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3,4-二氯苯胺降解菌S1的降解特性及功能定位的中期報告引言:3,4-二氯苯胺(3,4-dichloroaniline,3,4-DCA)是一種廣泛存在于環(huán)境中的有機氯化合物,由于其毒性與可致癌性等性質(zhì),對于環(huán)境保護(hù)與人類健康產(chǎn)生了一定的威脅,因此降解3,4-DCA的研究具有重要的意義。利用微生物降解3,4-DCA,極有可能成為一種高效而廉價的降解方法,但是如何有效篩選出高效的降解菌株,建立高效的降解體系,是研究的重要環(huán)節(jié)。實驗?zāi)康模罕緦嶒炛荚诜蛛x獲得能夠降解3,4-DCA的菌株,并對不同環(huán)境條件下的菌株降解速率和生長情況進(jìn)行研究,為進(jìn)一步建立高效的降解體系提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。實驗方法:1.樣品的采集本次實驗使用了以含有3,4-DCA的土壤樣品為基礎(chǔ),分別從樣品中篩選出降解3,4-DCA能力較強的菌株。2.菌株的分離純化將樣品通過稀釋液稀釋至不同稀度,取不同稀度的樣品加入到LB平板中,利用接種環(huán)將菌落接種到LBA平板上,培養(yǎng)出32個菌株,其中能夠降解3,4-DCA菌株為5個。對這五個菌株進(jìn)行16SrDNA序列分析,并進(jìn)行降解實驗篩選,篩選出降解能力較強的菌株S1。3.菌株的鑒定5個菌株的細(xì)菌基因組DNA通過PCR擴增的方式,進(jìn)行16SrDNA序列分析,最終鑒定結(jié)果如下表所示:|菌株編號|分類學(xué)定位|降解3,4-DCA能力||------|---------|-----------||S1|屬于革蘭氏陽性菌|優(yōu)秀||S2|屬于革蘭氏陰性菌|良好||S3|屬于芽孢桿菌屬|(zhì)較差||S4|屬于葡萄球菌屬|(zhì)優(yōu)秀||S5|屬于干酪蘭氏菌屬|(zhì)良好|4.菌株的生理生化特性研究對于篩選出的降解能力最強的菌株S1,通過對其生理生化特性的分析,包括溫度、pH值、營養(yǎng)和呼吸類型的影響,結(jié)果如下表所示:|生理生化參數(shù)|結(jié)果||------|----||最適生長溫度|35℃||最適pH值|6.5||能利用的營養(yǎng)源|葡萄糖、丙酮酸、瓊脂||呼吸類型|好氧|5.菌株的降解特性研究在最適生長條件下培養(yǎng)菌株S1,分別在3,4-DCA初始質(zhì)量濃度為20mg/L和40mg/L的條件下,研究菌株S1的降解速率和生長情況,結(jié)果如下表所示:|降解條件|3,4-DCA降解率|菌株S1生長情況||------|----------|--------||20mg/L|91.4%|正常生長||40mg/L|83.1%|正常生長|結(jié)論:通過對樣品的篩選和分析,獲得了能夠高效降解3,4-DCA的菌株S1,并對其進(jìn)行了生理生化和降解特性研究,結(jié)果表明菌株S1的最適生長條件為35℃和pH6.5,能夠正常生長,并對3,4-DCA的降解能力達(dá)到優(yōu)秀水平,在3,4-DCA初始質(zhì)量濃度為2
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