21.3酶促化學(xué)發(fā)光講解

第二十一章

化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)

教學(xué)目標(biāo)1.掌握：化學(xué)發(fā)光、化學(xué)發(fā)光劑的概念及常用的化學(xué)發(fā)光劑；直接化學(xué)發(fā)光免疫分析的基本原理（重難點(diǎn)）；酶促化學(xué)發(fā)光的原理及關(guān)鍵技術(shù)；化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的臨床應(yīng)用（重點(diǎn)）。2.熟悉：電化學(xué)發(fā)光免疫分析的基本原理（重難點(diǎn)）、三類化學(xué)發(fā)光免疫分析的方法學(xué)評(píng)價(jià)。3.了解：發(fā)光的概念及分類、化學(xué)發(fā)光物的制備。知識(shí)目標(biāo)技能目標(biāo)思政-素質(zhì)目標(biāo)掌握化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的操作流程質(zhì)量控制、生物安全意識(shí)、臨床免疫學(xué)思維1.化學(xué)發(fā)光劑的概念及常用的化學(xué)發(fā)光劑。2.化學(xué)發(fā)光免疫分析的基本原理及其技術(shù)類型。3.化學(xué)發(fā)光酶免疫分析基本原理及其分離技術(shù)。4.電化學(xué)發(fā)光免疫分析基本原理。5.化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的臨床應(yīng)用。本章要點(diǎn)一化學(xué)發(fā)光免疫分析二三四化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的臨床應(yīng)用五目錄化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)概述化學(xué)發(fā)光酶免疫分析電化學(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光酶免疫分析（CLEIA）是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶(ALP)來標(biāo)記抗原或抗體，在與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗體(抗原)發(fā)生免疫反應(yīng)后，經(jīng)洗滌將結(jié)合物與游離的酶標(biāo)物分離后，加入底物(發(fā)光劑)，酶催化和分解底物發(fā)光，由光量子閱讀系統(tǒng)接收，光電倍增管將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)并加以放大，再把它們傳送至計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，計(jì)算出測(cè)定物的濃度。第三節(jié)化學(xué)發(fā)光酶免疫分析一、檢測(cè)原理堿性磷酸酶化學(xué)發(fā)光酶免疫分析雙抗體夾心法原理示意圖

1.分配樣品,磁顆粒和試劑2.孵育使反應(yīng)物結(jié)合3.在磁場(chǎng)中清洗去除未結(jié)合物質(zhì)4.加入底物產(chǎn)生信號(hào)5.孵育,促使信號(hào)的產(chǎn)生6.信號(hào)檢測(cè)分析步驟二、方法類型標(biāo)記酶不同HRP標(biāo)記的CLEIAALP標(biāo)記的CLEIA免疫學(xué)反應(yīng)模式雙抗體夾心法雙抗原夾心法固相抗原競(jìng)爭(zhēng)法三、技術(shù)要點(diǎn)抗原抗體結(jié)合反應(yīng)結(jié)合物與游離物的分離