人教版高中生物選修一專題五《DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)》知識點歸納55_第1頁
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專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一果酒和果醋的制作1、發(fā)酵:通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過程。2、有氧發(fā)酵:醋酸發(fā)酵谷氨酸發(fā)酵·無氧發(fā)酵:酒精發(fā)酵乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式:出芽生殖(主要);分裂生殖;孢子生殖.4、在有氧條件下,酵母菌進行有氧呼吸,大量繁殖。C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O5、在無氧條件下,酵母菌能進行酒精發(fā)酵。C6H12O6→2C2H5OH+2CO26、20℃左右最適宜酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、醋酸菌是單細胞細菌(原核生物),代謝類型是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為二分裂。9、當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷?C2H5OH+4O2→CH3COOH+6H2O10、控制發(fā)酵條件的作用①醋酸菌對氧氣的含量特別敏感,當(dāng)進行深層發(fā)酵時,即使只是短時間中斷通入氧氣,也會引起醋酸菌死亡。②醋酸菌最適生長溫度為30~35℃,控制好發(fā)酵溫度,使發(fā)酵時間縮短,又減少雜菌污染的機會。③有兩條途徑生成醋酸:直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、實驗流程:挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒(→醋酸發(fā)酵→果醋)12、酒精檢驗:果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生,可以用重鉻酸鉀來檢驗。在酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2mL,再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2SO43滴,振蕩混勻,最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴,振蕩試管,觀察顏色13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用的;排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的;出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。開口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用該裝置制酒時,應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時,應(yīng)該充氣口連接氣泵,輸入氧氣。疑難解答(1)你認為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會。(2)你認為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?如:要先沖洗葡萄,再除去枝梗;榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈,并進行酒精消毒;每次排氣時只需擰松瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋等。(3)制葡萄酒時,為什么要將溫度控制在18~25℃?制葡萄醋時,為什么要將溫度控制在30~35℃?溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20℃左右最適合酵母菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為30~35℃,因此要將溫度控制在30~35℃。課題二腐乳的制作1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。營腐生生活。2、原理:毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、實驗流程:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制4、釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。前期發(fā)酵的主要作用:1.創(chuàng)造條件讓毛霉生長。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。通過各種輔料與酶的緩解作用,生成腐乳的香氣。5、將豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70%左右,水分過多則腐乳不易成形。*水分測定方法如下:精確稱取經(jīng)研缽研磨成糊狀的樣品5~10g(精確到0.02mg),置于已知重量的蒸發(fā)皿中,均勻攤平后,在100~105℃電熱干燥箱內(nèi)干燥4h,取出后置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫后稱重,然后再烘30min,直至所稱重量不變?yōu)橹?。樣品水分含量?)計算公式如下:(烘干前容器和樣品質(zhì)量-烘干后容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量·毛霉的生長:條件:將豆腐塊平放在籠屜內(nèi),將籠屜中的控制在15~18℃,并保持一定的溫度。來源:1.來自空氣中的毛霉孢子,2.直接接種優(yōu)良毛霉菌種 時間:5天·加鹽腌制:將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中,同時逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時間約為8天左右。·用鹽腌制時,注意控制鹽的用量:鹽的濃度過低,不足以抑制微生物的生長,可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì);鹽的濃度過高會影響腐乳的口味·食鹽的作用:1.抑制微生物的生長,避免腐敗變質(zhì)2.析出水分,是豆腐變硬,在后期制作過程中不易酥爛3.調(diào)味作用,給腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶?!づ渲汽u湯:鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。·酒的作用:1.防止雜菌污染以防腐2.與有機酸結(jié)合形成酯,賦予腐乳風(fēng)味3.酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時間的長短有很大關(guān)系,酒精含量越高,對蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質(zhì)的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊?!は阈亮系淖饔茫?.調(diào)味作用2.殺菌防腐作用3.參與并促進發(fā)酵過程·防止雜菌污染:①用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈后要用沸水消毒。②裝瓶時,操作要迅速小心。整齊地擺放好豆腐、加入鹵湯后,要用膠條將瓶口密封。封瓶時,最好將瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染。疑難解答(1)利用所學(xué)的生物學(xué)知識,解釋豆腐長白毛是怎么一回事?豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。(2)為什么要撒許多鹽,將長毛的豆腐腌起來?鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。(3)我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳,不易成形。(4)吃腐乳時,你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對人體有害嗎?它的作用是什么?“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),對人體無害。它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形。課題三制作泡菜·制作泡菜所用微生物是乳酸菌,其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型。在無氧條件下,降糖分解為乳酸。分裂方式是二分裂。反應(yīng)式為:C6H12O62C3H6O3+能量含抗生素牛奶不能生產(chǎn)酸奶的原因是抗生素殺死乳酸菌。常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶?!喯跛猁}為白色粉末,易溶于水,在食品生產(chǎn)中用作食品添加劑?!ど攀持械膩喯跛猁}一般不會危害人體健康,國家規(guī)定肉制品中不超過30mg/kg,醬腌菜中不超過20mg/kg,嬰兒奶粉中不超過2mg/kg。亞硝酸鹽被吸收后隨尿液排出體外,但在適宜pH、溫度和一定微生物作用下形成致癌物質(zhì)亞硝胺。亞硝酸鹽含量發(fā)酵時間(d)·亞硝酸鹽含量發(fā)酵時間(d)*測定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料,與已知濃度的標準顯色液目測比較,估算泡菜中亞硝酸鹽含量。專題五DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題一DNA的粗提取與鑒定一、提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?1.DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。①DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點?要使DNA溶解,需要使用什么濃度?要使DNA析出,又需要使用什么濃度?在0.14mol/L時溶解度最小;較高濃度可使DNA溶解;0.14mol/L可使DNA析出。②在溶解細胞中的DNA時,人們通常選用2mol/LNaCl溶液;將DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中緩慢注入蒸餾水,以稀釋NaCl溶液。酒精是一種常用有機溶劑,但DNA卻不能溶于酒精(特別是95%冷卻酒精),但細胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精。2.從理論上分析,預(yù)冷的乙醇溶液具有以下優(yōu)點。一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;二是降低分子運動,易于形成沉淀析出;三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂。3.采用DNA不溶于酒精的原理,可以達到什么目的?將DNA和蛋白質(zhì)進一步分離。 4.提取DNA還可以利用DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時,應(yīng)選用怎樣的酶和怎樣的溫度值?蛋白酶,因為酶具有專一性,蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會對DNA產(chǎn)生影響。溫度值為60~80℃,因為該溫度值蛋白質(zhì)變性沉淀,而DNA不會變性。補充:DNA的變性是指DNA分子在高溫下解螺旋,其溫度在80℃以上,如在PCR技術(shù)中DNA變性溫度在95℃。5.洗滌劑在提取DNA中有何作用?洗滌劑將細胞膜上的蛋白質(zhì),從而瓦解細胞膜。6.當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是DNA時,需要使用什么指示劑進行鑒定?在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍色。 原理總結(jié):通過利用不同濃度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以從細胞中提取和提純DNA;再利用酒精進一步將DNA與蛋白質(zhì)分離開來,達到提純的目的;最后利用二苯胺試劑鑒定提取的物質(zhì)是否是DNA。二、實驗材料的選取不同生物的組織中DNA含量不同。在選取材料時,應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。本實驗用雞血細胞做實驗材料有兩個原因。一是因為雞血細胞核的DNA含量豐富,材料易得;二是雞血細胞極易吸水脹破,而用動物肝臟細胞作實驗材料常常需要勻漿和離心,對設(shè)備要求較高,操作繁瑣,歷時較長。雞血細胞破碎以后釋放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,所以在提取過程中為了減少DNA的損失,最好使用塑料的燒杯和試管盛放雞血細胞液。三、破碎細胞,獲取含DNA的濾液1、若選用雞血和洋蔥作實驗材料,則怎樣獲取含DNA的濾液?在雞血細胞液中加入一定量蒸餾水并用玻棒攪拌,過濾后收集濾液;切碎洋蔥,加入一定量洗滌劑和食鹽,攪拌研磨,過濾后收集濾液。2.為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂?答:蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進入血細胞內(nèi),使血細胞脹裂,再加上攪拌的機械作用,就加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA。3.在以上實驗中,加入蒸餾水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?過濾時應(yīng)當(dāng)選用(濾紙、尼龍布)。血細胞在蒸餾水中大量吸水而張裂;洗滌劑瓦解細胞膜;食鹽溶解DNA物質(zhì);選用尼龍布進行過濾。4.在處理植物組織時需要進行研磨,其目的是什么?研磨不充分產(chǎn)生什么結(jié)果?破碎細胞壁,使核物質(zhì)容易溶解在NaCl溶液中;研磨不充分會使DNA的提取量減少,影響實驗結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。具體做法。10mL雞血+20mL蒸餾水→同方向攪拌→3層尼龍布過濾→濾液三、去除濾液中的雜質(zhì)1.為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠去除雜質(zhì)?用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。最初獲得的DNA濾液含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì),需要進一步提純DNA。方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。方案二與方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離。四、析出與鑒定1.在濾液中仍然含有一些雜質(zhì),怎樣除去這些雜質(zhì)呢?得到的DNA呈何顏色?濾液與等體積的冷卻酒精混合均勻,靜置2~3分鐘,析出的白色絲狀物就是DNA。DNA呈白色。2.怎樣鑒定析出的白色絲狀物就是DNA呢?具體做法。試管2支,編號甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色絲狀物,使之溶解→各加4mL二苯胺,混合均勻→沸水浴5min→觀察顏色變化五、實驗操作制備雞血細胞液…………加檸檬酸鈉,靜置或離心↓破碎細胞,釋放DNA…加蒸餾水,同一方向快速通方向攪拌↓→過濾,除去細胞壁、細胞膜等。溶解核內(nèi)DNA…………加入NaCl至2mol/L,同一方向緩慢攪拌↓DNA析出………………加蒸餾水至0.14mol/L,過濾,在溶解到2mol/L溶液中↓→除去細胞質(zhì)中的大部分物質(zhì)。DNA初步純化…………與等體積95%冷卻酒精混合,析出白色絲狀物↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。DNA鑒定………………二苯胺,沸水浴,呈現(xiàn)藍色注意事項:在雞血中加入檸檬酸鈉防止凝固;雞血靜置或離心以提高細胞懸液濃度;使用塑料燒杯;使用尼龍布過濾;玻棒沿同一方向攪拌;玻棒攪拌要緩慢(細胞破裂快速攪拌);玻棒不要碰到燒杯壁;二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。課題二多聚酶鏈式反應(yīng)擴增DNA片段基礎(chǔ)知識PCR技術(shù)擴增DNA的過程,與細胞內(nèi)DNA復(fù)制過程類似:1.細胞內(nèi)DNA復(fù)制條件分析:條件組分作用模板DNA的兩條單鏈提供復(fù)制的模板原料四種脫氧核苷酸合成DNA子鏈的原料酶解旋酶DNA聚合酶打開DNA雙螺旋催化合成DNA子鏈能量ATP為解螺旋和合成子鏈供能引物RNA為DNA聚合酶提供合成的3’端起點2.細胞內(nèi)DNA復(fù)制過程的解析:解旋:解旋酶、ATP,DNA兩條鏈打開,形成兩條DNA單鏈。引物結(jié)合:在DNA單鏈3’端與DNA反向配對結(jié)合。DNA聚合酶結(jié)合:DNA聚合酶與模板鏈結(jié)合,標志著單鏈合成開始。子鏈合成:DNA聚合酶從引物3’端開始,將配對的脫氧核苷酸連接起來。后續(xù)加工:DNA聚合酶I將引物切去,并合成空缺處的DNA單鏈,再由DNA連接酶將不連續(xù)的DNA子鏈連接起來(半不連續(xù)合成。先導(dǎo)鏈,滯后鏈)3.DNA分子復(fù)制的人工控制實驗操作步驟照PCR反應(yīng)體系配方配制反應(yīng)液;②將PCR反應(yīng)體系50μL用微量移液器轉(zhuǎn)移到微量離心管(0.5mL)中;③將微量離心管放到PCR儀中;④設(shè)置PCR儀的工作參數(shù)。⑤DNA在PCR儀中大量擴增。4.實驗注意事項(1)避免外源DNA污染:所用儀器、緩沖液、蒸餾水等使用前高壓滅菌。(2)緩沖液和酶分裝成小份,-20℃低溫保存。(3)每添加一種反應(yīng)成分,更換一個移液器的槍頭。(4)混勻后離心處理,使反應(yīng)液集中在離心管底部??偨Y(jié)、點評多聚酶鏈式反應(yīng)擴增DNA片段多聚酶鏈式反應(yīng)擴增DNA片段PCR原理DNA的復(fù)制需要酶、原料、能量、引物DNA的變性和復(fù)性受溫度影響PCR過程變性復(fù)性延伸操作步驟配制PCR反應(yīng)體系移入離心管放入PCR設(shè)置工作參數(shù)DNA擴增測定含量稀釋調(diào)零測定并讀數(shù)計算課題三血紅蛋白的提取和分離一、實驗原理蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別,由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。1.凝膠色譜法(分配色譜法):(1)原理:分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動快;分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動慢。(2)凝膠材料:多孔性,多糖類化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。(3)分離過程:混合物上柱→洗脫→大分子流動快、小分子流動慢→收集大分子→收集小分子洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。(4)作用:分離蛋白質(zhì),測定生物大分子分子量,蛋白質(zhì)的脫鹽等。2.緩沖溶液(1)原理:由弱酸和相應(yīng)的強堿弱酸鹽組成(如H2CO3-NaHCO3,NaH2PO4/Na2HPO4等),調(diào)節(jié)酸和鹽的用量,可配制不同pH的緩沖液。(2)緩沖液作用:抵制外界酸、堿對溶液pH的干擾而保持pH穩(wěn)定。3.凝膠電泳法:(1)原理:不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同,在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同,導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運動方向和運動速度不同。(2)分離方法:瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。(3)分離過程:在一定pH下,使蛋白質(zhì)基團帶上正電或負電;加入帶負電荷多的SDS,形成“蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物”,使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小。二、實驗步驟1.樣品處理紅細胞的洗滌洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白,采集的血樣要及時采用低速短時間離心分離紅細胞,然后用膠頭吸管吸出上層透明的黃色血漿,將下層暗紅色的紅細胞液體倒入燒杯,再加入五倍體積的生理鹽水,緩慢攪拌10min,低速短時間離心,如此重復(fù)洗滌三次,直至上清液中沒有黃色,表明紅細胞已洗滌干凈。②血紅蛋白的釋放在蒸餾水和甲苯作用下,紅細胞破裂釋放出血紅蛋白。注:加入蒸餾水后紅細胞液體積與原血液體積要相同。加入甲苯的目的是溶解細胞膜,有利于血紅蛋白的釋放和分離。2.粗分離①分離血紅蛋白溶液將攪拌好的混合溶液離心后,試管中的溶液分為4層。第一層為無色透明的甲苯層,第2層為白色薄層固體,是脂溶性物質(zhì)的沉淀層,第3層是紅色透明液體,這是血紅蛋白的水溶液,第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過濾,除去之溶性沉淀層,于分液漏斗中靜置片刻后,分出下層的紅色透明液體。②透析取1mL的血紅蛋白溶液裝入透析袋中,將透析袋放入盛有300mL的物質(zhì)的量的濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液中,透析12h。透析可以去除樣品中分子量較小的雜質(zhì),或用于更換樣品的緩沖液。3.純化調(diào)節(jié)緩沖液面:打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝↓膠面平齊,關(guān)閉出口。加入蛋白質(zhì)樣品:用吸管將透析后的樣品沿管壁環(huán)繞移動加到色譜柱的頂端。加樣后,∣打開下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi),等樣品完全滲入凝膠層后,↓關(guān)閉出口。調(diào)節(jié)緩沖液面:加入20mmol/L的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度↓洗脫:連接緩沖液洗脫瓶,打開下端出口,進行洗脫?!占盅b蛋白質(zhì):待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時,用試管收集。4.純度鑒定------SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(選做)三、注意事項電泳技術(shù)電泳技術(shù)就是在電場的作用下,利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大

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