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基因工程的基本工具與操作程序練習(xí)一、選擇題1.如圖表示由不同的限制酶切割而成的DNA末端及相關(guān)的酶作用位點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.甲、乙、丙都屬于黏性末端B.甲、乙片段可形成重組DNA分子,但甲、丙不能C.DNA連接酶的作用位點(diǎn)在圖乙中b處D.切割甲的限制酶不能識(shí)別由甲、乙片段形成的重組DNA分子2.T4DNA連接酶可將任意2個(gè)具有相同黏性末端的DNA片段連接在一起。該反應(yīng)過程需消耗ATP,其水解產(chǎn)生的腺苷一磷酸(AMP)通過共價(jià)鍵與酶相連,隨后AMP轉(zhuǎn)移至DNA片段,進(jìn)而完成連接反應(yīng)。下列敘述正確的是()A.T4DNA連接酶的底物種類較多,故其無專一性B.T4DNA連接酶催化反應(yīng)后,其組成成分已改變C.ATP在該反應(yīng)過程中可能打開兩個(gè)特殊的化學(xué)鍵D.T4DNA連接酶需保存于最適溫度和pH條件下3.大腸桿菌的質(zhì)粒-環(huán)狀DNA是基因工程的常用載體結(jié)構(gòu),如圖所示。下列敘述正確的是()A.①②③共同組成核糖核苷酸B.質(zhì)粒中的堿基遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則C.DNA連接酶會(huì)使化學(xué)鍵④重新連接D.若某種限制酶在質(zhì)粒上只有一個(gè)酶切位點(diǎn),則質(zhì)粒被切為兩個(gè)片段4.基因工程利用某目的基因(圖甲)和P1噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA。限制性內(nèi)切核酸酶BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ的酶切位點(diǎn)分別如圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是()A.構(gòu)建重組DNA時(shí),可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體B.構(gòu)建重組DNA時(shí),可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體C.圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后,含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D.用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體,再用DNA連接酶連接,只能產(chǎn)生一種重組DNA5.構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),可利用堿性磷酸單酯酶催化載體的5′-P變成5′-OH,如圖所示。將經(jīng)過該酶處理的載體與外源DNA連接時(shí),由于5′-OH與3′-OH不能連接而形成切口(nick)。下列說法錯(cuò)誤的是()A.經(jīng)堿性磷酸單酯酶處理的載體不會(huì)發(fā)生自身環(huán)化B.外源DNA也必須用堿性磷酸單酯酶處理C.T4DNA連接酶可連接黏性末端和平末端D.重組DNA經(jīng)過2次復(fù)制可得到不含nick的子代DNA6.TALEN是一種靶向基因操作技術(shù),該技術(shù)利用了TAL靶向識(shí)別單元對(duì)靶向基因的識(shí)別作用和Fokl蛋白對(duì)靶向基因的切割作用,實(shí)現(xiàn)了對(duì)特定靶向基因的敲除。TAL靶向識(shí)別單元為間隔32個(gè)氨基酸的雙連氨基酸(即兩個(gè)相連的氨基酸)序列。不同的雙連氨基酸分別與靶向基因中的A、T、C、G有恒定的對(duì)應(yīng)關(guān)系,根據(jù)靶向基因的堿基序列可以設(shè)計(jì)出雙連氨基酸序列。下列說法錯(cuò)誤的是()A.該技術(shù)應(yīng)該先推測(cè)出信使RNA序列,再推測(cè)出目的基因的核苷酸序列B.在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中,啟動(dòng)子應(yīng)位于基因的上游,它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位C.TALEN是一種靶向基因操作技術(shù),其中Fokl蛋白實(shí)質(zhì)上是一種限制酶D.雙連氨基酸能夠與含氮堿基A、T、C、G之間發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)7.OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四個(gè)基因分別編碼四種不同的酶,研究人員將這些基因分別與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽(引導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入葉綠體)基因連接,構(gòu)建多基因表達(dá)載體(載體中部分序列如圖所示),利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻,在水稻葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新代謝途徑,提高了水稻的產(chǎn)量。下列敘述正確的是()A.可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)四種酶在轉(zhuǎn)基因水稻中的表達(dá)量B.四個(gè)基因轉(zhuǎn)錄時(shí)都以DNA的同一條單鏈為模板C.應(yīng)選用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞D.四個(gè)基因都在水稻葉綠體內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄翻譯8.一種雙鏈DNA分子被兩種不同的限制酶切割,切割產(chǎn)物通過電泳分離,用大小已知的DNA片段的電泳結(jié)果作為分子量標(biāo)記(如圖左邊一列)。關(guān)于該雙鏈DNA,下列說法錯(cuò)誤的是()A.呈環(huán)狀結(jié)構(gòu)B.分子質(zhì)量大小為10kbC.有一個(gè)NotⅠ和兩個(gè)EcoRⅠ切割位點(diǎn)D.NotⅠ切割位點(diǎn)與EcoRⅠ切割位點(diǎn)的最短距離為2kb9.B基因存在于水稻基因組中,其僅在體細(xì)胞(2n)和精子(n)中正常表達(dá),在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響,設(shè)計(jì)了如圖實(shí)驗(yàn)(Luc基因表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光,融合基因表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.由于DNA聚合酶不能合成導(dǎo)致B基因在水稻卵細(xì)胞中不能轉(zhuǎn)錄B.過程①中T-DNA以雙鏈形式整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上C.過程②轉(zhuǎn)化篩選水稻愈傷組織時(shí),需在培養(yǎng)基中加入潮霉素D.可通過檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光來鑒定B基因是否表達(dá)10.如圖是“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的兩個(gè)操作步驟示意圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.選用植物細(xì)胞提取DNA時(shí)需先研磨破碎細(xì)胞B.圖2所示實(shí)驗(yàn)操作中有一處明顯錯(cuò)誤,可能導(dǎo)致試管2中藍(lán)色變化不明顯C.圖1所示操作的原理是DNA不溶于酒精,而某些蛋白質(zhì)溶于酒精D.圖2試管1的作用是證明2mol/L的NaCl溶液遇二苯胺試劑出現(xiàn)藍(lán)色11.科學(xué)家將蘇云金桿菌中的Bt抗蟲蛋白基因(抗蟲基因)導(dǎo)入棉花的愈傷組織細(xì)胞,鑒定后,將含抗蟲基因的受體細(xì)胞組織培養(yǎng)獲得棉花植株。經(jīng)棉鈴蟲飼喂實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)棉花植株并無抗蟲性狀,科學(xué)家提取棉花葉片細(xì)胞中的有關(guān)成分進(jìn)行了如下操作,下列分析不正確的是()A.提取細(xì)胞中的蛋白質(zhì),采用抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),若能檢測(cè)到Bt抗蟲蛋白,則可能是抗蟲基因表達(dá)效率低B.若經(jīng)A項(xiàng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無Bt抗蟲蛋白,可采用核酸分子雜交技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的RNA,若測(cè)到Bt抗蟲蛋白的mRNA,則可能是抗蟲基因能轉(zhuǎn)錄,但不能正常翻譯C.若經(jīng)B項(xiàng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無Bt抗蟲蛋白的mRNA,可采用核酸分子雜交技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的DNA,若能檢測(cè)到抗蟲基因,則可能是抗蟲基因反向插入載體DNA分子中D.若經(jīng)C項(xiàng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無抗蟲基因,則可能只是載體DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞12.為研究擬南芥的AtCIPK基因?qū)煵菘购的芰Φ挠绊?,科研人員將該基因轉(zhuǎn)入煙草得到甲、乙、丙三個(gè)轉(zhuǎn)基因品種,變量處理后的第7天檢測(cè)AtCIPK基因和抗干旱基因NtLE5的表達(dá)量,結(jié)果如表所示。下列分析錯(cuò)誤的是()煙草品種AtCIPK基因相對(duì)表達(dá)量NtLE5基因的表達(dá)量0天7天甲5.311.011.81乙5.521.051.83丙7.051.263.08丁00.980.95A.丁組與其他實(shí)驗(yàn)組在變量處理前都需要提供適宜光照和進(jìn)行干旱處理B.基因表達(dá)量的分析過程中存在U—A堿基配對(duì)C.除了檢測(cè)基因的表達(dá)量外,還需進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)D.AtCIPK基因的表達(dá)產(chǎn)物可能促進(jìn)NtLE5基因的表達(dá),從而提高植物對(duì)干旱的適應(yīng)性二、非選擇題13.枯草芽孢桿菌可分泌纖維素酶。研究者篩選到一株降解纖維素能力較強(qiáng)的枯草芽孢桿菌菌株(B菌),從中擴(kuò)增得到了一種纖維素酶(C1酶)基因。將獲得的C1酶基因與高效表達(dá)載體(HT質(zhì)粒)連接,再導(dǎo)入B菌,以期獲得降解纖維素能力更強(qiáng)的工程菌。(1)C1酶基因可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增時(shí)需要根據(jù)設(shè)計(jì)引物,引物的作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)對(duì)擴(kuò)增到的C1酶基因測(cè)序,與數(shù)據(jù)庫(kù)中的C1酶基因編碼序列相比有兩個(gè)堿基對(duì)不同,但兩者編碼出的蛋白質(zhì)的氨基酸序列相同,這是因?yàn)椤1酶基因在酶的作用下可與質(zhì)粒進(jìn)行體外連接,C1酶基因能與質(zhì)粒重組并在受體細(xì)胞中表達(dá)的遺傳學(xué)基礎(chǔ)是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)C1酶基因以B鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈,轉(zhuǎn)錄時(shí)mRNA自身的延伸方向?yàn)?′→3′。為了使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質(zhì)粒連接,擴(kuò)增C1酶基因時(shí)在其兩端添加了SmaⅠ和BamHⅠ的酶切位點(diǎn)。該基因內(nèi)部沒有這兩種酶切位點(diǎn)。圖1中酶切位點(diǎn)1和2所對(duì)應(yīng)的酶分別是________________________________________________________________________。(4)將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為三組,一組接種工程菌,對(duì)照組1不進(jìn)行處理,對(duì)照組2接種。在相同條件下培養(yǎng)96小時(shí),結(jié)果如圖2,說明工程菌降解纖維素的能力最強(qiáng)。預(yù)期該工程菌在處理廢棄物及保護(hù)環(huán)境方面可能的應(yīng)用是_____________________________________________________________________________________________________________________________(舉一例)。14.基因X的表達(dá)產(chǎn)物可保護(hù)損傷的神經(jīng)細(xì)胞??茖W(xué)家構(gòu)建了含X的基因表達(dá)載體(圖1),并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中,用于干細(xì)胞基因治療的研究。請(qǐng)據(jù)此回答下列問題。(1)構(gòu)建含X的基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)選擇圖1中的限制酶。(2)酶切后的載體和基因X進(jìn)行連接,可產(chǎn)生3種連接產(chǎn)物:?jiǎn)蝹€(gè)載體自連,基因X與載體正向連接、基因X與載體反向連接(如圖1所示)。為鑒定這3種產(chǎn)物,選擇EcoRⅠ酶和HindⅢ酶對(duì)篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切,并對(duì)酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析,結(jié)果如圖2所示。圖2中1、2、3泳道分別對(duì)應(yīng)的載體的連接方式是、、。(3)在培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過程中,可使用酶將細(xì)胞分散開。分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為。(4)當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí),需進(jìn)行培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞,用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)。15.普通番茄成熟后,細(xì)胞中的多聚半乳糖醛酸酶(簡(jiǎn)稱PG)能破壞細(xì)胞壁,使番茄軟化,不耐儲(chǔ)存。科研人員將抗PG基因?qū)敕鸭?xì)胞,成功培育出了轉(zhuǎn)基因番茄,能有效避免以上情況發(fā)生。如圖表示抗PG基因的作用原理,請(qǐng)回答相關(guān)問題。(1)據(jù)圖可知,抗PG基因轉(zhuǎn)錄形成的RNA阻止了過程,使細(xì)胞不能合成PG。據(jù)此判斷,抗PG基因和PG基因的序列是。(2)科研人員獲取抗PG基因,可從成熟番茄果實(shí)中獲取,通過逆轉(zhuǎn)錄最終得到PG基因。在PG基因和Ti質(zhì)粒構(gòu)建抗PG基因表達(dá)載體時(shí),利用的酶是,拼接過程中要注意的事項(xiàng)是。(3)將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌的過程,影響導(dǎo)入效率的因素,除了溫度、溶液pH等環(huán)境因素外,還有、、。(4)利用轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌侵染的番茄細(xì)胞,經(jīng)脫分化得到,再分化形成胚狀體,最終得到轉(zhuǎn)基因番茄。答案:1.C解析:由題圖可知,甲、乙、丙都屬于黏性末端,A正確;甲、乙的黏性末端相同,因此可在DNA連接酶的作用下形成重組DNA分子,甲、丙的黏性末端不同,它們之間不能形成重組DNA分子,B正確;DNA連接酶將兩個(gè)DNA片段連接為一個(gè)DNA分子,作用部位是磷酸二酯鍵,即圖乙中a處,C錯(cuò)誤;切割甲的限制酶的識(shí)別序列為GAATTC∥CTTAAG,而甲、乙片段形成的重組DNA分子序列為GAATTG∥CTTAAC,因此切割甲的限制酶不能識(shí)別由甲、乙片段形成的重組DNA分子,D正確。2.C解析:T4DNA連接酶有專一性,A錯(cuò)誤;酶在催化反應(yīng)前后性質(zhì)不變,故T4DNA連接酶催化反應(yīng)后,其組成成分不變,B錯(cuò)誤;ATP水解產(chǎn)生AMP需要打開兩個(gè)特殊的化學(xué)鍵,結(jié)合題干信息“該反應(yīng)過程需消耗ATP,其水解產(chǎn)生的腺苷一磷酸(AMP)通過共價(jià)鍵與酶相連”可推測(cè),ATP在該反應(yīng)過程中可能打開兩個(gè)特殊的化學(xué)鍵,C正確;T4DNA連接酶需在低溫和最適pH條件下保存,D錯(cuò)誤。3.B解析:①②③共同組成DNA的基本單位——脫氧核苷酸,A錯(cuò)誤;質(zhì)粒中的堿基遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,A與T配對(duì),G與C配對(duì),B正確;DNA連接酶使DNA片段重新連接,形成磷酸二酯鍵,磷酸二酯鍵是磷酸基團(tuán)與3號(hào)碳原子相連的化學(xué)鍵,圖中的④不屬于磷酸二酯鍵,C錯(cuò)誤;限制酶識(shí)別特定序列并在特定位點(diǎn)切割,環(huán)狀質(zhì)粒上若只有一個(gè)限制酶切位點(diǎn),則質(zhì)粒被切割為1個(gè)完整的DNA鏈狀片段,D錯(cuò)誤。4.D解析:由圖甲可知,用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體后形成的黏性末端相同,可任意連接,不止產(chǎn)生一種重組DNA,D錯(cuò)誤。5.B解析:將經(jīng)過該酶處理的載體與外源DNA連接時(shí),由于5′-OH與3′-OH不能連接而形成切口(nick),因此經(jīng)堿性磷酸單酯酶處理的載體不會(huì)發(fā)生自身環(huán)化,A正確;外源DNA不能用堿性磷酸單酯酶處理,如用堿性磷酸單酯酶處理,載體與外源DNA不能連接形成重組DNA,B錯(cuò)誤;T4DNA連接酶可連接黏性末端和平末端,C正確;DNA是半保留復(fù)制,重組DNA經(jīng)過2次復(fù)制,可得到2個(gè)不含nick的子代DNA,D正確。6.D解析:已知TAL靶向識(shí)別單元中雙連氨基酸序列和Fokl蛋白的氨基酸序列,可先推測(cè)出信使RNA序列,再推測(cè)出目的基因的核苷酸序列,利用化學(xué)法以單個(gè)核苷酸為原料合成目的基因,再通過PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,A正確;在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中,有啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因等,其中啟動(dòng)子位于基因的上游,它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,B正確;TALEN是一種靶向基因操作技術(shù),該技術(shù)利用了TAL靶向識(shí)別單元對(duì)靶向基因的識(shí)別作用和Fokl蛋白對(duì)靶向基因的切割作用,實(shí)現(xiàn)了對(duì)特定靶向基因的敲除,F(xiàn)okl蛋白實(shí)質(zhì)上是一種限制酶,C正確;只有含氮堿基之間能發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì),而雙連氨基酸不含有含氮堿基,D錯(cuò)誤。7.A解析:可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)四種酶在轉(zhuǎn)基因水稻中的表達(dá)量,雜交帶相對(duì)量越多,表明目的基因翻譯成的蛋白質(zhì)含量越高,A正確;由題圖可知,在同一個(gè)T-DNA中OsGLO1啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的方向與其他三個(gè)基因的不同,說明四個(gè)基因轉(zhuǎn)錄時(shí)并不都以DNA的同一條單鏈為模板,B錯(cuò)誤;卡那霉素抗性基因不在T-DNA中,而潮霉素抗性基因在T-DNA中,應(yīng)選用含潮霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞,C錯(cuò)誤;由題意可知,利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻,可使目的基因插入水稻細(xì)胞中染色體的DNA上,所以與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因連接的四個(gè)基因,在水稻細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,在核糖體中進(jìn)行翻譯,D錯(cuò)誤。8.D解析:?jiǎn)斡肊coRⅠ處理和利用EcoRⅠ和NotⅠ雙酶切時(shí)產(chǎn)生的結(jié)果不同,說明DNA含有NotⅠ酶切位點(diǎn),因?yàn)橛肗otⅠ處理只產(chǎn)生了一個(gè)10kb的條帶,說明該分子是環(huán)狀的,且長(zhǎng)度是10kb,A、B正確;單用EcoRⅠ處理后產(chǎn)生了4kb和6kb兩個(gè)條帶,說明該環(huán)狀DNA上含有2個(gè)EcoRⅠ切割位點(diǎn),C正確;用EcoRⅠ處理后產(chǎn)生的4kb的片段,進(jìn)一步被NotⅠ酶切為3kb和1kb,可知NotⅠ切割位點(diǎn)與EcoRⅠ切割位點(diǎn)的最短距離為1kb,最長(zhǎng)距離為3kb,D錯(cuò)誤。9.A解析:轉(zhuǎn)錄過程不需要DNA聚合酶,需要RNA聚合酶,A錯(cuò)誤;由題圖可知,過程①中T-DNA以雙鏈形式整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上,B正確;T-DNA上含有潮霉素抗性基因,因此過程②轉(zhuǎn)化篩選水稻愈傷組織時(shí),需在培養(yǎng)基中加入潮霉素,C正確;由于B基因與Luc基因連接形成B-Luc融合基因,因此可通過檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光來鑒定B基因是否表達(dá),D正確。10.D解析:選用植物細(xì)胞提取DNA時(shí),需將所選材料切碎,然后放入研缽中,充分研磨破碎細(xì)胞,A正確;圖2所示實(shí)驗(yàn)的試管中溶液的液面高于燒杯中的液面,可能導(dǎo)致加熱不充分,試管2中藍(lán)色變化不明顯,B正確;DNA不溶于酒精,但某些蛋白質(zhì)溶于酒精,利用這一原理,可初步分離DNA與蛋白質(zhì),C正確;圖2試管1起對(duì)照作用,目的是證明沸水浴條件下DNA遇二苯胺試劑出現(xiàn)藍(lán)色,而2mol/L的NaCl溶液遇二苯胺試劑不會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色,D錯(cuò)誤。11.D解析:由題干信息“鑒定后,將含抗蟲基因的受體細(xì)胞組織培養(yǎng)獲得棉花植株”可知,導(dǎo)入受體細(xì)胞的是重組DNA分子,D錯(cuò)誤。12.A解析:丁組與其他實(shí)驗(yàn)組在變量處理前都需要提供適宜的光照并澆水使其正常生長(zhǎng),變量處理時(shí),實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組再停止?jié)菜催M(jìn)行干旱處理,A錯(cuò)誤;檢測(cè)基因表達(dá)量時(shí)先提純RNA,用逆轉(zhuǎn)錄的方法得到DNA,定時(shí)定量分析特定基因的含量,用于反映轉(zhuǎn)錄的情況,此過程中存在U—A堿基配對(duì),B正確;除了檢測(cè)基因的表達(dá)量,實(shí)驗(yàn)還需比較轉(zhuǎn)基因煙草植株與普通煙草植株的生長(zhǎng)量,用于檢測(cè)轉(zhuǎn)基因煙草的抗旱能力,C正確;由圖中的數(shù)據(jù)可以看出,AtCIPK基因的相對(duì)表達(dá)量與抗干旱基因NtLE5的表達(dá)量存在正相關(guān)關(guān)系,說明AtCIPK基因的表達(dá)產(chǎn)物可能促進(jìn)NtLE5基因的表達(dá),從而提高植物的抗旱能力,D正確。13.(1)C1酶基因的脫氧核苷酸序列使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸(2)由于密碼子的簡(jiǎn)并,堿基改變后仍然編碼同一種氨基酸DNA連接目的基因與質(zhì)粒具有相同的組成單位和雙螺旋結(jié)構(gòu),且不同生物所用密碼子相同(3)BamHⅠ、SmaⅠ(順序不能調(diào)換)(4)等量B菌或適量纖維素酶(C1酶)降解秸稈,減少秸稈燃燒帶來的空氣污染解析:(1)利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增C1酶基因需要根據(jù)C1酶基因的脫氧核苷酸序列設(shè)計(jì)引物,引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物3′端開始連接脫氧核苷酸。(2)由于密碼子的簡(jiǎn)并,堿基改變后仍然能編碼同一種氨基酸,故這兩個(gè)基因雖然有兩個(gè)堿基對(duì)不同,但可編碼出氨基酸序列相同的蛋白質(zhì)。C1酶基因在DNA連接酶的作用下可與質(zhì)粒進(jìn)行體外連接,由于基因與質(zhì)粒具有相同的組成單位和雙螺旋結(jié)構(gòu),且不同生物所用的密碼子相同,故C1酶基因能與質(zhì)粒重組并在受體細(xì)胞中表達(dá)。(3)C1酶基因以B鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈,轉(zhuǎn)錄時(shí)mRNA自身的延伸方向?yàn)?′→3′,即轉(zhuǎn)錄是從DNA鏈的3′端開始,再結(jié)合質(zhì)粒中啟動(dòng)子的方向可知,圖
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