DB2310-T 121-2024 食用菌種質資源維護管理技術規(guī)程

65.020.20CCS

B

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—2024食用菌種質資源維護管理技術規(guī)程牡丹江市市場監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB

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121—2024 本文件按照GB/T

—《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由黑龍江省農(nóng)業(yè)科學院牡丹江分院和黑龍江華騰生物科技有限公司提出。學、東北農(nóng)業(yè)大學。本文件主要起草人：王延鋒、盛春鴿、張秀豐、時新瑞、王金賀、史磊、劉姿彤、張鵬、于海洋、趙靜、王菲、閆水華、王遠杭、陳文東、張勇、時新瑞、傅迎軍。DB

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121—20241

范圍2

規(guī)范性引用文件文件。GB/T

12728

食用菌術語NY/T

食用菌菌種生產(chǎn)技術規(guī)程NY/T

1742

食用菌菌種通用技術要求3

術語和定義3.13.23.33.4

下列術語和定義適用于本文件。組織分離組織分離是一種用子實體的某一部分來分離菌種的方法。菌種活力菌種活力包括萌發(fā)能力、定植能力和吃料能力。待檢菌種指由委托方提供的需要檢測的菌種。標準菌種種（一級菌種）、標準原種（二級菌種）和標準栽培種（三級菌種）。3.5菌種退化DB

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121—2024菌種在生長和栽培過程中，由于自發(fā)突變導致優(yōu)良性狀下降的現(xiàn)象。3.6菌種提純使菌種得到進一步純化，并保持菌種優(yōu)良性狀的技術措施。3.7菌種復壯提高菌種活力的技術措施。3.8雜菌污染菌種受到細菌、放線菌或其他真菌污染的現(xiàn)象。3.9病毒侵染菌絲體因病毒感染而導致代謝生長不正常的現(xiàn)象。3.10種質資源

種、品系、特殊遺傳材料等。3.11育種中間材料育種過程中產(chǎn)生的單孢菌株、原生質體單核化菌株、雜交菌株、誘變菌株等。4

菌種質量評價4.1

培養(yǎng)基制備根據(jù)母種特性，按NY/T

的要求，配制相應的母種培養(yǎng)基。4.2

接種及培養(yǎng)取適宜大小的待檢母種菌絲塊，接種到平板培養(yǎng)基中央部位，每個菌株3次以上重復。于恒溫培養(yǎng)箱中適溫培養(yǎng)7

d～

d。4.3

菌種定性評價觀察接種塊長出的菌落形態(tài)及菌絲體長勢，并按下列方法進行菌種質量評價：DB

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121—2024a) 優(yōu)質母種：菌落呈規(guī)則圓形、菌絲粗壯、長勢良好，符合本品種母種應有的特征，可用于生產(chǎn)；b) 老化、退化母種：部分菌落菌絲生長不規(guī)則或分泌色素較多，可用于提純復壯；c) 淘汰母種：具備下列特征之一的均應淘汰：——接種塊菌絲體停止生長或死亡；反應；——菌絲生長緩慢、散發(fā)出難聞的酸臭氣味。4.4

菌種活力評價4.4.1

菌絲萌發(fā)能力發(fā)出新菌絲的能力。4.4.2

菌絲生長速度將活化好的菌種接種到適宜培養(yǎng)基上。3

次重復。最適溫度下培養(yǎng)至直徑為

cm～1.5

cm后，每隔24

h測量菌落大小，連測3

d～5

d，計算菌絲平均生長速度。4.5

菌種純度評價4.5.1

肉眼觀察在適宜光線條件下，肉眼觀察裝有菌種的容器中是否混有細菌、霉菌、螨蟲、線蟲等其它生物。4.5.2

顯微檢測1040倍物鏡觀察50野，檢查是否有其它生物。4.6

生物學特性檢驗4.6.1

溫度將待檢菌種與標準菌種接種到平板培養(yǎng)基上，在

℃～37

℃每隔3

1梯度進行培養(yǎng)，測量生長速度。4.6.2

pH將待檢菌種接種到不同酸堿度的平板培養(yǎng)基上，置于適宜的溫度下培養(yǎng)。在

4～11范圍內每隔1個pH設1梯度進行培養(yǎng)，測量菌絲生長速度，獲得菌絲生長范圍和最適pH。4.7

農(nóng)藝性狀檢測4.7.1

菌種萌發(fā)定植能力檢測將待檢菌種轉接到母種、原種和栽培種培養(yǎng)基

(料)中，適宜溫度培養(yǎng)，肉眼觀察菌絲的萌發(fā)定植情況。4.7.2

產(chǎn)量和生物學效率DB

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121—2024檢菌種和標準菌種的差異。4.7.3

子實體形態(tài)觀察栽培過程中，觀察記錄子實體形態(tài)。4.7.4

結菇轉潮能力栽培過程中，記錄出菇時間、采收時間和轉潮時間。5

菌種提純復壯方法5.1

子實體組織分離法備一級菌種用。5.2

菌絲尖端分離法

5

中培養(yǎng)，供制備一級菌種。6

菌種保藏6.1

保藏形式以純培養(yǎng)的菌絲體為保藏形式，即以母種形式保藏，母種制備應符合NY/T

和NY/T

1742規(guī)定的要求。6.2

保藏方法6.2.1

短期保藏2

4

13

℃～16

2～66.2.2

中期保藏6.2.2.1

天然培養(yǎng)基保藏法為2

4

℃，一般可保藏1～2年。6.2.2.2

礦物油保藏法礦物油保藏法是用礦物油覆蓋斜面培養(yǎng)物，降低細胞的生長代謝活動的保藏方法。保藏溫度為15

25

℃，一般可保藏3～5年。DB

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121—20246.2.2.3

無菌水保藏法為2

4

℃，一般可保藏1～2年。6.2.3

長期保藏液氮保藏法是將菌種在液氮罐中長期保存的保藏方法。保藏溫度為-196

℃，一般可保藏5～年。7

菌種管理7.1

管理制度7.1.1

專人負責制由專人負責種質資源管理工作，包括種質保存、信息記錄、資料整理歸檔、檔案審查等。7.1.2

信息管理檔案。7.1.3

檔案資料所有檔案資料應同時保存紙質文檔和電子文檔，紙質文檔內容應清晰明確，電子文檔應有備份。7.2

建立保種目錄在電腦中創(chuàng)建命名為“食用菌種質資源保種目錄”的Excel文件，用表格記錄保藏菌株的各項背景信息，并定期備份。具體信息包括：a) 4位阿拉伯數(shù)字表示保藏菌株序號；b) 原編號：在保種目錄中記錄菌株提供方提供的原始菌名菌號；c) 來源：記錄菌株提供方的單位名稱或個人姓名及其所在地。若提供方能提供該菌株的來源地或獲得方式，在本目錄中作為二級來源記錄在括號內；d) 短期庫編碼：各菌株在短期庫中都有一個編碼，由51、2個數(shù)字表明冷藏柜的編號；第3個數(shù)字表示柜內有機玻璃保種架編號；第4個數(shù)字表示架上從左到右第幾列；第5個數(shù)字表示列中從前到后第幾行；e) 中期庫編碼：與短期庫編碼意義相同；f) 長期庫編碼：個數(shù)字組成，標明凍藏的時間和保藏位置。第（1～4）個數(shù)字表明凍藏的年5～67～89～字表示液氮罐編號；第個數(shù)字表示罐內保種組號，每個液氮罐有6個缺口，可保藏6組保藏杯；第12個數(shù)字表示組內保藏杯編號，每組保藏10個保藏杯；第13個數(shù)字表示保藏杯中凍藏管編號。7.3

庫藏更新短期、中期與長期保藏庫保藏的菌株，應在期限內及時更新。7.3.1

短期庫更新DB

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