腸桿菌科概述埃希菌屬

關(guān)于腸桿菌科概述埃希菌屬教學(xué)大綱腸道桿菌的共同特征及分類引起腸道感染的大腸埃希菌種類和致病特點大腸埃希菌的微生物學(xué)檢查法大腸埃希菌的衛(wèi)生細菌學(xué)檢查及其意義第2頁,共60頁，2024年2月25日，星期天EnterobacteriaceaeAheterogeneousgroupofG-rodsTheirnaturalhabitatistheintestinaltractofhumansandanimals(entericbacilli)FacultativeanaerobesoraerobesMostarenormalfloraRegularpathogenforhumans:Salmonella,Shigella,someE.coliMorethan30genera,120species第3頁,共60頁，2024年2月25日，星期天Newfindingsingastrointestinalbacteria2006,Nature,JeffreyGordon,directoroftheCenterforGenomeSciencesatWashingtonUniversitySchoolofMedicineinSt.Louis,Missouri,andhisgraduatestudentBuckSamuelMethanobrevibactersmithii(M.smithii)DiscoveryChannel“GutBacteriaDetermineFatorThin”“I’mnotfat,I’mjustgotfatbacteria”第4頁,共60頁，2024年2月25日，星期天返回第5頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸桿菌科細菌的生物學(xué)特征形態(tài)與結(jié)構(gòu)中等大小G-桿菌無芽胞周鞭毛菌毛培養(yǎng)兼性厭氧或需氧營養(yǎng)要求不高菌落混濁生長第6頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸桿菌科細菌的生物學(xué)特征生化反應(yīng)：活潑生化鑒定(biochemicaldifferentiation):發(fā)酵葡萄糖;觸酶陽性;氧化酶陰性;硝酸鹽還原陽性乳糖發(fā)酵致病菌：多不發(fā)酵乳糖非致病菌：多發(fā)酵乳糖第7頁,共60頁，2024年2月25日，星期天O-F試驗氧化型發(fā)酵型產(chǎn)堿型第8頁,共60頁，2024年2月25日，星期天氧化酶試驗

陽性：紫紅色

陰性：無色第9頁,共60頁，2024年2月25日，星期天硝酸鹽還原試驗

陽性：紅色陰性：淡黃色

第10頁,共60頁，2024年2月25日，星期天復(fù)雜的抗原構(gòu)造O（菌體）抗原LipopolysacchrideH（鞭毛）抗原FlagellaK抗原莢膜Vi抗原InSalmonellaTyphi,thecapsularantigeniscalledViantigen第11頁,共60頁，2024年2月25日，星期天抵抗力：不強易變異：多種引起通過接合轉(zhuǎn)導(dǎo)融原性轉(zhuǎn)換耐藥性變異毒力性變異生化反應(yīng)性變異第12頁,共60頁，2024年2月25日，星期天致病物質(zhì)所致疾病臨床意義返回第13頁,共60頁，2024年2月25日，星期天菌毛或菌毛樣結(jié)構(gòu)莢膜或微莢膜外膜蛋白內(nèi)毒素外毒素致病物質(zhì)第14頁,共60頁，2024年2月25日，星期天所致疾病

腸道感染腹瀉、食物中毒、腸熱癥腸道外感染鼠疫（烈性傳染?。?、泌尿道感染、肺炎、腦膜炎、傷口化膿、菌血癥返回第15頁,共60頁，2024年2月25日，星期天鑒定原則

1.科間鑒別（表9-3）2.將腸桿菌科分為三大類（表9-4）3.屬、種、群、型的區(qū)分4.腸桿菌科細菌綜合鑒定流程返回第16頁,共60頁，2024年2月25日，星期天科間鑒定：根據(jù)O/F試驗、氧化酶試驗、菌體形態(tài)和有無鞭毛科內(nèi)鑒定：生化鑒定分為3個組PAD:苯丙氨酸脫氨酶；VP/葡萄糖酸鹽利用試驗PAD陰性、VP陰性PAD陰性、VP陽性PAD陽性、VP陰性屬間鑒定第17頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸桿菌科與其它革蘭陰性桿菌區(qū)別

第18頁,共60頁，2024年2月25日，星期天苯丙氨酸脫氨酶試驗

陽性：綠色陰性：黃色第19頁,共60頁，2024年2月25日，星期天葡萄糖酸鹽試驗

陽性：黃綠色陰性：藍色返回第20頁,共60頁，2024年2月25日，星期天第14章

埃希菌屬

Escherichia第21頁,共60頁，2024年2月25日，星期天案例女，31歲，尿頻、尿痛3天。

3天前開始出現(xiàn)尿頻、尿痛，自覺尿有異味；體檢：全身皮膚粘膜正常，恥骨聯(lián)合上有觸痛；尿常規(guī)檢查：白細胞10-15個/視野，并有多量細菌問題：1.尿標本革蘭染色最可能發(fā)現(xiàn)什么性質(zhì)的細菌？2.這類感染的最常見病原體是什么？3.病原體侵犯尿道的機制是什么？第22頁,共60頁，2024年2月25日，星期天

埃希氏菌屬（Escherichia）是人類和動物腸道中的正常菌群以大腸埃希氏菌（E.coli）最為重要出生后數(shù)小時就進入腸道，并終生伴隨重要的實驗材料和研究對象：在分子生物學(xué)和基因工程實驗中大腸桿菌也是重要的實驗材料和研究對象第23頁,共60頁，2024年2月25日，星期天形態(tài)染色0.4-0.7μm

1-3μm短桿菌革蘭染色陰性有鞭毛有菌毛第24頁,共60頁，2024年2月25日，星期天大腸埃希菌革蘭染色第25頁,共60頁，2024年2月25日，星期天培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)兼性厭氧營養(yǎng)要求不高生化反應(yīng)活潑，發(fā)酵多種糖類絕大多數(shù)發(fā)酵乳糖典型E.coli:

IMViC：++--第26頁,共60頁，2024年2月25日，星期天大腸埃希菌菌落特征（血平板）第27頁,共60頁，2024年2月25日，星期天大腸埃希菌菌落特征（MAC）第28頁,共60頁，2024年2月25日，星期天大腸埃希菌ABC腸道桿菌:A.大腸埃希菌純培養(yǎng)鏡下特征（革蘭染色）B.大腸埃希菌在血瓊脂平板上的菌落特征（18-24h)C.大腸埃希菌在麥康凱瓊脂平板上的菌落特征（18-14h)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)第29頁,共60頁，2024年2月25日，星期天大腸埃希桿菌呈典型粉紅色，乳糖發(fā)酵菌落。福氏痢疾桿菌菌落小，無色透明，非乳糖發(fā)酵菌。（18hr,37℃)在麥康凱培養(yǎng)基上的大腸埃希桿菌和福氏痢疾桿菌第30頁,共60頁，2024年2月25日，星期天大腸埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－）第31頁,共60頁，2024年2月25日，星期天大腸埃希菌IMViC試驗（＋＋－－）

右側(cè)為對照（－－＋＋）

第32頁,共60頁，2024年2月25日，星期天抗原結(jié)構(gòu)O（菌體）抗原：170種以上H（鞭毛）抗原：56種以上K（莢膜）抗原：100種以上O111：K58：H2第33頁,共60頁，2024年2月25日，星期天致病性致病物質(zhì)1、侵襲力K抗原和菌毛與侵襲力有關(guān)。K抗原能抗吞噬，菌毛（又稱定植因子）有粘附作用。2、內(nèi)毒素3、腸毒素由ETEC產(chǎn)生的外毒素，可分為耐熱腸毒素

(ST)和不耐熱腸毒素(LT)兩種。均由質(zhì)粒介導(dǎo)。LT與霍亂腸毒素作用機理相似，可使腸道細胞中cAMP的水平升高，ST可使細胞內(nèi)

cGMP量增多，因而引起腸液大量分泌而導(dǎo)致腹泄。第34頁,共60頁，2024年2月25日，星期天

另外還有Vero毒素，又稱志賀樣毒素，由溶原性噬菌體介導(dǎo)，為EHEC產(chǎn)生。作用使核糖體滅活，終止蛋白質(zhì)合成。腸集聚耐熱毒素為EaggEC產(chǎn)生，可導(dǎo)致大量液體分泌。所致疾?。?、腸道外感染條件致病菌感染，大腸桿菌移位至腸外組織或器官引起腸道外感染，以泌尿系統(tǒng)感染為主，如尿道炎、膀胱炎、敗血癥等。尿路感染每ml尿菌量≥10萬，可診斷。2、腸道感染表現(xiàn)為急性腹瀉，為致病性大腸桿菌感染所致，主要有五種類型：第35頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)：定植因子+LT+ST，引起嬰幼兒和旅游者腹瀉。腸致病性大腸桿菌(EPEC)：粘附素+內(nèi)毒素，是嬰兒腹瀉的主要病原菌。腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)：侵襲力+內(nèi)毒素，多侵犯較大兒童和成人，疾病類似菌痢。腸出血性大腸桿菌(EHEC)：

Vero毒素+菌毛，5歲以下兒童易感，引起血性腹瀉。腸集聚性大腸桿菌(EaggEC)：粘附素+毒素，引起嬰兒持續(xù)性腹瀉。第36頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌（ETEC）致病物質(zhì)腸毒素（LT和ST）菌毛粘附素（adhesin)內(nèi)毒素K抗原所致疾病5歲以下嬰幼兒腹瀉旅游者腹瀉第37頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸致病型大腸埃希菌（EPEC

）致病性破壞刷狀緣不產(chǎn)生腸毒素及其他外毒素?zé)o侵襲力所致疾病嬰幼兒腹瀉，熱帶國家、醫(yī)院常流行水性腹瀉Gutlumen第38頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）致病物質(zhì)不產(chǎn)腸毒素，侵襲結(jié)腸粘膜上皮細胞ShigelloidE.coli:EIEC無動力、生化反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu)似Shigella所致疾病主要侵犯較大兒童和成人腹瀉呈膿血便，有里急后重第39頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸出血型大腸埃希菌（EHEC）vero毒素型大腸埃希菌致病物質(zhì)菌毛：粘附作用毒素：vero毒素所致疾病出血性結(jié)腸炎溶血性尿毒綜合征（HUS）5歲以下兒童易感，病情輕重不一1982年美國發(fā)現(xiàn)，后世界各地均有流行血清型為O157:H7第40頁,共60頁，2024年2月25日，星期天The“l(fā)ifecycle”ofE.coliO157:H75-10%prevalenceinanimals40%prevalenceinfarms第41頁,共60頁，2024年2月25日，星期天E.coliO157:H71982-firstrecognizedasapathogen1985-associatedwithhemolyticuremicsyndrome1990-outbreakfromdrinkingwater1991-outbreakfromapplecider1993-multi-stateoutbreakfromfastfoodhamburgers1995-outbreakfromfreshproduce1996-outbreakinJapan-multi-stateoutbreakfromunpasteurizedapplejuice第42頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸集聚型大腸埃希菌EAggEC致病物質(zhì)毒素粘附素所致疾病引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，脫水，偶有血便第43頁,共60頁，2024年2月25日，星期天第44頁,共60頁，2024年2月25日，星期天（一）檢驗程序

（二）標本采集（三）檢驗方法

（四）耐藥性

（五）結(jié)果分析與報告微生物學(xué)檢驗第45頁,共60頁，2024年2月25日，星期天大腸埃希菌檢驗程序第46頁,共60頁，2024年2月25日，星期天腸外感染：標本分離培養(yǎng)涂片染色鑒定（生化反應(yīng)（IMViC等）腹瀉：糞便鑒別培養(yǎng)基分離培養(yǎng)鑒定檢測腸毒素毒力因子血清型微生物學(xué)檢查法第47頁,共60頁，2024年2月25日，星期天檢驗方法1.顯微鏡檢查2.分離培養(yǎng)3.鑒定ETECEPECEIECEHECEaggEC第48頁,共60頁，2024年2月25日，星期天ST檢測（乳鼠灌胃試驗）第49頁,共60頁，2024年2月25日，星期天LT檢測（CHO細胞培養(yǎng)）第50頁,共60頁，2024年2月25日，星期天O157:H7菌落特征（MAC）第51頁,共60頁，2024年2月25日，星期天O157:H7菌落特征（山梨醇麥康凱瓊脂平板）返回第52頁,共60頁，2024年2月25日，星期天衛(wèi)生細