豬抗原抗體檢測方案

關于豬抗原抗體檢測方案檢測的目的1．疾病預警（1）了解疾病在場內的污染狀況，制定相應策略（2）提前了解免疫抗體的高低及整齊度，及時糾正2．免疫程序的評估與優(yōu)化（1）了解母源抗體的消長情況（2）疫苗接種的效果-----免疫抗體監(jiān)控3．疾病控制和清除計劃：通過系統(tǒng)檢測和措施，實施疾病的控制或清除計劃4．疾病診斷第2頁,共24頁，2024年2月25日，星期天重點進行監(jiān)測四大豬病：豬瘟、藍耳、偽狂犬、圓環(huán)1.豬瘟主要問題（1）抗體水平偏低（2）疫苗的選擇及劑量：細胞苗？脾淋苗？，150RID=37PD50（3）持續(xù)性感染豬的存在第3頁,共24頁，2024年2月25日，星期天豬瘟抗原檢測（1）常用方法：PCR、熒光抗體和ELISA（2）檢測目的：引進種豬或后備母豬時的檢查，疑似病例的確診，豬群帶毒率的定期評估（3）結果分析：豬瘟抗原ELISA陽性結果代表野毒陽性，PCR和熒光抗體陽性結果有可能是疫苗毒的干擾。第4頁,共24頁，2024年2月25日，星期天

豬瘟抗體ELISA檢測要點:A.怎樣評估母源抗體和免疫效果1）當母源抗體的降到阻斷率（Block）50%以下時，才能不干擾疫苗的免疫。（確定首免日齡）2）免疫后阻斷率（Block）上升到50%以上才能代表免疫合格。

良好的種豬場要求：陽性率100%（>40），合格率90%（>50）

cv<25%）CSFV判定標準:若%PC值大于或等于0.4則判定陽性；若PC%值小于0.4則判定陰性第5頁,共24頁，2024年2月25日，星期天表1：豬血清CSFV抗體檢測結果編號OD值阻斷率結果63060.3470.625+58410.2770.718+58050.2180.797+37110.1720.858+保10.1590.875+后備0.6990.157-陰性對照0.818成立0.817陰性平均值0.8175陽性對照0.073成立0.057陽性平均值0.065CSFV判定標準:若%PC值大于或等于0.4則判定陽性；若PC%值小于0.4則判定陰性

第6頁,共24頁，2024年2月25日，星期天B.剔除持續(xù)感染豬或無抗體反應豬1）持續(xù)性感染的種豬可間斷性或持續(xù)性排出病毒，他們成為整個豬群的感染源。

2）首次使用應對母豬群進行檢測，對抗體低下豬只進行補針后6周復檢。若仍然沒有抗體產生，應進行淘汰。第7頁,共24頁，2024年2月25日，星期天C.豬瘟抗體檢測結果分析1）Cutoff值是>1：16代表抗體陽性2）實際生產中至少要在1：64以上才有一定的保護，經產母豬多次疫苗免疫后抗體水平一般會在1：256到1：1024左右波動。第8頁,共24頁，2024年2月25日，星期天D.豬瘟抗體ELISA檢測時間表品項種類時間目的取樣數量日常評估后備母豬在配種前野毒感染和抗體水平全部經產母豬3個月一次個月一次評估母豬群的健康狀態(tài)和抵抗力20商品豬二免后4-6周4-6周監(jiān)控免疫效果20首免日齡仔豬21日齡日齡評估母源抗體衰減水平，選擇最佳首免時間1528日齡日齡1535日齡日齡1542日齡日齡15第9頁,共24頁，2024年2月25日，星期天藍耳病的主要問題（1）毒株的變異與交叉保護（2）疫苗的選擇：滅活疫苗、弱毒疫苗、毒株（3）豬群穩(wěn)定性評估第10頁,共24頁，2024年2月25日，星期天藍耳病的檢測方法（1）抗原：RT-PCR（2）抗體：ELISA第11頁,共24頁，2024年2月25日，星期天藍耳病的抗體檢測結果分析（1）對于穩(wěn)定的種豬群，S/P值為0-2左右，很少大于2.5.（2）良好免疫群的典型的S/P比值范圍為：0.7to1.8；有些可能>2.0。（3）如果每年免疫兩次，仍有多于20％的豬抗體為陰性，需要對疫苗的管理和使用進行檢查。（4）當S/P>2.5–病毒血癥（5）當S/P>3.5-高于5.0–急性感染第12頁,共24頁，2024年2月25日，星期天藍耳病的抗體檢測結果分析（6）6-7周齡時，多數仔豬抗體可變?yōu)殛幮裕o病毒循環(huán)）（7）引進種豬，要剔出陽性值SP>1.2的豬只，保證種群的穩(wěn)定（8）公豬抗體陽性值SP>2.5的最好不要使用（9）母豬群間隔1-2個月對群體進行監(jiān)控，了解豬群等穩(wěn)定狀態(tài)（10）仔豬了解病毒的感染時間，加強藥物保?。?1）當S/P>2.5時，豬群即呈現(xiàn)不穩(wěn)定狀態(tài)，需要采取措施進行控制第13頁,共24頁，2024年2月25日，星期天

穩(wěn)定性標準非免豬穩(wěn)定S/P≤1.0者比例≥90%者比例≥90%非免豬不穩(wěn)定S/P<1.0者比例<90%免疫豬穩(wěn)定S/P≤2.0者比例≥90%者比例≥90%

免疫豬不穩(wěn)定S/P<2.0者比例<90%第14頁,共24頁，2024年2月25日，星期天PRRSV判定標準:S/P值大于等于0.4判定為陽性；S/P值小于0.4判定為陰性編號OD值S/P值結果原種場一場520.5050.652+原種場一場540.5320.693+原種場一場580.9471.322+原種場一場660.3240.378-原種場一場610.2450.258-原種場一場680.2310.237-原種場一場712.4494.171+原種場一場751.8862.746+陰性對照0.072成立0.078陰性平均值0.075陽性對照0.735成立0.734陽性平均值0.7345第15頁,共24頁，2024年2月25日，星期天藍耳病抗體檢測時間表品項種類時間目的取樣數量日常評估后備母豬在配種前防止引入不穩(wěn)定豬只全部經產母豬2個月一次個月一次了解豬群穩(wěn)定性20商品豬3個月一次個月一次監(jiān)控免疫效果和穩(wěn)定性20第16頁,共24頁，2024年2月25日，星期天偽狂犬的主要問題（1）種豬群野毒抗體（gE抗體）陽性率居高不下（2）中大豬的呼吸道問題（3）散發(fā)性母豬繁殖障礙（4）凈化方案的選擇第17頁,共24頁，2024年2月25日，星期天偽狂犬的檢測方法（1）PRVgB：總抗體，S/N值和阻斷率（BLOCK值）（2）PRVgE（I）：野毒抗體（3）通過PRV-gB和PRV-gI抗體檢測可了解本場偽狂犬病的流行狀況，制定相應的免疫方案及措施。第18頁,共24頁，2024年2月25日，星期天偽狂犬清除計劃（1）在陽性率低的種豬群，建議一次性淘汰所有陽性種豬。每個季度篩選一次，加強疫苗免疫，同時保證引入陰性后備母豬和種公豬，一般一年見效。（2）在陽性率很高的種豬群，保證引入陰性后備母豬和種公豬，加強免疫。每季度抽樣監(jiān)控野毒陽性比例防止感染擴大并用PRV-gB評估免疫抗體水平，三年可見效。第19頁,共24頁，2024年2月25日，星期天編號OD值S/N值結果保育（50日齡）0.0490.030+哺乳0.0610.037+保育（36日齡）0.7760.476+哺乳0.0770.047+空懷0.040.025+空懷0.0430.026+妊娠0.0470.029+妊娠0.0250.015+后備1.5670.962-后備1.5570.956-陰性對照1.629

+陽性對照0.073

+PRV-gI判定標準:若S/N值小于等于0.6則判定為陽性；若S/N大于0.6則判定為陰性第20頁,共24頁，2024年2月25日，星期天偽狂犬檢測時間表品項種類時間目的取樣數量日常評估后備母豬在配種前野毒感染和抗體水平（gB和gE抗體）gB和gE抗體）全部經產母豬3個月一次個月一次評估母豬群的健康狀態(tài)和抵抗力（gB和gE抗體）gB和gE抗體）20商品豬免疫后4周4周監(jiān)控免疫效果（gB抗體）gB抗體）20首免日齡仔豬70-80日齡免疫前日齡免疫前評估母源抗體衰減水平，選擇最佳首免時間（gB抗體）gB抗體）15第21頁,共24頁，2024年2月25日，星期天圓環(huán)病毒編號OD值S/P值結果后備2.0223.577+后備1.8153.197+妊娠0.9931.686+妊娠1.3682.375+空懷1.3042.257+空懷2.0463.621+哺乳1.3442.331+保育（36日齡）0.230.283-保育（50日齡）2.2033.910+哺乳0.4780.739+陰性對照0.0760.000-陽性對照0.621.000+PCV2判定標準:若S/P值大于0.4則判定為陽性；若S/P小于0.4或大于0.3為可疑；若S/P小于0.3則判定為陰性0.42<OD值<1為中度感染，OD值>1為重度感染，OD值<0.42為安全第22頁,共24頁，2024年2月25日，星期天圓環(huán)病毒PCV2判定標準:若S/P值大于0.4則判定為陽性；若S/P小于0.4或大于0.3為可疑；若S/P小于0.3則判定為陰性0.42<OD值<1為中度感染，OD值>1為重度感染，OD值<0.42為安全編號OD值S/P值結果原種場一場521.2682.237+原種場一場541.9573.525+原種場一場581.312.316+原種場一場661.7053.054+原種場