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文檔簡介

7海洋微生物的分離主要內(nèi)容任務(wù)一、海洋微生物的分離任務(wù)二、微生物的培養(yǎng)技術(shù)任務(wù)三、海洋微生物培養(yǎng)的新方法

任務(wù)一、海洋微生物的分離

微生物分離一般流程為

采樣

富集培養(yǎng)分離篩選毒性試驗(yàn)微生物處于混雜的生長狀態(tài)，必須分離、純化。分離的方法有:劃線分離法、稀釋分離法、單孢子或單細(xì)胞分離法等。1.平板劃線分離法用接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，劃線適宜的話，微生物能分散，培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。平板上的菌落形態(tài)2.稀釋倒平板法

將待分離材料用無菌水作梯度稀釋（如1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000…），分別與已溶并冷至45℃的瓊脂培養(yǎng)基混勻，傾入培養(yǎng)皿，凝固后保溫培養(yǎng)一定時(shí)間即可出菌落。

若稀釋得當(dāng)，在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落，挑取可得到純培養(yǎng)。

3.單孢子或單細(xì)胞分離法

采取顯微分離法直接分離單個(gè)細(xì)胞或個(gè)體獲得純培養(yǎng)?；蛴锰刂频拿?xì)管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來，移到合適的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。4.選擇性培養(yǎng)基分離法

各種微生物對(duì)不同的化學(xué)試劑、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用這些特性可配制合適某種微生物而限制其它微生物生長的選擇培養(yǎng)基，用它來培養(yǎng)微生物以獲得純培養(yǎng)。（1）控制營養(yǎng)成分如要分離淀粉酶產(chǎn)生菌，可用淀粉作唯一碳源，分離蛋白酶產(chǎn)生菌，可用酪素作氮源。（纖維素培養(yǎng)基——分離產(chǎn)纖維素酶的菌）（2）控制培養(yǎng)基的酸堿度細(xì)菌要求中性、放線菌要求偏堿、酵母和霉菌要求偏酸性生長。（3）添加抑制劑如分離放線菌，可在培養(yǎng)基中加入幾滴酚，可抑制霉菌和細(xì)菌的生長：分離真菌時(shí)，培養(yǎng)基中加入青霉素等抑制細(xì)菌生長的抗生素，可抑制細(xì)菌的生長。（加抗生素——分離真菌、加1%酚——分離放線菌）類型：（4）熱處理如分離芽孢桿菌或耐熱菌，可以把分離樣品與60-70℃，甚至更高的溫度處理，殺死其它營養(yǎng)細(xì)胞。（5）控制培養(yǎng)溫度如分離嗜熱微生物時(shí)，可把培養(yǎng)溫度提高到50-60

℃，甚至更高。（6）控制通氣條件分

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