消毒與滅菌的效果監(jiān)測(cè)

關(guān)于消毒與滅菌的效果監(jiān)測(cè)醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范1.消毒與滅菌的基本原則；2.清洗與清潔，消毒與滅菌方法；3.清潔、消毒與滅菌的效果監(jiān)測(cè)。第2頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天院感相關(guān)標(biāo)本壓力蒸汽滅菌第3頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天空氣樣本的采集采樣要求提出選擇室內(nèi)消毒后或醫(yī)療活動(dòng)之間進(jìn)行空氣標(biāo)本的采樣，或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)采樣，使用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板采樣。（注意：采樣前，關(guān)閉門、窗，在無人走動(dòng)的情況下，靜止10min后采樣。）采樣高度（沉降法）平板置距地面垂直高度0.8m～1.5m處。第4頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天空氣樣本的采集布點(diǎn)方法室內(nèi)面積≥30㎡，設(shè)一條對(duì)角線上取3點(diǎn)采樣，即中心一點(diǎn)，兩端各距離墻1m處各取一點(diǎn)；室內(nèi)面積＞30㎡，設(shè)東、南、西、北、中5點(diǎn)采樣，其中東、南、西、北點(diǎn)距離墻1m。采樣方法將直徑9cm普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板放置各采樣點(diǎn)，將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露5min后蓋上平皿蓋及時(shí)送檢。第5頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天空氣樣本的檢測(cè)與報(bào)告檢測(cè)培養(yǎng)將送檢平皿置36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)，若懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)，進(jìn)行目標(biāo)微生物的鑒定。結(jié)果處理計(jì)算所有平板菌落數(shù)，按公式換算結(jié)果。如臨床科室要求培養(yǎng)致病菌，則挑取可疑菌落進(jìn)行鑒定。計(jì)算公式：每個(gè)房間所有平板菌落總數(shù)/采樣點(diǎn)/（皿．暴露時(shí)間）報(bào)告:沉降法按平均每皿的菌落數(shù)報(bào)告：cfu/（皿．暴露時(shí)間）例如：2cfu/(5min·直徑9cm平皿)。第6頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天空氣樣本的結(jié)果判定

１.潔凈手術(shù)部（室）和其他潔凈場(chǎng)所，空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)要求應(yīng)遵循ＧＢ50333．第7頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天２.非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤４cfu／（１５ｍｉｎ·直徑９ｃｍ平皿）。３.兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗(yàn)室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤

4cfu/(5min·直徑9cm平皿)。第8頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天物體表面標(biāo)本的采集采樣時(shí)間在消毒處理后或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)進(jìn)行采樣。第9頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天物體表面標(biāo)本的采集采樣方法用5cmx5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無菌生理鹽水的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣4個(gè)規(guī)格板面積，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。剪去手接觸部分，將拭子放入裝有10ml物表采樣液試管中送檢。門把手等小型物體則利用棉拭子直接涂抹物體表面采樣。采樣物體表面有消毒劑殘留時(shí)，采樣液應(yīng)含相應(yīng)中和劑。第10頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天物體表面標(biāo)本的檢測(cè)與報(bào)告檢測(cè)方法：充分震蕩采樣管后，取洗脫液1.0ml接種平皿，將冷至40℃-45℃的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15ml-20ml，37℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)，懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)，進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測(cè)。計(jì)算公式：物體表面細(xì)菌菌落數(shù)總數(shù)（cfu/cm2）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)/采樣面積。報(bào)告方式：菌落數(shù)cfu/cm2

小型物體表面的結(jié)果用cfu/件表示第11頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天物體表面標(biāo)本的結(jié)果判定1.潔凈手術(shù)部、其他潔凈場(chǎng)所，非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)等；物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≤5cfu/cm2。2.兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)室、血液透析中心（室）、急診室、化驗(yàn)室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房等，物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≥10cfu/cm2第12頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)指示菌株：嗜熱脂肪桿菌芽孢采樣方法：將指示劑放置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中，置于壓力蒸汽滅菌器內(nèi)最難滅菌的位置處，執(zhí)行正常滅菌過程，完畢后將指示劑送檢。第13頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)檢測(cè)方法：將指示菌片捏碎，放入56℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，觀察結(jié)果。如指示菌片顏色為紫色，說明無嗜熱脂肪桿菌生長(zhǎng)；如指示劑顏色為黃色則說明有嗜熱脂肪桿菌生長(zhǎng)。報(bào)告方式：“檢出/未檢出嗜熱脂肪桿菌”。結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陽(yáng)性，則滅菌不合格；同時(shí)應(yīng)進(jìn)一步鑒定試驗(yàn)組陽(yáng)性的細(xì)菌是否為指示菌或是污染所致。第14頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天皮膚表面標(biāo)本的采集采樣時(shí)間按照產(chǎn)品使用說明規(guī)定的作用時(shí)間，達(dá)到消毒效果后及時(shí)采樣。采樣方法同物體表面標(biāo)本，不規(guī)則的皮膚可用棉拭子直接涂擦采樣。第15頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天醫(yī)護(hù)人員手表面標(biāo)本的采樣采樣時(shí)間在接觸病人或從事醫(yī)療活動(dòng)前進(jìn)行采樣。第16頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天醫(yī)護(hù)人員手表面標(biāo)本的采樣采樣面積及方法被檢人五指并攏，用浸有無菌生理鹽水的無菌拭子在雙手指曲面從指根到指端來回涂擦各兩次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子（一只手涂抹面積30cm2），剪去手接觸部位，將拭子放入裝有10ml物表采樣液的試管中送檢。第17頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天皮膚表面標(biāo)本檢測(cè)方法計(jì)算公式同物體表面報(bào)告方式計(jì)算公式：物體表面細(xì)菌菌落數(shù)總數(shù)（cfu/cm2）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)/采樣面積。

第18頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天皮膚表面標(biāo)本的結(jié)果判斷結(jié)果判定：皮膚消毒效果的判定標(biāo)準(zhǔn)遵循WS/T313中外科手消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。a)衛(wèi)生手消毒，監(jiān)測(cè)的細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤10cfu/cm2。b)外科手消毒，監(jiān)測(cè)的細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤5cfu/cm2。第19頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天消毒液的送檢采樣要求采集使用中的消毒劑。采集方法用無菌注射器抽取1ml被檢樣液，加入9ml消毒中和液，混勻。第20頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天消毒液的培養(yǎng)與報(bào)告培養(yǎng)方法：同物體表面標(biāo)本計(jì)算公式：消毒液染菌量（CFU/mL）=平均每皿菌落數(shù)×10×稀釋倍數(shù)報(bào)告方式：菌落數(shù)CFU/mL。結(jié)果判斷：

使用中滅菌用消毒液：無菌生長(zhǎng)；

使用中皮膚黏膜消毒液染菌量≤10CFU/mL；

其他使用中消毒液染菌量≤

100CFU/mL。第21頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天清潔用品的采樣采樣時(shí)間

消毒后、使用前進(jìn)行采樣。采樣方法

布巾、地巾等物品可用無菌的方法剪取1cm×3cm，直接投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌生理鹽水中，及時(shí)送檢。第22頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天清潔用品的報(bào)告與結(jié)果判斷檢測(cè)方法：將采樣管在混勻器上振蕩20s或用力振打80次，取采樣液檢測(cè)致病菌。報(bào)告方式：檢出/未檢出細(xì)菌或真菌，報(bào)告為“檢出××菌”。結(jié)果判定：

未檢出致病菌為消毒合格。第23頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天其他標(biāo)本內(nèi)鏡樣本的采樣用10ml中和液反復(fù)沖洗鏡后取回收液于試管中送檢。透析液的采樣用滅菌試管無菌操作采集透析液5ml送檢。第24頁(yè),共27頁(yè)，2024年2月25日，星期天內(nèi)鏡標(biāo)本的檢測(cè)與報(bào)告培養(yǎng)方法：同物體表面標(biāo)本，若臨床要求培養(yǎng)致病菌，則收到標(biāo)本后，取0.1ml均勻接種于普通瓊脂培養(yǎng)基表面，放入35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，觀察結(jié)果。檢出細(xì)菌時(shí)，則挑取可疑菌落進(jìn)行鑒定。計(jì)算公