液相色譜儀的維護與常見故障

關于液相色譜儀的維護與常見故障一液相色譜儀的

日常維護第2頁,共45頁，2024年2月25日，星期天儲液器和流動相

使用HPLC試劑做流動相，用前最好過0.45μm膜,除去微粒物質;更換流動相時,應徹底清洗儲液器，防止交叉污染，更換不互溶流動相時，選擇好中間試劑。

流動相務必要脫氣，否則出現氣泡，引起輸液不暢，使噪聲漂移增大，影響檢測限。

第3頁,共45頁，2024年2月25日，星期天儲液器和流動相流動相的溫度不要與室溫相差太大，否則會產生氣泡，導致基線漂移不穩(wěn)。

使用緩沖鹽溶液做流動相時，最好現用現配，用前過濾，避免在陽光下暴曬。定期清潔儲液器及附件，防止長微生物堵塞吸濾器。第4頁,共45頁，2024年2月25日，星期天輸液泵泵壓力不要太高,要適當調整壓力,一般壓力上限在10-20MPa，下限為0.5MPa，注意防止因泵堵塞造成壓力過高損壞柱塞桿或燒壞電機。

密封墊易損壞引起故障，每天實驗結束一定要認真沖洗泵,注意防止堵塞,使用緩沖鹽流動相時,更要小心。第5頁,共45頁，2024年2月25日，星期天進樣器

樣品溶液進樣前應該用0.45μm膜過濾，減少顆粒對進樣閥的磨損；

轉動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，會使泵壓劇增，再轉到進樣位置時，過高的壓力會使柱頭受損；

第6頁,共45頁，2024年2月25日，星期天進樣器

停機前一定沖洗干凈進樣器內殘留的樣品或緩沖鹽，防止樣品和無機鹽沉積造成進樣閥轉子面磨損或堵塞。注射器最好使用儀器自配尖頭、平頭針，不要用其它儀器的。第7頁,共45頁，2024年2月25日，星期天進樣器

自動進樣器的清洗液，最好使用與流動相相同的溶液，若含鹽分，要出去鹽分；

清洗液最好也脫氣使用，清洗液也要經常更換，避免出現氣泡和沉淀。第8頁,共45頁，2024年2月25日，星期天柱—防止柱性能下降

1溶劑的化學腐蝕性不能太強；

2避免顆粒物在柱頭沉降；

3柱壓不能太高，防止沖擊太大；

4流動相pH值小于7時，最好用

大粒度同種填料的予柱；

第9頁,共45頁，2024年2月25日，星期天柱—防止柱性能下降

5柱頭加濾片（燒結不銹鋼),需要時加保護柱；

6經常用不同的溶劑清洗柱；

7長時間不用時要保存好,一定要洗去緩沖鹽,加入大于10%有機溶劑，將柱兩端擰緊,保持柱填料濕潤。第10頁,共45頁，2024年2月25日，星期天檢測器

保持檢測器清潔非常重要，每天用后與色譜柱一起反復清洗；不定期用強溶劑反向沖洗檢測器；沖洗時使用脫過氣的流動相，防止氣泡滯留在池內；檢測器光源（燈）有一定壽命，不用時可以不開燈。第11頁,共45頁，2024年2月25日，星期天記錄器數據處理系統(tǒng)記錄儀:

熱敏式打印頭要注意記錄紙的質量,開機前注意檢查走紙部件,不要卡紙.色譜工作站:

防止網上病毒損壞軟件.第12頁,共45頁，2024年2月25日，星期天二常見故障的排除第13頁,共45頁，2024年2月25日，星期天1、儲液器和流動相1）噪聲大，出毛刺--脫氣不充分超聲脫氣,

真空脫氣,用He脫氣,

加熱回餾脫氣,(混合流動相不宜)第14頁,共45頁，2024年2月25日，星期天1、儲液器2）流動相供給不暢，泵壓力不穩(wěn)流動相接近用完過濾器堵塞（有顆粒，長霉）流速過高,阻力大,造成空化現象.解決的辦法是:降低流速;換大孔過濾器;加大管路內徑;抬高儲液器.第15頁,共45頁，2024年2月25日，星期天1、儲液器和流動相3）產生有規(guī)則的噪聲；基線上升，梯度洗脫出鬼峰；原因:儲液器或流動相被污染；

溶劑質量差（含雜質多）；配制流動相的玻璃器皿不清潔,有微生物影響；配制流動相的操作不當（過濾、脫氣、攪拌)。第16頁,共45頁，2024年2月25日，星期天2、輸液泵1）單向閥

a.球和閥座粘在一起，堵死，打不出溶劑，(特別是緩沖鹽流動相)

用高質量（純度高、脫過氣）的不同極性的溶劑沖洗,如水、甲醇、異丙醇、二氯甲烷；

更換新單向閥。第17頁,共45頁，2024年2月25日，星期天2、輸液泵b.球和閥座密封不嚴，壓力不穩(wěn)，氣泡進入閥中，緊貼在閥體內，使球難以返回閥座，引起倒流，壓力和流速變化大，可能有小晶體顆粒。清除氣泡的辦法：打開排液閥，大流量沖洗，用脫過氣的甲醇沖洗，一般可解決問題。第18頁,共45頁，2024年2月25日，星期天2、輸液泵2）泵墊圈磨損或破碎，高壓下壓力不穩(wěn)，從泵頭往外滲漏流動相，色譜峰的保留時間會改變。解決辦法：更換新墊圈。更換方法按維修說明書上的方法一步步操作。第19頁,共45頁，2024年2月25日，星期天2、輸液泵注意：輸液泵的墊圈要和流動相匹配協(xié)調。多數墊圈和流動相是協(xié)調的,但有的墊圈適用于甲醇、水、乙腈，在四氫呋喃中溶解、變粘、變軟。需換墊圈時,應向廠商咨詢墊圈的規(guī)格型號。色譜工作者一般應學會換密封墊圈。第20頁,共45頁，2024年2月25日，星期天2、輸液泵3）柱塞桿故障長期使用柱塞桿被磨損，漏液；因使用不當被折斷；柱塞桿被卡住，不能運動。

解決的辦法是更換新柱塞桿請維修工程師幫助解決，或參照專門的操作手冊自己動手更換。第21頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)a.滲漏轉子密封墊圈松緊不合適；墊圈不配套；組裝不對。

手動進樣系統(tǒng)器第22頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)

b.堵塞,

樣品打不進去。樣品管堵塞：環(huán)管用反沖法或超聲清洗排除（或換新管).

手動進樣系統(tǒng)第23頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)c.注樣孔問題

1)裝樣時針頭周圍滲漏：孔道堵塞，或者放空管和樣品管太細，阻力太大；針頭密封管規(guī)格不對，針頭太細。

手動進樣系統(tǒng)第24頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)c.注樣孔問題

2)注射孔滲漏：放空管有虹吸現象，轉子密封面上孔之間有磨損。為防止虹吸,放空管末端應在放空瓶液面以上,更換磨損的轉子.

手動進樣系統(tǒng)第25頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)c.注樣孔問題

3)樣品滯留閥在進樣位置停留時間不夠。要求停留時間至少應讓流動相流過的體積是環(huán)體積的10-20倍。

(一般是在下一針進樣前才將閥扳到裝樣位置)

手動進樣系統(tǒng)第26頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)3)樣品滯留殘留樣品留在樣品環(huán)中或注射器中，或從放空管中虹吸回來,污染下一個樣品.此時可用5-10倍的流動相或新樣品沖洗注射孔和注射器,若是虹吸,應加限制管。手動進樣系統(tǒng)第27頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)3)樣品滯留管路接頭有死體積滯留樣品，很難沖洗干凈,此時應檢查裝配情況，確定是否需換新配件。手動進樣系統(tǒng)第28頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)a.樣品瓶不配套瓶小——針彎、折斷瓶大——樣品少，抽不上樣瓶破碎更換合適的樣品瓶。

自動進樣系統(tǒng)第29頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)b.更換樣品瓶隔墊，防止污染。c.進樣器針頭堵塞（樣品、緩沖

鹽、隔墊碎片、針頭本身)，可用溶劑清洗，金屬絲疏通，或換新針頭。

自動進樣系統(tǒng)第30頁,共45頁，2024年2月25日，星期天3、進樣系統(tǒng)d.樣品滯留：空白溶劑出色譜峰.

加倍清洗，或調整樣品瓶順序，（從低濃度開始，高濃度放后面）或在樣品瓶前放清洗液瓶.

自動進樣系統(tǒng)第31頁,共45頁，2024年2月25日，星期天4、色譜柱

1)塔板數下降

a.樣品處理不合適，選擇適當的樣品凈化方法，選擇合適流動相。

b.柱頭塌陷，填裝修補。

第32頁,共45頁，2024年2月25日，星期天4、色譜柱2)峰形變壞，出現拖尾峰，分叉峰，非高斯峰,

與塔板數下降有關;峰形壞保留時間不變可能是柱堵塞(篩板堵塞、緩沖鹽析出、強保留物累積)，或柱頭有空穴。緩沖鹽、離子對試劑，可用甲醇-水沖洗，強保留物累積，可用甲醇-乙腈沖洗，篩板堵塞，可用甲醇-水反沖，更換篩板。第33頁,共45頁，2024年2月25日，星期天4、色譜柱

3)柱壓突然增大樣品沉積在柱內,用能溶解樣品的溶劑沖洗（將檢測器和柱斷開）可正向沖，反向沖。柱內硬件有問題： 濾片堵塞，換新濾片;

柱頭塌陷,用相同填料填充、修補。第34頁,共45頁，2024年2月25日，星期天4、色譜柱4)保留時間改變

不同柱保留時間的變化,主要是填料差異造成的,不同牌號柱出峰順序不變，保留時間有小的變化。若峰順序變化，保留時間變化較大，應考慮換柱或優(yōu)化分離條件。對專門的分析最好用同一批號的柱子。第35頁,共45頁，2024年2月25日，星期天由色譜柱引起的故障故障現象解決辦法過濾片堵塞

壓力增高、N下降、峰形差倒柱沖洗或換過濾片柱頭塌陷峰分叉、N下降修補柱頭健合相流失保留值改變、峰形差、N下降換柱樣品堵塞壓力高用能溶解樣品的溶劑沖洗強吸收樣品N下降、保留值小強溶劑反沖第36頁,共45頁，2024年2月25日，星期天5、檢測器基線噪聲大,靈敏度低,燈（光源）的故障；

氘燈壽命:1000h

汞燈和鎢燈壽命:2000h

一般使用6個月以上可能接近壽命期限,可以考慮更換新燈.

紫外—可見光檢測器第37頁,共45頁，2024年2月25日，星期天5、檢測器b.流動池內有氣泡用脫氣甲醇，不同流量沖洗。c.池堵塞（入口、出口、池內）用可溶堵塞物的溶劑沖洗（緩沖鹽用水沖洗),d.池污染用異丙醇、二氯甲烷、6mol/LHNO3

沖洗.

紫外—可見光檢測器第38頁,共45頁，2024年2月25日，星期天5、檢測器e.測量池和參比池失配

UV以空氣為參比，一般不扣流動相本底，若用有紫外吸收的流動相，參比信號不為零，會出現倒峰和偽峰,此時，選擇合適的流動相。

紫外—可見光檢測器第39頁,共45頁，2024年2月25日，星期天5、檢測器f.時間常數選擇(過濾噪聲）有的儀器有固定的時間常數，有的需設置時間常數。時間常數太小,噪聲增大;時間常數太大,出現寬峰、拖尾或矮峰。時間常數的設置一般根據經驗估計，小顆粒柱常數小，可選最窄峰寬的1/10作為時間常數,對4.6×(150-250)mm，5um柱，可選0.5sor1s

紫外—可見光檢測器第40頁,共45頁，2024年2月25日，星期天5檢測器

紫外—可見光檢測器

g.非線性響