腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移

關(guān)于腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移

惡性腫瘤為什么會侵襲與轉(zhuǎn)移？過程中有無標(biāo)記？能否預(yù)防？問題解答最終將是從腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機制中尋找。瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的過程是瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞之間相互作用的連續(xù)過程，這個過程是復(fù)雜、多步驟的。第2頁,共92頁，2024年2月25日，星期天瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移步驟：

①

腫瘤細(xì)胞同質(zhì)型粘附降低，從原發(fā)灶脫離；

②

腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）發(fā)生異質(zhì)型粘附增加；

③ECM降解；腫瘤細(xì)胞與ECM中大分子作用，分泌蛋白降解酶類降解ECM成分，形成腫瘤細(xì)胞移動的通道，并以此為誘導(dǎo)血管生成的基礎(chǔ)；④

腫瘤細(xì)胞運動性增強在粘附降解的過程中移動，穿透ECM，并穿透血管壁的基底膜進入循環(huán)；

⑤

在循環(huán)中運行逃避免疫系統(tǒng)識別與破壞；⑥

到達(dá)繼發(fā)部位后，在有新生血管形成的前提下增殖，形成轉(zhuǎn)移灶。第3頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第4頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)瘤細(xì)胞同質(zhì)型粘附下降

同質(zhì)型（homotypic）粘附是指同種細(xì)胞間的粘附，主要由存在于細(xì)胞表面的粘附分子（celladhesionmoleculeCAM）所介導(dǎo)。同質(zhì)型粘附下降，促進腫瘤細(xì)胞從瘤體上脫落，所以CAM在腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移中起重要作用。第5頁,共92頁，2024年2月25日，星期天1、鈣粘蛋白（Cadherin）

鈣粘蛋白是鈣依賴性跨膜糖蛋白，是一組依賴細(xì)胞外Ca2+的CAM，介導(dǎo)Ca2+依賴性細(xì)胞間粘附，通過同類或同分子親和反應(yīng)相結(jié)合。鈣粘蛋白參與建立和維持細(xì)胞間連接，可能是最重要的形成細(xì)胞間聯(lián)系的細(xì)胞粘附因子之一。已克隆了4種鈣粘蛋白，一級結(jié)構(gòu)相似，由723-748個氨基酸組成，每個鈣粘蛋白分子包含一個信號肽，一個含三個重復(fù)結(jié)構(gòu)的細(xì)胞外區(qū)，一個跨膜錨定作用的高疏水區(qū)，還有一個較長的胞內(nèi)尾部。不同組織不同種族之間鈣粘蛋白的同源性為50-60%。第6頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第7頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

根據(jù)基因克隆免疫學(xué)特征及分布組織不同，將鈣粘蛋白家族分為三個亞類:①E-Cad：見于成熟上皮細(xì)胞;②N-Cad：成熟N組織及肌肉組織;③P-Cad:

起初在胎盤及上皮基底層發(fā)現(xiàn)，后來發(fā)現(xiàn)發(fā)育過程中在其它組織也有短暫表達(dá)。

近來又發(fā)現(xiàn)新的亞類，如內(nèi)皮細(xì)胞鈣粘蛋白和橋連粘附蛋白（desmoglein），以及V-Cad,M-Cad,B-Cad，R-Cad,T-Cad等。第8頁,共92頁，2024年2月25日，星期天鈣粘蛋白選擇性地與同種分子親和性結(jié)合，這種粘附反應(yīng)是利用其細(xì)胞外結(jié)構(gòu)中“組-丙-頡”（HAV）序列來識別和介導(dǎo)的，鈣粘蛋白的功能依賴于胞漿內(nèi)結(jié)構(gòu)與細(xì)胞骨架元件之間的作用。但這種作用是間接的與三種胞漿連鎖蛋白（catenin）αβγ結(jié)合，這些分子與鈣粘蛋白一起位于細(xì)胞的粘附小帶(zonuleadherin)上，參與連接的形成與穩(wěn)定。鈣粘蛋白也是重要的形態(tài)分子，E-Cad作用于形成完整的上皮層，P-Cad則在基底層起作用，這些鈣粘蛋白的存在對于保持上皮和內(nèi)皮結(jié)構(gòu)很重要，其表達(dá)改變將導(dǎo)致細(xì)胞-細(xì)胞間正常連接完整性的喪失。第9頁,共92頁，2024年2月25日，星期天目前認(rèn)為與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移關(guān)系最密切的是E-Cad。許多研究證實E-Cad與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，可能由于E-Cad能促進瘤細(xì)胞的同質(zhì)型粘附不易使瘤細(xì)胞從瘤體上脫落。體外試驗表明，有E-Cad表達(dá)的腫瘤細(xì)胞株無浸潤性，而浸潤型表型的腫瘤細(xì)胞株則無E-Cad表達(dá)。E-Cad表達(dá)與腫瘤細(xì)胞分化之間有密切關(guān)系，分化好的細(xì)胞E-Cad正常，分化差的細(xì)胞E-Cad不表達(dá)。編碼E-Cad的基因是腫瘤抑制基因，此基因突變或缺失導(dǎo)致細(xì)胞過度增生，細(xì)胞形態(tài)及分化異常。第10頁,共92頁，2024年2月25日，星期天轉(zhuǎn)染E-CadcDNA可抑制腫瘤細(xì)胞的浸潤轉(zhuǎn)移。Vleminchix等給高浸潤性細(xì)胞株轉(zhuǎn)染E-CadcDNA，使其浸潤性降低，體內(nèi)形成腫瘤后分化亦較未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞好。轉(zhuǎn)染E-Cad反義RNA到E-Cad高表達(dá)的細(xì)胞株中，使E-Cad表達(dá)下調(diào)，并促使浸潤。Navarro等給E-Cad低表達(dá)的高惡性度細(xì)胞轉(zhuǎn)染E-Cad而抑制其成瘤性。Chen等給鼠成纖維細(xì)胞（L細(xì)胞）轉(zhuǎn)染E-CadcDNA，結(jié)果抑制其轉(zhuǎn)移和浸潤。

可能與E-Cad能穩(wěn)定細(xì)胞間連接，促進細(xì)胞分化，促進細(xì)胞間信息傳遞有關(guān)。第11頁,共92頁，2024年2月25日，星期天Biawy報道67%舌鱗癌E-Cad表達(dá)下降。E-Cad（-）者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率遠(yuǎn)高于E-Cad（+）者。以攜帶E-CadmRNA的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染高侵襲性的癌細(xì)胞，可使其侵襲性消失。因此認(rèn)為E-Cad是一種抑制侵襲轉(zhuǎn)移的因子。然而并非所有腫瘤的轉(zhuǎn)移都與E-Cad表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。GunjiN等報道E-Cad表達(dá)與原發(fā)性胰腺癌肝轉(zhuǎn)移不存在顯著關(guān)系。第12頁,共92頁，2024年2月25日，星期天2、瘤細(xì)胞表面電荷增加

瘤細(xì)胞表面電荷增加時瘤細(xì)胞間的排斥力增大，促使瘤細(xì)胞從瘤體上脫落。瘤細(xì)胞表面電荷大小可以通過電泳速度表現(xiàn)出來。細(xì)胞電泳率的大小與轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。所以細(xì)胞電泳速度被認(rèn)為是篩選不同浸潤和轉(zhuǎn)移潛能瘤細(xì)胞的初篩標(biāo)記。此外溶解性酶的釋放，細(xì)胞間隙壓力的增加，也有利于瘤細(xì)胞從瘤體上脫落下來。第13頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)瘤細(xì)胞異質(zhì)型粘附的增加

異質(zhì)型（heterotypic）粘附是指瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞，或宿主基質(zhì)的粘附。瘤細(xì)胞脫離瘤體，浸潤到基底膜或穿過基底膜遭遇宿主基質(zhì)和宿主細(xì)胞，這一過程就是異質(zhì)型粘附的過程。這一過程有利于瘤細(xì)胞穿過基質(zhì)、基底膜的血管壁，有利于瘤細(xì)胞在血管內(nèi)聚積。第14頁,共92頁，2024年2月25日，星期天（一）整合素（Integrin）

是一組介導(dǎo)異質(zhì)粘附的細(xì)胞粘附分子。

整合素：由α/β亞單位通過非共價鍵相連的異二聚體，是一類細(xì)胞表面糖蛋白，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)18種α亞單位和11種β亞單位，可形成20多種整合素。

第15頁,共92頁，2024年2月25日，星期天整合素配體：Ⅰ型、Ⅳ型膠原、LN、FN、Vitronectin、endotoxin、ICAM-1、VCAM-1。整合素與相鄰細(xì)胞上或ECM中相應(yīng)配體相結(jié)合，參與細(xì)胞信號傳導(dǎo)及細(xì)胞骨架改變。在細(xì)胞生長、分化、形成連接和維持極性等方面起重要作用。在腫瘤轉(zhuǎn)移中研究整合素：表達(dá)增加或新增表達(dá)減少或消失表達(dá)構(gòu)型的改變第16頁,共92頁，2024年2月25日，星期天整合素及配體在APC/靶細(xì)胞上的對應(yīng)關(guān)系第17頁,共92頁，2024年2月25日，星期天根據(jù)作用方式分三類：介導(dǎo)細(xì)胞與ECM的粘附反應(yīng)：α4/β1、α5/β1、αV/β1均可與FN相結(jié)合；αV/β3、αV/β5可與LN相結(jié)合，αV/β3還可與纖維蛋白原結(jié)合介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞間粘附反應(yīng)：αL/β2（LFA-1）的配體是ICAM-1，αM/β2（MAC-1）的配體是ICAM-1、C3bi、Endotoxin;α4/β1的配體是VCAM-1。既介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞又介導(dǎo)細(xì)胞-ECM的粘附反應(yīng)：VLA-4及αM/β2。第18頁,共92頁，2024年2月25日，星期天在整合素配體中多含有RGD（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）序列，這一序列是整合素的結(jié)合位點。含有RGD序列的多肽具有抑制細(xì)胞-細(xì)胞外蛋白（如FN、LN）的粘附反應(yīng)，并具有抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用。第19頁,共92頁，2024年2月25日，星期天樁蛋白踝蛋白紐蛋白紐蛋白（黏著斑蛋白、聯(lián)結(jié)蛋白）：連接肌動蛋白與質(zhì)膜踝蛋白：膜下的一種細(xì)胞骨架蛋白樁蛋白

聚焦粘附激酶（FAK）

引起細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝，將細(xì)胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)到胞質(zhì)核糖體合成基因轉(zhuǎn)錄所需的蛋白質(zhì)。第20頁,共92頁，2024年2月25日，星期天TNF-α刺激促進整合素介導(dǎo)下的粘附透明質(zhì)酸第21頁,共92頁，2024年2月25日，星期天整合素分子結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的改變與腫瘤細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移行為密切相關(guān)。并且在各種不同的瘤細(xì)胞中表達(dá)頻率不同，如：α4β1、α1β1、α2Bβ3主要在黑色素瘤中表達(dá)；浸潤性黑色素細(xì)胞瘤β3亞單位表達(dá)上升；在黑色素細(xì)胞生長過程中VLA-4整合素增加，α6亞單位表達(dá)下降。N膠質(zhì)細(xì)胞瘤、惡性星形細(xì)胞瘤的VN-R、αv/β3表達(dá)增加。當(dāng)N母細(xì)胞瘤有αv/β3、α4/β1、α6/β4表達(dá)而無N-myc原癌基因表達(dá)時腫瘤預(yù)后較好。第22頁,共92頁，2024年2月25日，星期天上皮性腫瘤的整合素表達(dá)也有異質(zhì)性，分化差的腫瘤中一些整合素亞單位（尤其是膠原、LN結(jié)合亞單位α2、α3、α6）表達(dá)下降。在許多研究中發(fā)現(xiàn)基底膜完整性與整合素表達(dá)之間存在一定關(guān)系，浸潤性腫瘤基底膜缺乏完整性，與基底膜結(jié)合的整合素（如α6）趨于不表達(dá)；膠原的α2/β1在正常乳腺細(xì)胞中有較強表達(dá)，而在浸潤性乳腺癌中表達(dá)明顯下降。α5β1主要在乳腺癌和小細(xì)胞肺癌中表達(dá)。α6β主要在結(jié)腸癌中表達(dá)。第23頁,共92頁，2024年2月25日，星期天（二）LN受體（LN—R）

瘤細(xì)胞只有通過基底膜才能產(chǎn)生浸潤與轉(zhuǎn)移。LN是基底膜的重要組成部分，瘤細(xì)胞通過其表面的LN-R與基底膜中的LN結(jié)合而穿過基底膜。80年代初就發(fā)現(xiàn)了LN的67KD受體能識別LN分子的β2鏈，研究證實了LN-R能促進瘤細(xì)胞的粘連性和移動性，其高表達(dá)與乳癌，肺癌，結(jié)腸癌等許多腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移能力呈正相關(guān)。第24頁,共92頁，2024年2月25日，星期天（三）CD44及其變體

也稱為Hermes抗原，H-CAM、Pag-1抗原，細(xì)胞外基質(zhì)受體Ⅲ（ECM-Ⅲ）。CD44V1-10，分子量約85-160KD，目前研究較多的是CD44v6。CD44是一種淋巴細(xì)胞表面的歸巢（homing）受體，在多種高轉(zhuǎn)移性癌中高表達(dá)。CD44原為淋巴細(xì)胞和小靜脈內(nèi)皮細(xì)胞有關(guān)的分子，CD44陽性的瘤細(xì)胞也可能因此獲得淋巴細(xì)胞的偽裝，更易進入淋巴結(jié)形成轉(zhuǎn)移。第25頁,共92頁，2024年2月25日，星期天CD44是一種多功能的跨膜透明質(zhì)酸受體,介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞間，細(xì)胞與ECM間的相互作用.第26頁,共92頁，2024年2月25日，星期天胞膜外區(qū):是CD44分子發(fā)揮生物學(xué)功能的重要結(jié)構(gòu)，在此區(qū)域，CD44分子信號肽的氮末段功能區(qū)（糖基化位點和硫酸軟骨素連接位點）能夠連接胞外基質(zhì)及基底膜的透明質(zhì)酸，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的運動及形態(tài)；跨膜區(qū):由21個疏水氨基酸組成；胞漿區(qū):部分可作為蛋白激酶C（PKC）的底物被磷酸化，參與信號傳導(dǎo)過程。N-連接的糖基化位點

連接的糖基化位點

硫酸軟骨素連接位點

第27頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

CD44的功能：1）作為透明質(zhì)酸受體（C-C,C–ECM間的黏附）；2）為淋巴細(xì)胞歸巢分子；3）賦予腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移潛能；4）參與正常免疫應(yīng)答(Tc活動和炎癥反應(yīng)）。

第28頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

腫瘤細(xì)胞表達(dá)的CD44刺激腫瘤生長的途徑：1）固定腫瘤細(xì)胞，為克隆形成提供病灶場所；2）腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞相互作用產(chǎn)生生長因子及血管生成因子，促進腫瘤生長；3）腫瘤細(xì)胞通過ECM的蛋白聚糖獲得隱蔽的生長因子，逃避免疫監(jiān)視；4）CD44還可識別宿主組織的額外配體，直接刺激腫瘤細(xì)胞增殖；5）CD44H的胞漿內(nèi)部分與細(xì)胞骨架蛋白作用，傳導(dǎo)細(xì)胞分裂信號。第29頁,共92頁，2024年2月25日，星期天Culty等進行細(xì)胞培養(yǎng)實驗表明，乳癌細(xì)胞CD44表達(dá)與其浸潤能力呈正相關(guān)，只有CD44高表達(dá)的細(xì)胞株才有結(jié)合降解透明質(zhì)酸鹽的能力，[H3]標(biāo)記的透明質(zhì)酸鹽降解率與CD44含量和細(xì)胞浸潤生物學(xué)潛能密切相關(guān)，CD44結(jié)合降解透明質(zhì)酸鹽能力可被抗CD44抗體Hermes-1阻斷。介導(dǎo)降解透明質(zhì)酸鹽是CD44在腫瘤細(xì)胞浸潤過程中主要功能之一。第30頁,共92頁，2024年2月25日，星期天Washington等免疫組化分析表明，CD44表達(dá)與胃癌浸潤表型及生存期有關(guān)，認(rèn)為CD44高表達(dá)是浸潤表型及預(yù)后差的指標(biāo)。Castella等用免疫組化方法檢測14例早期胃癌，37例晚期胃癌，18例胃周圍轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。結(jié)果表明浸潤程度與CD44表達(dá)沒有明顯關(guān)系，但腸型胃癌轉(zhuǎn)移灶CD44V6陽性率比彌漫型胃癌轉(zhuǎn)移灶中CD44V6陽性率顯著增高，說明CD44V6表達(dá)可能與腸型胃癌，而不是彌漫型胃癌的轉(zhuǎn)移有關(guān)。

第31頁,共92頁，2024年2月25日，星期天張建兵、陳莉研究92例結(jié)直腸癌中CD44v6陽性率55.4%；CD44v6陽性膜表達(dá)第32頁,共92頁，2024年2月25日，星期天CD44v6表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系UICC分期 NCD44V6

陰性

陽性

陽性率%

Ⅰ、Ⅱ期47281940.4Ⅲ期37102773.0Ⅳ期8 3562.5

p=0.009**

CD44v6表達(dá)與UICC分期有關(guān)（P＜0.01）。CD44v6表達(dá)與組織類型、腫瘤生長方式及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤間無明顯相關(guān)性。第33頁,共92頁，2024年2月25日，星期天28例結(jié)直腸癌CD44v6表達(dá)與生存資料生存時間（例）＜5年（%）5—10年（%）＞10年（%）－(14)4(28.6)3(21.4)7(50.0)

＋(14) 5(35.7)9(64.3)0

在有10年以上隨訪資料的28例結(jié)直腸癌中，CD44v6的表達(dá)與10年生存率間無明顯相關(guān)性。因此，CD44基因可能只是在結(jié)直腸癌的腫瘤形成過程中發(fā)揮一定作用第34頁,共92頁，2024年2月25日，星期天Gunthert等用CD44V的cDNA轉(zhuǎn)染非轉(zhuǎn)移的胰腺癌細(xì)胞株，使其變?yōu)檗D(zhuǎn)移表型，CD44V只表現(xiàn)于轉(zhuǎn)移的細(xì)胞，這表明CD44的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移行為密切相關(guān)。Sy等用85KD的CD44cDNA轉(zhuǎn)染淋巴瘤細(xì)胞，結(jié)果明顯增加了腫瘤的生長及轉(zhuǎn)移行為。第35頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

Guo等用ELISA測定腫瘤病人血清中CD44濃度，表明血清CD44濃度與腫瘤轉(zhuǎn)移及腫瘤增殖有關(guān)，外科切除腫瘤后血清CD44水平明顯下降，認(rèn)為血清CD44濃度可作為監(jiān)測腫瘤增殖及腫瘤轉(zhuǎn)移的指標(biāo)。Matsumura等測定尿中脫落細(xì)胞的CD446號外顯子產(chǎn)物診斷膀胱癌，敏感性91%（40/44），特異性83%（38/46）。第36頁,共92頁，2024年2月25日，星期天Thomas用抗CD44單克隆抗體及可溶性CD44免疫球蛋白融合蛋白，均可明顯抑制腫瘤細(xì)胞移動；Sy等實驗也表明CD44免疫球蛋白融合蛋白在體內(nèi)既有抑制腫瘤生長又有控制腫瘤播散的作用。Guo等用抗CD44單克隆抗體（GKWA3）靜脈注射可阻斷腫瘤的生長與轉(zhuǎn)移；SCID為鼠皮下注射2x106腫瘤細(xì)胞后4周內(nèi)都形成局部腫瘤，而分別于注射腫瘤細(xì)胞當(dāng)天、注射后1、3、7天給藥（GKW.A3100ugiv.Bid3周）形成局部腫瘤情況分別是0/10、1/10、4/10、8/10。腫瘤細(xì)胞注射后40天解剖發(fā)現(xiàn)未治療組約一半有轉(zhuǎn)移形成（肺、腎、腎上腺、肝或腹膜），而用GKWA3治療組無一例形成轉(zhuǎn)移?？笴D44抗體在腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移的治療中有潛力。

第37頁,共92頁，2024年2月25日，星期天（四）路易斯寡糖（SLEX）

SLEX在正常成人分布于粒細(xì)胞，單核細(xì)胞表面。在腫瘤分布于上皮性腫瘤細(xì)胞表面如肺癌，胃癌，結(jié)腸癌等。SLEX可分泌入血，腫瘤病人血清中可查到SLEX。最近研究指出，腫瘤細(xì)胞表面唾液酸化的SLEX作為血管內(nèi)皮細(xì)胞上的E-選擇素的配體，是結(jié)腸癌早期診斷、癌浸潤、預(yù)后不良的一個指標(biāo)。結(jié)腸癌細(xì)胞表面SLEX抗原結(jié)構(gòu)和數(shù)量的變化是導(dǎo)致轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素。所以檢測血清或腫瘤組織中SLEX可以有效監(jiān)測腫瘤，尤其是結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移。第38頁,共92頁，2024年2月25日，星期天1、開始黏附選擇素與糖蛋白E\Pselectin---Ec---CD34

SLEX----腫瘤細(xì)胞--Lselectin2、腫瘤細(xì)胞通過selectin的結(jié)合或介導(dǎo)selectin間的相互作用3、受體間相互作用出現(xiàn)牢固黏附4、腫瘤細(xì)胞與Ec表面同形分子（CD31）相互作用介導(dǎo)細(xì)胞間的移出。

第39頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

（五）免疫球蛋白超家族（Ig-SF）Ig-SF包括許多有共同結(jié)構(gòu)特征的分子，這一結(jié)構(gòu)包含170-110氨基酸組成7-9個β折疊，每個單位在兩條β鏈之間由二硫鍵形成穩(wěn)定復(fù)合物。Ig-SF大部分成員參與細(xì)胞間識別（包括那些有免疫功能的分子，如MHA、CD4、CD8和T細(xì)胞受體，參與N發(fā)育（N-CAM，L1）白細(xì)胞交流（ICAM-1，VCAM-1，PECAM-1）和信息傳遞（CSF-1受體，血小板源性生長因子受體）。第40頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第41頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

1．CEA

CEA是一種高度糖基化的細(xì)胞表面糖蛋白，分子量為180KD。近年來對CEA基因及蛋白結(jié)構(gòu)分析表明，CEA是Ig-SF的成員之一，是一種重要的細(xì)胞粘附分子，可能有細(xì)胞識別和相互作用的功能，作為粘附分子，CEA可增強腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞間的結(jié)合。Hostetter等給予外源性的CEA后，促進結(jié)、直腸癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能。Benchimol等觀察到產(chǎn)生CEA多的細(xì)胞株比產(chǎn)生CEA少的細(xì)胞株聚集得快，這種聚集可被CEA抗體完全抑制。將CEA的cDNA轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞株，測定細(xì)胞株CEA表達(dá)水平，再將表達(dá)CEA不同的細(xì)胞株注射入裸鼠脾臟，結(jié)果表明，CEA高表達(dá)的細(xì)胞株肝臟轉(zhuǎn)移明顯高于CEA低表達(dá)者，并且有肝轉(zhuǎn)移的裸鼠血清CEA亦明顯升高。第42頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

2．N-CAM

N-CAM是一種同種親和性鈣依賴性細(xì)胞-細(xì)胞粘附分子，起初表達(dá)于N系統(tǒng)。N-CAM的表達(dá)隨發(fā)育而改變，N-CAM可降低細(xì)胞的粘附性，使細(xì)胞呈“漂浮”狀態(tài)。N-CAM在惡性發(fā)展過程中可能的機制是：涉及細(xì)胞生長的接觸抑制。轉(zhuǎn)化N-CAM的細(xì)胞株喪失接觸抑制，用抗N-CAM抗體則可抑制腫瘤的生長。第43頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

3．V-CAM-1（INCAM10）VCAM（vascularcelladhesionmolecule-1）或INCAM（induciblecelladhesionmolecule）是血管內(nèi)皮細(xì)胞中細(xì)胞因子誘導(dǎo)的粘附分子，屬Ig-SF成員，是VLA-4（α4/β1）的受體。VCAM-1的功能是介導(dǎo)白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的粘附反應(yīng)，許多惡性細(xì)胞中也有VLA-4表達(dá)，因此VCAM-1在這些有VLA-4表達(dá)的腫瘤中作為腫瘤細(xì)胞粘附受體。第44頁,共92頁，2024年2月25日，星期天4、ICAM-1是相對分子質(zhì)量為9000的糖蛋白，是免疫球蛋白粘附因子家族成員，可與整合素αLβ2和Mac-l連接，主要參與細(xì)胞與細(xì)胞之間的連接，與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。除介導(dǎo)粘附外，實驗證實ICAM-1可從腫瘤細(xì)胞表面脫落，進入循環(huán)系統(tǒng)形成可溶性分子，可助腫瘤細(xì)胞逃逸CTL和NK細(xì)胞的免疫監(jiān)視效應(yīng)，促進腫瘤的發(fā)生與轉(zhuǎn)移。裸鼠人肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移模型LDI-20D中，轉(zhuǎn)移形成前后，癌組織ICAM表達(dá)水平差別顯著，轉(zhuǎn)移建立后ICAM表達(dá)明顯上調(diào)。ICAM-1表達(dá)增加與黑色素瘤惡性發(fā)展，及增加轉(zhuǎn)移危險性有關(guān)。

第45頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)

細(xì)胞外基質(zhì)降解

細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）主要由膠原，糖蛋白，蛋白多糖和氨基葡萄糖組成。ECM以基底膜和間質(zhì)結(jié)締組織的形式存在，膠原是ECM的主要成分，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型膠原主要存在于間質(zhì)結(jié)締組織中，Ⅳ型膠原則主要存在于基底膜（基底膜）。ECM中的糖蛋白包括LN，F(xiàn)N和ND（接觸蛋白）等。ECM是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的天然屏障，腫瘤從原位增殖到浸潤轉(zhuǎn)移的演進過程中必須具備降解ECM的能力。能溶解ECM的酶主要是蛋白水解酶，它們的活性均與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)。第46頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第47頁,共92頁，2024年2月25日，星期天四類蛋白水解酶基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）絲氨酸蛋白酶半胱氨酸蛋白酶（Caspase家族）天門冬氨酸蛋白酶他們幾乎能降解ECM中的所有成分，是近年腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移研究中的熱點。第48頁,共92頁，2024年2月25日，星期天（一）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MatrixmetalloprotinaseMMP）是一組鋅離子依賴性內(nèi)肽酶（①間質(zhì)膠原酶②明膠酶③間充質(zhì)溶解素），大小各異底物不盡相同，但至少都含有信號肽，前肽，催化區(qū)3個結(jié)構(gòu)區(qū)。酶催化區(qū)和前肽區(qū)具有高度保守性。經(jīng)典型MMP以水溶性酶原形式分泌至胞外，需要在激活劑作用下，脫去前肽才具酶活性。新型MMP則不同，間質(zhì)溶素可直接以活性酶形式分泌至胞外。膜型MMP（membraNetypeMMPMT-MMP）則結(jié)合于胞膜上，它們的共同特征是在前肽區(qū)和催化區(qū)間有一含RXKR序列的插入?yún)^(qū)，可能與其活化有關(guān)。第49頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

MMP的調(diào)節(jié)三個水平調(diào)控MMP的表達(dá)和活性1、受酶原合成：生長因子和細(xì)胞因子等活性介質(zhì)(EGF,TGF-β等是酶原合成階段最主要的調(diào)節(jié)因子)，它們不僅能促進或抑制MMPmRNA的轉(zhuǎn)錄，而且能影響其半衰期。2、酶原活化：組織金屬蛋白酶抑制劑（tissueinhibitorofmetalloproteinaseTIMP）可以通過抑制MMP內(nèi)源性物質(zhì)而抑止MMP的活性。3、抑制劑抑制：

第50頁,共92頁，2024年2月25日，星期天各種MMP之間具有一定的底物特異性，但不是絕對的。同一種MMP可降解多種ECM成分，而某一種ECM成分又可以被多種MMP降解。但不同酶的降解效率可有不同。MMP的眾多調(diào)控因素構(gòu)成微妙的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，正是這種精確的調(diào)控機制保證了機體內(nèi)生理狀態(tài)下細(xì)胞遷移的ECM重構(gòu)；反之就成為腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移等病理過程發(fā)生的原因。第51頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

MMP研究方法

RNA印跡雜交（Northernblots）蛋白質(zhì)印跡雜交（westernblots），原位雜交和免疫組化學(xué)方法酶譜分析（Zymography）利用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測酶活性。原位酶譜分析（insituZymography）反向酶譜分析（reverseZymography）第52頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

MMP與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系

MMP與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系正被MMP基因轉(zhuǎn)染技術(shù)所證實，將基質(zhì)溶素和MT1-MMP完整cDNA導(dǎo)入無轉(zhuǎn)移潛能的或轉(zhuǎn)移潛能較弱的細(xì)胞后，受染細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移率大大提高。反之將MMP的反義核酸序列導(dǎo)入高侵襲轉(zhuǎn)移潛能的細(xì)胞后，可使其侵襲轉(zhuǎn)移表型減弱。通過調(diào)節(jié)MMP抑制劑的水平，也證實了MMP在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用。第53頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

MMP在人體腫瘤中表達(dá)較復(fù)雜，不同的研究結(jié)果也不盡相同，腫瘤細(xì)胞及其附近間質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)的報道。間質(zhì)細(xì)胞主要是指（成）纖維細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等。腫瘤周邊的間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生MMP，提示腫瘤細(xì)胞可以通過可溶性介質(zhì)或膜結(jié)合分子與間質(zhì)細(xì)胞進行信息交換，協(xié)同產(chǎn)生和調(diào)節(jié)MMP，這在腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移機制中具有重要意義。第54頁,共92頁，2024年2月25日，星期天MukaiM等人采用免疫組化方法檢測387例結(jié)腸癌的MMP-2和TIMP表達(dá)。結(jié)果表明，隨著瘤細(xì)胞由粘膜下向肌層浸潤，不論是瘤細(xì)胞還是腫瘤間質(zhì)的MMP-2、TIMP-2表達(dá)率均下降。作者認(rèn)為MMP-2和TIMP-2是在粘膜下階段誘導(dǎo)表達(dá)的。這兩種因子的互相作用與結(jié)腸癌的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Yamashitak等采用免疫組化法檢測了人胃癌MMP-7表達(dá)，結(jié)果表明，腸型胃癌的MMP-7表達(dá)率顯著高于彌漫型胃癌，有血管和淋巴侵襲者的MMP-7表達(dá)率顯著高于無血管淋巴侵襲者，說明MMP-7在胃癌侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮一定的作用。

第55頁,共92頁，2024年2月25日，星期天曹曉蕾、陳莉觀察MMP2MMP9在PHC、CHD組織中均有表達(dá)，*(P<0.05)MMP9的高表達(dá)與PHC有一定相關(guān)性。PHC中高表達(dá)MMP9的瘤細(xì)胞在侵襲、轉(zhuǎn)移過程中突破各種屏障如基底膜的能力大大增強，是由于基質(zhì)金屬蛋白酶對細(xì)胞外基質(zhì)、基底膜進行酶解作用所致。PHCCHD第56頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

（二）胱氨酸蛋白酶

胱氨酸蛋白酶包括CathepsinB、D、H等，CathepsinD能降解基底膜、間質(zhì)Ⅰ、Ⅲ型膠原、蛋白聚糖、肌動蛋白、肌球蛋白、FN，從而促進許多腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。組織蛋白酶β基因表達(dá)與腫瘤惡性程度平行。第57頁,共92頁，2024年2月25日，星期天（三）半胱氨酸蛋白酶Caspase家族至今已發(fā)現(xiàn)有14種Caspase，分為3組。1、Caspase-2，-8，-9，是細(xì)胞凋亡的起始Caspase，2、Caspase-3，-6，-7，執(zhí)行細(xì)胞凋亡，是效應(yīng)Caspase。這兩組Caspase在細(xì)胞凋亡中缺一不可。3、由Caspase-1，-4，-5組成，與細(xì)胞凋亡的關(guān)系不是很密切，可能與多種炎癥因子的成熟有關(guān)。第58頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

（四）絲氨酸蛋白酶（纖溶酶原激活劑，As）

白細(xì)胞彈性蛋白酶和組織蛋白酶G，As可使纖溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶，纖溶酶的底物較為廣泛，可降解ECM的許多成分，包括FN、LN蛋白聚糖的蛋白質(zhì)核心。纖溶酶還可激活一些前金屬蛋白酶及潛伏彈性蛋白酶。已證明As在許多腫瘤，尤其是肝癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌中高度表達(dá)，它參與降解基質(zhì)，促進腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。第59頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第四節(jié)腫瘤運動性增強

（一）移動素（Motogen）可以刺激腫瘤細(xì)胞移動性的不同方面，包括：遷移、趨化性、化學(xué)激動作用、吞噬動力學(xué)等。第60頁,共92頁，2024年2月25日，星期天移動素分為三大類1、刺激腫瘤細(xì)胞移動與浸潤的因子如移動刺激因子、單核細(xì)胞源性分散因子、膠原性移動因子和自分泌移動因子（AMF）。2、刺激生長與移動的因子，如肝細(xì)胞生長因子（HGF）、分散因子、內(nèi)皮生長因子（EGF）和IL-1，3，6。3、刺激移動但抑制生長的因子，如轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）和干擾素（INF）。第61頁,共92頁，2024年2月25日，星期天1、自分泌移動因子（AMFs）AMFs是一類由多種腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白因子，各自有特異的糖蛋白受體，信號傳導(dǎo)受G蛋白調(diào)節(jié)，最近發(fā)現(xiàn)AMFs還可以旁分泌方式作用，此時稱之為旁分泌移動因子（PMF），調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長及移動。第62頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

2、肝細(xì)胞生長因子（HGF）

于1984年由Nakamura首先識別，可刺激肝細(xì)胞合成DNA，后來發(fā)現(xiàn)HGF是由成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的一種蛋白因子，也稱之為播散因子（scatterfacter）。HGF可與細(xì)胞膜上HGF受體結(jié)合刺激細(xì)胞移動和增殖。HGF是一跨膜蛋白因子，含有一個酪氨酸激酶的結(jié)構(gòu)功能區(qū)，這一結(jié)構(gòu)功能區(qū)由原癌基因c-met編碼。第63頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第五節(jié)腫瘤新生血管是轉(zhuǎn)移阻力最小的通道

腫瘤長到1-2mm3時，為保證快速增殖必須新生血管支持。由腫瘤誘導(dǎo)產(chǎn)生的血管，其基底膜薄而且易斷裂，腫瘤細(xì)胞很容易進入這種血管。所以新生血管的形成十分有利于腫瘤的轉(zhuǎn)移，而一切有利于腫瘤新生血管形成的細(xì)胞因子也均有利于腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。這些細(xì)胞因子包括酸性或堿性纖維母細(xì)胞生長因子（aFGF、bFGF）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）又叫血管通透因子（VPF）、表皮生長因子/轉(zhuǎn)化生長因子（EGF/TGF）。除此之外IL-8、GM/M-GSF、IGF-1、IFN2、促血管素（angiotropin）、P物質(zhì)等能促進腫瘤新生血管形成。第64頁,共92頁，2024年2月25日，星期天UchidaS等研究顯示VEGF表達(dá)與食管癌的浸潤程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。VEGF促進腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的機制除了與它參與腫瘤新生血管形成，使血管通透性增加外，還與它能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞金屬蛋白酶和間質(zhì)膠原酶的產(chǎn)生有關(guān)。研究表明腫瘤微血管數(shù)目和微血管密度直接與腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移有關(guān)，誘發(fā)腫瘤血管生成是具有轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤細(xì)胞特性之一，長期以來病理學(xué)家注意到一個事實，這也許正如淋巴細(xì)胞歸巢一樣，與瘤細(xì)胞選擇性識別特異性微血管內(nèi)皮細(xì)胞有關(guān)。第65頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第六節(jié)腫瘤逃避免疫系統(tǒng)的識別與破壞

瘤細(xì)胞即使從瘤體脫落下來，突破細(xì)胞外基質(zhì)或基底膜進入血液循環(huán)或淋巴系統(tǒng)，也不一定能在血液或淋巴系統(tǒng)中存活下來，它可能會被免疫系統(tǒng)識別和消滅掉，所以逃避免疫系統(tǒng)的識別和破壞是腫瘤轉(zhuǎn)移形成的又一關(guān)鍵步驟。目前認(rèn)為在腫瘤轉(zhuǎn)移時MHC功能受到抑制，細(xì)胞刺激信號的作用減弱，導(dǎo)致了腫瘤細(xì)胞免疫逃逸，這是腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生的重要原因。第66頁,共92頁，2024年2月25日，星期天轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞的HLA抗原表達(dá)極弱或消失，分化越差的瘤細(xì)胞HLA表達(dá)也越弱。DouNall等人采用免疫組化法分析110例結(jié)腸癌活檢標(biāo)本，結(jié)果發(fā)現(xiàn)44%的結(jié)腸癌HLA表達(dá)幾乎消失，50%呈中度降低。日本學(xué)者的研究發(fā)現(xiàn)，凡攜帶HLA-DR4患者結(jié)腸癌是極易轉(zhuǎn)移，即攜帶HLA-DR4者有47.4%發(fā)生轉(zhuǎn)移，而不帶HLA-DR4者只有18./5%發(fā)生轉(zhuǎn)移。第67頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第七節(jié)轉(zhuǎn)移過程中的信號傳導(dǎo)

信號傳導(dǎo)（signaltransduction）是90年代以來生命科學(xué)研究領(lǐng)域的熱點與前沿，雖然目前尚無統(tǒng)一確切的定義，但約定俗成的基本概念是指細(xì)胞外因子通過與受體結(jié)合所引發(fā)的細(xì)胞內(nèi)的一系列生化反應(yīng)，蛋白與蛋白的相互作用，直至細(xì)胞生理反應(yīng)所需基因表達(dá)開始的過程，即信號從細(xì)胞外通過膜到細(xì)胞核的過程。第68頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑G蛋白途徑酪氨酸激酶途徑胞膜磷脂酰肌醇代謝途徑蛋白激酶C（PKC）途徑鈣調(diào)蛋白依賴途徑在侵襲轉(zhuǎn)移的整個過程中，包括粘附、降解、移動都有信號傳遞參與，細(xì)胞表面受體接受刺激將信號傳入細(xì)胞內(nèi)，調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架蛋白，激發(fā)移動，激活細(xì)胞產(chǎn)生各種蛋白降解酶類。第69頁,共92頁，2024年2月25日，星期天蛋白酪氨酸途徑

FAK和/或Ras激活有絲分裂原活化蛋白激酶（MAPK）級鏈反應(yīng)傳遞細(xì)胞生長因子信號到細(xì)胞核激活涉及細(xì)胞生長與增殖相關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄參與細(xì)胞的活化、增殖、分化、分泌、遷移、凋亡等

細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝途徑

聚焦粘附激酶（FAK，focaladhesionkinase，F(xiàn)AK）引起細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝，將細(xì)胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)到胞質(zhì)核糖體合成基因轉(zhuǎn)錄所需的蛋白質(zhì)。第70頁,共92頁，2024年2月25日，星期天整合素經(jīng)FAK和ILK途徑信號轉(zhuǎn)導(dǎo)第71頁,共92頁，2024年2月25日，星期天第八節(jié)腫瘤轉(zhuǎn)移的基因調(diào)控

在癌轉(zhuǎn)移這個復(fù)雜的過程中，必然有許多基因在不同層次上參與調(diào)控，包括腫瘤轉(zhuǎn)移基因的激活和轉(zhuǎn)移抑制基因的失活。許多與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)的基因表現(xiàn)為多效性（pleiotropy），同一基因在不同組織類型的腫瘤中作用有異，而同一腫瘤的不同階段又可能有不同組合的多個基因參與。

第72頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

用突變的ras基因轉(zhuǎn)染鼠成纖維細(xì)胞NIH3T3使之獲得轉(zhuǎn)移能力。以后研究表明，至少10余種癌基因由細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗證實可誘導(dǎo)或促進癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能。最近通過對以ras基因蛋白為中心的信號傳導(dǎo)系統(tǒng)的闡明，將癌基因“網(wǎng)絡(luò)化”，網(wǎng)絡(luò)上游癌基因有src、fes、erb-B2等，這些基因編碼具有酪氨酸激酶（PTK）活性的蛋白；下游基因有raf、fos、myc等；ras基因蛋白則通過GTP與GDP功能狀態(tài)的轉(zhuǎn)換,在網(wǎng)絡(luò)中起分子開關(guān)的作用。第73頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

(一)轉(zhuǎn)移基因（MTSL）1989年Ebrallidze從乳腺肉瘤細(xì)胞株中分離出一種在轉(zhuǎn)移細(xì)胞中高度或中度表達(dá)，而非轉(zhuǎn)移細(xì)胞中不表達(dá)的基因，稱之為轉(zhuǎn)移基因mtsl。Mtsl基因編碼一種101氨基酸的蛋白，這種蛋白屬鈣結(jié)合蛋白家族S100鈣結(jié)合蛋白的亞族，是一種S100相關(guān)鈣結(jié)合蛋白。這種蛋白與細(xì)胞骨架成分作用調(diào)節(jié)細(xì)胞移動性和侵襲性。目前研究表明mtsl基因表達(dá)水平與細(xì)胞移動性以及腫瘤細(xì)胞的侵襲性明顯相關(guān)。第74頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

（二）Nm23：1988年由美國國立癌癥研究院steeg等首先在7株具有不同轉(zhuǎn)移能力的鼠K-1735黑色素瘤細(xì)胞系中，以消減雜交的方法從cDNA文庫中分離到Nm23基因（Non-metastasis非轉(zhuǎn)移性），并且是檢查到的第23個克隆基因。這是目前分離到的唯一對腫瘤轉(zhuǎn)移起著負(fù)調(diào)控作用的基因，它的出現(xiàn)導(dǎo)致了腫瘤轉(zhuǎn)移基因及轉(zhuǎn)移抑制基因的概念形成。第75頁,共92頁，2024年2月25日，星期天Nm23H1基因全長8.5Kb,由5個外顯子和4個內(nèi)含子組成，位于17號染色體著燃點附近。m23H1基因編碼152氨基酸組成的多肽，分子量約17KD，為二磷酸核苷激酶（NDPK）的A亞基。NDPK的B亞基由Nm23H2基因編碼。NDPK是一類廣泛存在的酶，已知其在正常發(fā)育和腫瘤發(fā)生發(fā)展中起一定作用。NDPK可能通過參與微管聚合或解聚來影響細(xì)胞有絲分裂和細(xì)胞運動，并參與通過G蛋白介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)。近年來大量的有關(guān)Nm23基因與腫瘤轉(zhuǎn)移的報道，在一些腫瘤中，如乳腺癌、肝癌、黑色素瘤、胃癌等，其Nm23的mRNA蛋白表達(dá)與腫瘤的轉(zhuǎn)移及臨床預(yù)后不良呈反相關(guān)。

第76頁,共92頁，2024年2月25日，星期天張建兵、陳莉研究92例結(jié)直腸癌中nm23表達(dá)第77頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

本組92例結(jié)直腸癌的nm23表達(dá)陽性率42.4%。與組織類型、UICC分期、腫瘤生長方式及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤均無明顯相關(guān)性，但經(jīng)對有隨訪結(jié)果的結(jié)直腸癌中nm23表達(dá)情況作多因素Cox回歸模型分析提示，nm23陰性病例預(yù)示更差的預(yù)后。因而我們贊同nm23基因具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移的潛能，認(rèn)為nm23表達(dá)減少預(yù)示結(jié)直腸癌更強的侵襲性和易于轉(zhuǎn)移擴散。第78頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

Nm23基因的缺乏與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，顯示了Nm23基因作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的特性。但在另一些腫瘤中，如結(jié)腸癌、N母細(xì)胞瘤、肺癌、前列腺癌、腎細(xì)胞癌、子宮內(nèi)膜癌、喉癌等，其Nm23基因的表達(dá)水平缺失與腫瘤是否轉(zhuǎn)移及臨床預(yù)后無關(guān)。甚至一些腫瘤如N母細(xì)胞瘤，其惡化和轉(zhuǎn)移時Nm23表達(dá)可能增高。而且對同一種腫瘤的研究結(jié)果也不盡相同，這一系列矛盾的結(jié)果使Nm23基因作為一個簡單化的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的角色受到挑戰(zhàn)，說明人們對Nm23的全面認(rèn)識遠(yuǎn)未完成，需擴大研究范圍并深入進行研究。第79頁,共92頁，2024年2月25日，星期天

（三）腫瘤侵襲誘導(dǎo)基因（TIAM-1）TIAM-11994年由Habets等報道，TIAM-1位于人21號染色體q22帶上，含兩個外顯子一個內(nèi)含子，cDNA長約7.3Kb,編碼1591氨基酸的蛋白。TIAM-1蛋白可能是Rac和/或Rho活性調(diào)節(jié)因子，后兩者為ras超家族。TIAM-1-ras信號傳導(dǎo)通路影響細(xì)胞骨架、細(xì)胞粘附和運動。所以TIAM-1在腫瘤發(fā)展，侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。第80頁,共92頁，2024年2月25日，星期天（四）、KAI1／CD82KAI1基因位于11p11．2區(qū)，長約80kb，其編碼的蛋白質(zhì)含277個氨基酸，相對分子質(zhì)量為29．61×1O3，與CD82結(jié)構(gòu)相同，是一種高度糖基化的細(xì)胞膜蛋白，KAI1蛋白的這種結(jié)構(gòu)與其參與調(diào)控細(xì)胞粘附、遷移、增殖、分化有關(guān)，并最終抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移。KAI1是一種通用的轉(zhuǎn)移抑制基因，在體內(nèi)分布廣泛，能抑制肝癌、直腸癌、食道癌、胰腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌、宮頸癌和乳腺癌等的轉(zhuǎn)移。

第81頁,共92頁，2024年2月25日，星期天KAI1／CD82抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的機制不清楚，可能與以下因素有關(guān)：(1)KAI1／CD82與β1-整合素、E-鈣連素結(jié)合形成復(fù)合體，調(diào)節(jié)β1-整合素、E-鈣連素的粘附功能，從而影響腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。(2)KA11／CD82通過影響Src激酶介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑，促進細(xì)胞之間的同質(zhì)性粘附，抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移。(3)KAI1／CD82可與表皮生長因子(epidermalgrowthfactor，EGF)相互作用，下調(diào)EGF與相應(yīng)受體的結(jié)合，致使EGF誘導(dǎo)的信號傳遞迅速衰減，上皮細(xì)胞的板狀偽足伸展和細(xì)胞遷移受抑制，從而抑制血管的形成，最終抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。

第82頁,共92頁，2024年2月25日，星期天（五）、Raf激酶抑制蛋白

(Rafkinaseinhibitoryprotein，RKIP)RKIP可以與Raf-MEK1／2和核因子-κB(nuclearfactor-KappaB，NF-κB)誘導(dǎo)激酶-1結(jié)合，改變β生長因子激活激酶-1的結(jié)構(gòu)，從而促進腫瘤細(xì)胞的凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、血管浸潤。另外，蛋白激酶C可以使RKIP蛋白的153位絲氨酸磷酸化，使RKIP蛋白失活，因而，蛋白激酶C和RKIP蛋白一起可選擇性抑制Raf-1的活性。

第83頁,共92頁，2024年2月25日，星期天（六）、Kiss1Kiss1能抑制轉(zhuǎn)移細(xì)胞集落形成。利用熒光標(biāo)記技術(shù)，發(fā)現(xiàn)含Kiss1的黑色素瘤轉(zhuǎn)移細(xì)胞能到達(dá)轉(zhuǎn)移的靶器官組織，但只表現(xiàn)為單個細(xì)胞而不能形成瘤組織，表明它們在轉(zhuǎn)移點的生長受到抑制。同時Kiss1能抑制胃癌、肝癌、鱗狀上皮食道癌、胰腺癌等的轉(zhuǎn)移。

第84頁,共92頁，2024年2月25日，星期天Kiss1位于人類1q32，編碼的蛋白含133個氨基酸，其分解產(chǎn)生54個氨基酸的活性肽-Metastin。Metastin是一種新的孤立型G蛋白受體的配體。G蛋白偶聯(lián)受體是體內(nèi)一類重要的受體，可接收許多不同的信號，具有不同的功能，如控制生長、增殖。當(dāng)G蛋白受體的配體與Metastin結(jié)合后，活化的受體進一步激活G-蛋白活化磷脂酶C，抑制細(xì)胞增殖和遷移；Metastin還參與MAPK信號傳遞途徑，抑制腫瘤細(xì)胞的浸潤性、運動性、化學(xué)趨向性和粘附