化能為E4，C錯誤；D、酶降低的活化能E4越大，酶的催化效率越高，D正確。故選C。6、B【解析】

人體內(nèi)環(huán)境包括血漿、組織液、淋巴。內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的實質(zhì)是內(nèi)環(huán)境的成分和理化性質(zhì)處于動態(tài)平衡。若內(nèi)環(huán)境失衡，會導(dǎo)致機體病變。動物體內(nèi)各項生命活動常常同時受神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)，這兩種調(diào)節(jié)協(xié)調(diào)作用，各器官、系統(tǒng)的活動才能協(xié)調(diào)一致，內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)才能得以維持，細(xì)胞的各項生命活動才能正常進(jìn)行，機體才能適應(yīng)環(huán)境的不斷變化。【詳解】A、長跑后肌肉酸痛是因為運動時產(chǎn)生的酸性物質(zhì)——乳酸積累所致，A正確；B、細(xì)胞代謝的主要場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，不是內(nèi)環(huán)境，內(nèi)環(huán)境是細(xì)胞與外界環(huán)境物質(zhì)交換的媒介，B錯誤；C、甲型流感病毒入侵會引起發(fā)熱、腹瀉等內(nèi)環(huán)境紊亂的癥狀，C正確；D、內(nèi)環(huán)境的變化會引起機體自動地調(diào)節(jié)器官和系統(tǒng)的活動，共同維持內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定，D正確。

故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、四種核糖核苷酸RNA復(fù)制酶編碼區(qū)胞吞起始密碼子和終止密碼子5′→3′T細(xì)胞記憶細(xì)胞等細(xì)胞核RNA酶【解析】

據(jù)圖分析可知：自擴增mRNA包括翻譯區(qū)和非翻譯區(qū)兩大區(qū)域，其中翻譯區(qū)又分為病毒RNA復(fù)制酶編碼區(qū)和病毒抗原蛋白編碼區(qū)，經(jīng)脂質(zhì)體包裝后，自擴增mRNA可侵入或者通過肌肉注射的方式進(jìn)入樹突細(xì)胞，經(jīng)過一系列過程后合成抗原肽。【詳解】（1）構(gòu)成mRNA的基本單位是（4種）核糖核苷酸；據(jù)圖分析可知，自擴增mRNA含有RNA復(fù)制酶編碼區(qū)，故其能自我擴增；據(jù)圖可知，包裹自擴增mRNA的脂質(zhì)體是以胞吞的方式進(jìn)入樹突細(xì)胞的。（2）④、⑥為翻譯過程，能讓翻譯過程進(jìn)行及結(jié)束是因自擴增mRNA兩個編碼區(qū)中都含有起始密碼子和終止密碼子；據(jù)核糖體上多肽鏈的長度可知，核糖體在mRNA上的移動方向是5′→3′。（3）因病毒為胞內(nèi)寄生物，故會引發(fā)機體的細(xì)胞免疫反應(yīng)，具體過程為：抗原肽被呈遞到樹突細(xì)胞膜表面后，與T細(xì)胞接觸并使其活化，最終引起人體產(chǎn)生特異性免疫（細(xì)胞免疫），同時獲得記憶細(xì)胞，具備對病毒的記憶和免疫力。（4）結(jié)合題圖及題干信息可知，mRNA不需要進(jìn)入細(xì)胞核，無整合到宿主細(xì)胞染色體基因組中的風(fēng)險，且易被RNA酶水解，不會遺傳給子細(xì)胞，故mRNA疫苗的安全性比DNA疫苗更有優(yōu)勢?！军c睛】解答此題需充分把握題干信息，如多肽鏈的長度、脂質(zhì)體包裹后進(jìn)入細(xì)胞的方式、mRNA不進(jìn)入細(xì)胞核等，結(jié)合特異性免疫的過程分析作答。8、（生物）群落非生物的物質(zhì)和能量有機物①④⑩2500分解者（A）和下一營養(yǎng)級（C和D）間接次生【解析】

結(jié)合碳循環(huán)的過程進(jìn)行分析A是分解者，BCD是三種生物形成的一個食物網(wǎng)，①④⑩生產(chǎn)者，分解者和消費者的呼吸作用，②是生產(chǎn)者的光合作用?！驹斀狻浚?）圖中五種生物包括生產(chǎn)者、分解者和消費者，所以構(gòu)成生物群落；沒有標(biāo)示出的成分是非生物的物質(zhì)和能量。（2）A～D屬于生物群落的成分，碳在生物群落內(nèi)部流動以有機物的形式；還原氫與氧氣結(jié)合發(fā)生在有氧呼吸過程中，是圖中的①④⑩階段。（3）為D提供營養(yǎng)的有兩條食物鏈，生產(chǎn)者→B→C→D，生產(chǎn)者→B→D，所以至少需要的能量按照最短的食物鏈，最高的傳遞效率（20%）進(jìn)行計算，所以需要第一營養(yǎng)級提供的能量是100÷20%÷20%=2500KJ；B用于生長、發(fā)育和繁殖的能量流動去向是分解者（A）和下一營養(yǎng)級（C和D）。（4）大火給當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的影響，說明生物多樣性有間接價值。在火災(zāi)后發(fā)生的演替的次生演替?！军c睛】本題需要考生根據(jù)碳循環(huán)的過程分析出圖中各字母所代表的成分，掌握能量流動的過程和相關(guān)的計算。9、消費者通過呼吸作用（以熱能形式）散失許多食物鏈彼此相互交錯連接成的復(fù)雜營養(yǎng)結(jié)構(gòu)該稻蟹生態(tài)系統(tǒng)營養(yǎng)結(jié)構(gòu)簡單，抵抗力穩(wěn)定性低稻蟹生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)以產(chǎn)品形式不斷輸出【解析】

生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)：生態(tài)系統(tǒng)的組成成分、食物鏈和食物網(wǎng)；其中生態(tài)系統(tǒng)的組成成分有非生物的物質(zhì)和能量、生產(chǎn)者、消費者和分解者。【詳解】（1）河蟹屬于生態(tài)系統(tǒng)的消費者，利用現(xiàn)成的有機物維持生命活動；流經(jīng)某一營養(yǎng)級的同化量一部分通過呼吸作用（以熱能形式）散失，其余用于自身的生長、發(fā)育和繁殖等生命活動。（2）食物網(wǎng)是許多食物鏈彼此相互交錯連接成的復(fù)雜營養(yǎng)結(jié)構(gòu)；與自然生態(tài)系統(tǒng)相比，稻蟹生態(tài)系統(tǒng)在遭受害蟲侵襲后更易崩潰的原因是該生態(tài)系統(tǒng)營養(yǎng)結(jié)構(gòu)簡單，抵抗力穩(wěn)定性低。（3）由于稻蟹生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)以產(chǎn)品形式不斷輸出，因此，該生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)要持續(xù)依賴于系統(tǒng)外的供應(yīng)?！军c睛】本題考查生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能的相關(guān)知識，旨在考查考生的理解能力和綜合運用能力。10、XbaI和SacI防止目的基因自身環(huán)化、防止目的基因反向連接PCR2使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補DNA鏈上RNA聚合酶復(fù)制原點重組DNA的鑒別與選擇蛋白質(zhì)工程【解析】

1、基因工程的操作步驟包括：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。其中基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建：①過程：一般用同一種限制酶切割目的基因和運載體，再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子。②目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用。③基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因。（1）啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；（3）標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。2、PCR擴增技術(shù)：PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：（1）模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備。（2）模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合。（3）引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈?！驹斀狻浚?）識圖分析可知，構(gòu)建基因表達(dá)載體時，目的基因需要插入到啟動子和終止子之間，圖中啟動子和終止子之間存在XbaI和SacI的酶切位點，因此需要用XbaI和SacI限制酶切割目的基因，以產(chǎn)生與質(zhì)粒相同的末端，相比用同一種酶進(jìn)行酶切，用兩種酶切割可以防止目的基因自身環(huán)化或防止目的基因反向連接。（2）為獲取大量的蜘蛛絲基因，常采用PCR擴增技術(shù)擴增目的基因。利用PCR技術(shù)擴增蜘蛛絲基因前，需根據(jù)目的基因的核苷酸序列設(shè)計2種引物分別與2條模板鏈結(jié)合；進(jìn)行PCR時需加熱至90~95℃然后冷卻至55~60℃，此操作的目的是使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補DNA鏈上。（3）基因表達(dá)載體中的啟動子能夠與RNA聚合酶識別和結(jié)合，才能驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程，