雜環(huán)類藥物的分析課件

雜環(huán)類藥物的分析

TheAnalysisofHeterodrugs

2雜環(huán)化合物：指環(huán)狀有機(jī)化合物的碳環(huán)中夾雜有非碳元素原子（如O、S、N等）的化合物3共性:(1)雜環(huán)類藥物是合成藥物中所占比例最多的一大類藥物。(2)多為五元環(huán)或六元環(huán)，單環(huán)或并合環(huán)。(3)雜環(huán)結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定，不易開環(huán)，其性質(zhì)受雜原子種類、數(shù)目、位置影響。(4)雜環(huán)上取代基性質(zhì)較活潑，常用于分析。(5)含氮雜環(huán)，其堿性的強(qiáng)弱往往用于分析。4第一節(jié)吡啶類藥物一、基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)（一）典型藥物的結(jié)構(gòu)吡啶（pyridine）

5

異煙肼（isoniazid）6

尼可剎米（nikethamide）7異煙腙（ftivazide）8（二）主要化學(xué)性質(zhì)1.吡啶環(huán)

弱堿性

pKb～8.8，非水堿量法含量測(cè)定或沉淀反應(yīng)鑒別

吡啶環(huán)可發(fā)生開環(huán)反應(yīng)，可用于吡啶類藥物的鑒別92.取代基：（1）異煙肼

位上酰肼基

還原性鑒別或氧化還原滴定法含量測(cè)定可與某些羰基試劑發(fā)生縮合反應(yīng)鑒別或比色法含量測(cè)定

酰胺鍵易水解引入特殊雜質(zhì)游離肼

10（2）尼可剎米

位上酰胺基

易水解，遇堿水解后，釋放出具有堿性的二乙胺，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)色，故可以此進(jìn)行鑒別。3.UV和IR11二、鑒別試驗(yàn)（一）吡啶環(huán)的開環(huán)反應(yīng)

適用于吡啶環(huán)的

、′未取代以及

、

為烷基或羧基的衍生物1.戊烯二醛反應(yīng)（K?ning反應(yīng)）12

尼可剎米ChP（2005）

【鑒別】（2）取本品1滴，加水50ml，搖勻，分取2ml，加溴化氰試液2ml與2.5%苯胺溶液3ml，搖勻，溶液漸顯黃色。131415異煙肼：

162.二硝基氯苯反應(yīng)1718異煙肼不經(jīng)處理的反應(yīng)：19（二）酰肼基團(tuán)的反應(yīng)

1.

還原反應(yīng)20

異煙肼ChP（2005）

【鑒別】

（2）取異煙肼約10mg，置試管中，加水2mL溶解后，加氨制硝酸銀試液1mL，即發(fā)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上生成銀鏡。212.縮合反應(yīng)

22

異煙肼ChP（2005）

【鑒別】

（1）取本品約0.1g，加水5ml溶解后，加10％香草醛的乙醇溶液1m1，搖勻，微熱，放冷，即析出黃色結(jié)晶，濾過(guò)，用稀乙醇重結(jié)晶，在105℃干燥后，測(cè)定熔點(diǎn)，其熔點(diǎn)為228～231℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。

23（三）沉淀反應(yīng)（1）與銅鹽的反應(yīng)尼可剎米ChP（2005）【鑒別】（3）取本品2滴，加水1ml，搖勻，加硫酸銅試液2滴與硫氰酸胺試液3滴，即生成草綠色沉淀。24（2）與氯化汞的反應(yīng)

25（四）分解產(chǎn)物的反應(yīng)

尼可剎米ChP（2005）

【鑒別】

（1）取本品10滴，加氫氧化鈉試液3ml，加熱，即發(fā)生二乙胺的臭氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)色。26（五）紫外吸收光譜特征

丙硫異煙胺ChP（2000）

【鑒別】（1）取本品，加乙醇制成每1ml中含20g的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在291nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，吸收度約為0.78。27（六）IR尼可剎米ChP（2000）

【鑒別】（4）本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集135圖）一致。28三、有關(guān)物質(zhì)檢查（一）異煙肼中游離肼的檢查

雜質(zhì)來(lái)源原料引入、降解產(chǎn)生

1.薄層色譜法（TLC）（1）ChP（2005）雜質(zhì)對(duì)照品法29取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作為供試品溶液。另取硫酸肼加水制成每1ml中含0.20mg（相當(dāng)于游離肼50μg的溶液，作為對(duì)照溶液。吸取供試品溶液10μl與對(duì)照溶液2μl分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）上，以異丙醇－丙酮（3∶2）為展開劑，展開后，晾干，噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15min后檢視，在供試品主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)。

3031（2）BP游離肼雜質(zhì)對(duì)照品法有關(guān)物質(zhì)高低濃度對(duì)比法322.

比濁法JP（14）檢查方法靈敏度法反應(yīng)原理游離肼+水楊醛→水楊醛腙↓優(yōu)點(diǎn)：不用對(duì)照品，價(jià)廉、簡(jiǎn)單易行缺點(diǎn)：準(zhǔn)確度差33

3.差示分光光度法游離肼+對(duì)二甲氨基苯甲醛→黃色縮合物

于456nm波長(zhǎng)處有最大吸收異煙肼+對(duì)二甲氨基苯甲醛→縮合物于456nm波長(zhǎng)處無(wú)吸收游離肼+3%丙酮→無(wú)色的二甲基甲酮連氮34參比：異煙肼+游離肼+對(duì)二甲氨基苯甲醛+3%丙酮樣品：異煙肼+游離肼+對(duì)二甲氨基苯甲醛測(cè)定，對(duì)照法定量

35（二）尼可剎米中有關(guān)物質(zhì)的檢查

ChP（2005）

TLC

高低濃度對(duì)比法配制兩種不同濃度的對(duì)照溶液36

四、含量測(cè)定

（一）異煙肼的含量測(cè)定1.氧化還原滴定法（1）溴酸鉀法

ChP（2005）原料及制劑37反應(yīng)摩爾比3∶2

38取本品約0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25m1，加水50m1、鹽酸20ml與甲基橙指示劑1滴，用溴酸鉀滴定液（0.01667mo1/L）緩緩滴定（溫度保持在18～25℃）至粉紅色消失。每1ml的溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）相當(dāng)于3.429mg的C6H7N3O。39（2）溴量法反應(yīng)摩爾比1∶240（3）剩余碘量法反應(yīng)摩爾比1∶2412.非水溶液滴定法（1）非水酸量法（2）非水堿量法42（二）尼可剎米的含量測(cè)定1.非水溶液滴定法

ChP（2005）原料2.紫外分光光度法

ChP（2005）注射液

43用內(nèi)容量移液管精密量取本品1m1，置100ml量瓶中，用0.5％硫酸溶液分次洗滌移液管內(nèi)壁，洗液并入量瓶中，加0.5％硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取適量，加0.5％硫酸溶液稀釋成每1ml中約含尼可剎米20μg的溶液，在263nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C10H14N2O的吸收系數(shù)（）為292計(jì)算，即得。441.下列藥物中，哪一個(gè)藥物加氨制硝酸銀能產(chǎn)生銀鏡反應(yīng)A.地西泮B.阿司匹林C.異煙肼D.苯佐卡因E.苯巴比妥

452．用于吡啶類藥物鑒別的開環(huán)反應(yīng)有A.茚三酮反應(yīng)B．戊烯二醛反應(yīng)C．坂口反應(yīng)D.硫色素反應(yīng)E．二硝基氯苯反應(yīng)

463.ChP（2005）異煙肼的測(cè)定方法為A.溴酸鉀滴定法B.溴量法C.TCLD.NaNO2E.比色法

474.能和2,4一二硝基氯苯發(fā)生呈色反應(yīng)的藥物是A.異煙肼B.硫酸奎寧C.阿莫西林D.四環(huán)素E.炔孕酮

485.能和硫酸銅及硫氰酸銨反應(yīng)，生成草綠色沉淀的藥物為A.對(duì)乙酰氨基酚B.異煙肼C.尼可剎米D.地西泮E.維生素E

496.經(jīng)高錳酸鉀或溴水氧化后，可發(fā)生開環(huán)形成戊烯二醛反應(yīng)的藥物為A.葡萄糖B.皮質(zhì)酮C.維生素CD.土酶素E.異煙肼

507.溴酸鉀法測(cè)定異煙肼含量的方法是

A.屬于氧化還原滴定法

B.lmol溴酸鉀相當(dāng)于3/2mol的異煙肼

C.采用永停滴定法指示終點(diǎn)

D.在HCl酸性條件下進(jìn)行滴定

E.還可以用于異煙肼制劑的含量測(cè)定

518.異煙肼可由原料反應(yīng)不完全或貯藏中的降解反應(yīng)而引入哪種雜質(zhì)A.間氨基酚B.水楊酸C.對(duì)氨基苯甲酸D.游離肼E.其他甾體

529.可用于異煙肼鑒別的反應(yīng)有A.與氨制硝酸銀的反應(yīng)B.戊烯二醛反應(yīng)C.坂口反應(yīng)D.硫色素反應(yīng)E.二硝基氯苯反應(yīng)

53第二節(jié)喹啉類藥物的分析硫酸奎寧硫酸奎尼丁54奎寧和奎尼丁的分子式完全相同，但喹核堿部分立體結(jié)構(gòu)不同，因此其旋光性、堿性和溶解性能也不同?？鼘帪樽笮w，堿性大于奎尼丁。55

鹽酸環(huán)丙沙星5657（1）與氯化汞的反應(yīng)

硫酸奎寧58堿性喹啉環(huán)上的氮原子具有堿性，與強(qiáng)酸形成穩(wěn)定的鹽。其中環(huán)丙沙星與鹽酸成鹽，而奎寧和奎尼丁均與二元酸成鹽，結(jié)構(gòu)中喹核堿含脂環(huán)氮，堿性強(qiáng)，可與硫酸成鹽。而喹啉環(huán)系芳環(huán)氮，堿性較弱，不能與硫酸成鹽。59硫酸鹽在冰醋酸介質(zhì)中只能被滴定至生物堿的硫酸氫鹽。

（1）直接滴定硫酸鹽的測(cè)定60硫酸奎寧

(1)HClO4直接滴定時(shí)，反應(yīng)摩爾比為1∶3

61（2）加入高氯酸鋇消除硫酸的干擾后滴定硫酸奎寧反應(yīng)摩爾比為1∶2

621．非水溶液滴定法測(cè)定硫酸奎寧含量的反應(yīng)條件為

A．冰醋酸一醋酐為溶劑

B.高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定

C．1mol的高氯酸與?mol的硫酸奎寧反應(yīng)

D.僅用電位法指示終點(diǎn)

E．溴酚藍(lán)為指示劑

632.非水溶液滴定法測(cè)定硫酸奎寧原料的含量時(shí)，可以用高氯酸直接滴定冰醋酸介質(zhì)中的供試品，1摩爾硫酸奎寧需要消耗高氯酸的摩爾數(shù)為

A.1B.2C.3D.4E.5

643：[116—118]滴定反應(yīng)中

A.被測(cè)物與HClO4的摩爾比為1∶1

B.被測(cè)物與HClO4的摩爾比為1∶3

C.兩者均是

D.兩者均不是99x：116．硫酸奎寧片經(jīng)氯仿提取后用HClO4滴定（D）6599x：118.硫酸奎寧原料藥用HClO4滴定（B）66第三節(jié)托烷類藥物68生物堿鹽類的滴定置換滴定：

無(wú)機(jī)酸在冰醋酸中的酸性次序?yàn)椋焊呗人幔練滗逅幔钧}酸＞硫酸＞硝酸＞其它弱酸（磷酸、有機(jī)酸）69氫鹵酸鹽的測(cè)定加Hg(Ac)2以消除氫鹵酸對(duì)滴定的干擾。

70硫酸鹽的測(cè)定硫酸鹽在冰醋酸介質(zhì)中只能被滴定至生物堿的硫酸氫鹽。

71

（1）直接滴定硫酸阿托品

HClO4直接滴定時(shí)，反應(yīng)摩爾比為1∶172（2）加入高氯酸鋇消除硫酸的干擾后滴定硫酸阿托品一元堿不能滴定

73酸性染料比色法在適當(dāng)?shù)膒H介質(zhì)中741．硫酸阿托品在冰醋酸中用HClO4滴定1：1752.酸件染料比色法中，水相的pH值過(guò)小，則A.能形成離子對(duì)B.有機(jī)溶劑提取能完全C.酸性染料以陰離子狀態(tài)存在D.生物堿幾乎全部以分子狀態(tài)存在E.酸性染料以分子狀態(tài)存在

763：阿托品

95：111.具有酯結(jié)構(gòu)

95：112.為兩性化合物

95：113.顯較強(qiáng)堿性

95：114.用提取容量法測(cè)定

95：115.用堿性染料比色法（Y）（N）（Y）（Y）（N）77第四節(jié)吩噻嗪類藥物一、基本結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì)787980奮乃靜81癸氟奮乃靜82鹽酸氟奮乃靜83鹽酸三氟拉嗪84鹽酸二氧丙嗪85（一）結(jié)構(gòu)分析1.硫氮雜蒽母核（1）含S、N的三環(huán)共軛的大

體系，S、N與苯環(huán)形成p-

共軛——具有紫外吸收光譜特征86（2）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為-2價(jià)，具有還原性，易氧化呈色（3）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子有兩對(duì)孤對(duì)電子，易與金屬離子絡(luò)合呈色

872.取代基

R：脂烴胺基、哌嗪基，具堿性

R

：鹵素88（二）主要化學(xué)性質(zhì)

1.紫外與紅外吸收光譜本類藥物的紫外特征吸收，主要由母核三環(huán)的π系統(tǒng)所產(chǎn)生，一般具有三個(gè)峰值。即在204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm附近）和300～325nm（300nm附近）。最強(qiáng)峰多在250～265nm。89

2.位上的取代基（R′）不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移。其結(jié)構(gòu)中-2價(jià)的硫，易氧化，氧化產(chǎn)物砜及亞砜有四個(gè)吸收峰。吩噻嗪類藥物隨取代基R和R′的不同，產(chǎn)生不同的紅外吸收光譜。902.易被氧化呈色3.易與金屬離子絡(luò)合呈色4.堿性91二、鑒別試驗(yàn)（一）UV和IR奮乃靜ChP（2005）【鑒別】

（2）取本品，加無(wú)水乙醇制成每1ml中含7g的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在258nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，吸收度約為0.65。

92（3）本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集243圖）一致93（二）顯色反應(yīng)1.

氧化劑氧化顯色氧化劑硫酸、硝酸、過(guò)氧化氫奮乃靜ChP（2005）【鑒別】

（1）取本品5mg，加鹽酸與水各1ml，加熱至80℃，加入過(guò)氧化氫溶液數(shù)滴，即顯深紅色；放置后，紅色漸褪去。

94鹽酸異丙嗪ChP（2005）【鑒別】

（1）取本品約5mg，加硫酸5ml溶解后，溶液顯櫻桃紅色；放置后，色漸變深。（2）取本品約0.1g，加水3ml溶解后，加硝酸1ml，即生成紅色沉淀；加熱，沉淀即溶解，溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色。952.與鈀離子絡(luò)合顯色癸氟奮乃靜ChP（2005）【鑒別】

（2）取本品約5mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化鈀溶液3ml，即有沉淀生成，并顯紅色，再加過(guò)量的氯化鈀溶液，顏色變深。

96（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)癸氟奮乃靜ChP（2005）【鑒別】

（1）取本品15～20mg，加碳酸鈉與碳酸鉀各約0.1g，混勻，在600℃熾灼15～20分鐘，放冷，加水2ml使溶解，加鹽酸溶液（1→2）酸化，濾過(guò)，濾液加茜素鋯試液0.5ml，應(yīng)顯黃色。9798三、有關(guān)物質(zhì)檢查1.

癸氟奮乃靜及其注射液

TLC參比雜質(zhì)對(duì)照品法以鹽酸氟奮乃靜為對(duì)照品2.

其他藥物

TLC

高低濃度對(duì)比法99四、含量測(cè)定（一）非水溶液滴定法原料藥

HClO4在冰醋酸溶液中，具強(qiáng)氧化性，可氧化吩噻嗪類藥物產(chǎn)生紅色的氧化物，干擾指示劑終點(diǎn)的觀察。排除方法：（1）改用中性溶劑（2）加抗壞血酸（3）電位法指示終點(diǎn)

100（二）紫外分光光度法1.直接分光光度法鹽酸異丙嗪：片劑測(cè)定波長(zhǎng)為249nm（為910）；注射液為了消除抗氧劑維生素C（

max243nm）對(duì)測(cè)定的干擾，測(cè)定波長(zhǎng)改為299nm（為108）。101

同理，鹽酸氯丙嗪片劑測(cè)定波長(zhǎng)為254nm（為915）；注射液測(cè)定波長(zhǎng)改為306nm（為115）。

1022.萃取后分光光度法鹽酸氯丙嗪注射液1033.二階導(dǎo)數(shù)分光光度法鹽酸氯丙嗪注射液

抗氧劑維生素C的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線的一條直線，不干擾鹽酸氯丙嗪的測(cè)定

因此鹽酸氯丙嗪可從其二階導(dǎo)數(shù)光譜量取峰266nm～谷254nm距離，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量1044.萃取—雙波長(zhǎng)分光光度法（1）原理在待測(cè)組分（a）的最大吸收波長(zhǎng)（測(cè)定波長(zhǎng)，

1）處測(cè)定待測(cè)組分和干擾組分（b）吸收度的總和；另選一適當(dāng)波長(zhǎng)（參比波長(zhǎng)，

2）測(cè)定吸收度，并使干擾組分在測(cè)定波長(zhǎng)和參比波長(zhǎng)處的吸收度相等，即，而待測(cè)組分在這兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度的差值足夠大。105（2）定量依據(jù)樣品在二波長(zhǎng)下吸收度差值（

A）：106即，吸收度差值（

A）僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無(wú)關(guān)，干擾組分的干擾被消除。

107（3）必要條件

①

干擾組分在兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度相等

②待測(cè)組分在兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度相差足夠大108（4）應(yīng)用

①萃取除去抗氧劑的干擾109

②雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定排除氧化產(chǎn)物的干擾測(cè)定波長(zhǎng)254nm參比波長(zhǎng)277nm對(duì)照法定量110

（三）鈰量法自身指示終點(diǎn)或電位法、永停法指示終點(diǎn)111優(yōu)點(diǎn)：硫酸鈰作滴定劑具有高的氧化電位，且為一價(jià)還原；不存在對(duì)環(huán)取代基的副反應(yīng)，專屬性高。本法既可用于原料，亦可用于片劑的測(cè)定112（四）比色法1.鈀離子比色法反應(yīng)在pH2±0.1的緩沖液中進(jìn)行113優(yōu)點(diǎn)：

鈀離子比色法可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪類藥物的測(cè)定

11495：131．鹽酸氯丙嗪的含量測(cè)定方法有A.中和法B.非水滴定法C.紫外法D.旋光法E.鈰量法

11599x：87.中國(guó)藥典（1995年版）對(duì)鹽酸異丙嗪注射液的含量測(cè)定，選用299nm波長(zhǎng)處測(cè)定，其原因是

A.299nm處是它的最大吸收波長(zhǎng)

B.為了排除其氧化產(chǎn)物的干擾

C.為了排除抗氧劑的干擾

D．在299nm處，它的吸收系數(shù)最大

E.在其他波長(zhǎng)處，因其無(wú)明顯吸收

11699x：78.有氧化產(chǎn)物存在時(shí)，吩噻嗪類藥物的鑒別或含量測(cè)定方法為A.非水溶液滴定法B.紫外分光光度法C.熒光分光光度法D.鈀離子比色法E.pH指示劑吸收度比值法

117例1.中國(guó)藥典(2000年版)中地西泮原料藥中2-甲氨基-5-氯二苯酮的檢查法為A.TLCB.HPLCC.GCD.沉淀法E.顯色法

118例2.檢查鹽酸氯丙嗪中“有關(guān)物質(zhì)”時(shí)，采用的對(duì)照溶液為A.雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液B.標(biāo)準(zhǔn)“有關(guān)物質(zhì)”溶液C.供試品溶液D.供試液的稀釋溶液E.對(duì)照溶液

119例3.某藥物于酸性溶液中，加硫酸鈰試液則產(chǎn)生紅色，繼續(xù)滴加硫酸鈰試液，紅色由淺變深，繼由深又變淺直至紅色消失，該藥物應(yīng)為A.雌二醇B.氯丙嗪C.諾氟沙星D.硫酸鎂E.苯巴比妥鈉

120例4.吩噻嗪類藥物與鈀離子反應(yīng)，需在以下哪種酸性條件下進(jìn)行A.pH4B.pH3～3.5C.pH2±0.1D.pH1E.pH5

121第五節(jié)苯并二氮雜卓類藥物122123124硝西泮125氯硝西泮126奧沙西泮127鹽酸氟西泮128艾司唑侖129阿普唑侖130一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.苯并二氮雜卓母核弱堿性，UV2.結(jié)構(gòu)中的環(huán)一般比較穩(wěn)定，但在酸性溶液中可水解，形成相應(yīng)的二苯甲酮衍生物。1311323.含鹵素133二、鑒別試驗(yàn)（一）化學(xué)反應(yīng)

1.沉淀反應(yīng)134氯氮卓ChP（2005）【鑒別】（2）取本品約10mg，加鹽酸溶液（9→1000）10ml溶解后，加碘化鉍鉀試液1滴，即生成橙紅色沉淀。135阿普唑侖ChP（2005）【鑒別】（1）取本品約5mg，加鹽酸溶液（9→1000）2ml溶解后，分為兩份：一份加硅鎢酸試液1滴，即生成白色沉淀；另一份加碘化鉍鉀試液1滴，即生成橙紅色沉淀。1362.水解后重氮化—偶合反應(yīng)氯氮卓、艾司唑侖、奧沙西泮氯氮卓ChP（2005）【鑒別】

（1）取本品約10mg，加鹽酸溶液（1→2）15ml，緩緩煮沸15分鐘，放冷，溶液顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。1373.水解后呈茚三酮反應(yīng)地西泮4.硫酸—熒光反應(yīng)地西泮ChP（2005）【鑒別】

（1）取本品約10mg，加硫酸3ml，振搖使溶解，在紫外燈（365nm）下檢視，顯黃綠色熒光。138

氯氮卓——黃色艾司唑侖——亮綠色硝西泮——淡藍(lán)色1395.分解產(chǎn)物的反應(yīng)地西泮ChP（2005）【鑒別】

（2）取本品20mg，用氧瓶燃燒法（附錄ⅦC）進(jìn)行有機(jī)破壞，以5%氫氧化鈉溶液5ml為吸收液，燃燒完全后，用稀硝酸酸化，并緩緩煮沸2分鐘，溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。140（二）UV和IR（三）TLC141三、特殊雜質(zhì)的檢查（一）有關(guān)物質(zhì)的檢查1.地西泮中有關(guān)物質(zhì)的檢查地西泮的原料及片劑TLC高低濃度對(duì)比法1422.氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的檢查

USP（24）TLC氧化物、氨基物雜質(zhì)對(duì)照品法有關(guān)物質(zhì)參比雜質(zhì)對(duì)照品法

BP（1998）TLC高低濃度對(duì)比法3.氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的反相高效液相色譜法143（二）降解產(chǎn)物的檢查地西泮注射液分解產(chǎn)生2-甲氨基-5-氯二苯甲酮

HPLC主成分自身對(duì)照法144

1.峰面積歸一化法

取一定量供試品溶液進(jìn)樣，測(cè)定各雜質(zhì)及藥物的峰面積，計(jì)算各雜質(zhì)峰面積及其總和占總峰面積的百分率，不能超過(guò)限量。注意溶劑峰不應(yīng)計(jì)算在總峰面積內(nèi)。

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優(yōu)點(diǎn)：不需雜質(zhì)對(duì)照品，簡(jiǎn)便易行。缺點(diǎn)：檢測(cè)波長(zhǎng)處，各雜質(zhì)和藥物的吸收強(qiáng)度可能有差異，控制雜質(zhì)峰面積百分率不一定就是雜質(zhì)限量，準(zhǔn)確度差。1462.主成分自身對(duì)照法雜質(zhì)峰面積與主成分峰面積相差懸殊時(shí)應(yīng)用。方法：147分別進(jìn)樣，測(cè)定供試品溶液中各雜質(zhì)峰面積及其總和，與對(duì)照溶液主成分峰面積比較，控制供試品中雜質(zhì)的量。148優(yōu)點(diǎn)：不需雜質(zhì)對(duì)照品，可同時(shí)控制各個(gè)雜質(zhì)及其總量限度缺點(diǎn)：檢測(cè)波長(zhǎng)處，各雜質(zhì)和藥物的吸收強(qiáng)度可能有差異，準(zhǔn)確度差

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3.內(nèi)標(biāo)法測(cè)定供試品中雜質(zhì)的總量限度方法供試品→供試品溶液1

圖1供試品+內(nèi)標(biāo)→供試品溶液2圖2

150判斷若圖1無(wú)與內(nèi)標(biāo)峰保留時(shí)間相同的雜質(zhì)峰，則圖2中各雜質(zhì)峰面積之和應(yīng)小于內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰面積（溶劑峰不計(jì)在內(nèi)）151若圖1有與內(nèi)標(biāo)峰保留時(shí)間相同的雜質(zhì)峰，則將圖2上的內(nèi)標(biāo)峰面積減去圖1中此雜質(zhì)峰面積，得內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的校正面積；圖2中各雜質(zhì)峰面積加上圖1此雜質(zhì)峰面積，得各雜質(zhì)峰的校正總面積；各雜質(zhì)峰校正總面積應(yīng)小于內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的校正面積。152

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