環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥

環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第1頁試驗一

微生物細(xì)胞計數(shù)環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第2頁

目標(biāo)要求1.了解血球計數(shù)板結(jié)構(gòu)及計數(shù)原理。2、掌握使用血球計數(shù)板進(jìn)行微生物計數(shù)方法。

環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第3頁試驗原理

測定微生物數(shù)量方法很多，通常采取有顯微鏡直接計數(shù)法、平板計數(shù)法和光電比濁計數(shù)法。

顯微鏡直接計數(shù)法

將小量待測樣品懸浮液置于一個尤其含有確定面積和容積載玻片上，又稱血球計數(shù)板，于顯微鏡下直接計數(shù)一個簡便、快速、直觀方法。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第4頁血球計數(shù)板結(jié)構(gòu)環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第5頁血球計數(shù)板計算方法血球計數(shù)板上刻有一長寬各為1毫米方形大格，其體積為0.1mm3。計數(shù)板有兩種刻度，一個是每大格分為16個中格，而每中格又分25個小格，每大格為16×25小格=400小格，而另一個，則是每大格分為25個中格，而每中格又分為16個小格，則每大格為25×16=400小格（計數(shù)板上標(biāo)識為XB·K25）計數(shù)時，假如使用16格×25格規(guī)格計數(shù)室，要按對角線位，取左上、右上、左下、右下4個中格（即100個小格）酵母菌數(shù)。假如使用25格×16格規(guī)格計數(shù)室除了取其4個對角方位外，還需再數(shù)中央一個中格(即80個小方格)酵母菌數(shù)。

(6)當(dāng)碰到位于大格線上酵母菌，普通只計數(shù)大方格上方和左方線上酵母細(xì)胞(或只計數(shù)下方和右方線上酵母細(xì)胞)。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第6頁計數(shù)公式(1)16×25血球計數(shù)板計算公式：酵母細(xì)胞數(shù)／ml=（100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)／100）×400×10000×稀釋倍數(shù)(2)25x16血球計數(shù)板計算公式：酵母細(xì)胞數(shù)／ml=（80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)／80）×400×10000×稀釋倍數(shù)環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第7頁試驗器材

顯微鏡、血球計數(shù)板、酵母菌液、蓋玻片、吸管、吸水紙。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第8頁操作步驟1.鏡檢計數(shù)室對計數(shù)板進(jìn)行鏡檢。若有污物，則用自來水沖洗，用電吹風(fēng)吹干后才能進(jìn)行計數(shù)。2.加樣品在血球計數(shù)板上蓋上蓋玻片,用滴管將搖勻酵母菌液由蓋玻片邊小槽滴一小滴,菌液會自動進(jìn)入計數(shù)室，靜置5分鐘。3.計數(shù)將血球計數(shù)板置于載物臺上，先用低倍鏡找到計數(shù)室位置，再換高倍鏡計數(shù)。25個中格取計數(shù)板四角和中間位置五個中方格計菌數(shù)。重復(fù)計2-3次，取其平均值，按公式計算每毫升酵母菌液中菌體個數(shù)。4.清洗血球計數(shù)板計數(shù)后將血球計數(shù)板用自來水沖洗潔凈，勿用硬物刷，吹干后鏡檢。若不潔凈，則必須重復(fù)洗滌潔凈為止。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第9頁結(jié)果統(tǒng)計

第一個中格第二個中格第三個中格第四個中格第五個中格第一次測定第二次測定第三次測定平均環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第10頁思索題1.使用血球計數(shù)板應(yīng)注意什么問題?2.試分析影響本試驗結(jié)果誤差起源并提出改進(jìn)辦法環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第11頁試驗二

培養(yǎng)基配制和滅菌

環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第12頁試驗?zāi)繕?biāo)1.熟悉玻璃器皿洗滌和滅菌前準(zhǔn)備。2.掌握培養(yǎng)基和無菌水制備方法。3.掌握高壓蒸氣滅菌技術(shù)。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第13頁試驗原理培養(yǎng)基是用人工方法將各種營養(yǎng)物質(zhì)按微生物生長代謝需要配制成一個營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基中均應(yīng)含有滿足微生物生長發(fā)育且百分比適當(dāng)水分、碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長原因以及一些特需微量元素外還應(yīng)含有適宜酸堿度〔pH值〕、緩沖能力、氧化還原電位和滲透壓。

環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第14頁試驗器材(1)藥品和試劑：牛肉膏、蛋白陳、NaCl、10％NaOH溶液、l0％鹽酸溶液、瓊脂、水(2)器材：小燒杯、小鋁鍋、天平、牛角匙、1000mL刻度燒杯、玻棒、玻璃珠、pH試紙、試管、分裝漏斗、棉花。高壓蒸氣滅菌鍋、烘箱。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第15頁試驗步驟一、玻璃器皿洗滌和包裝清洗并烘干玻璃器皿：如培養(yǎng)皿、移液管、試管等。棉塞制作包裝培養(yǎng)皿和移液管等。

2-1棉塞制作方法2-2移液管滅菌前包裝環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第16頁二、培養(yǎng)基配制

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配制（一）培養(yǎng)基配方：

牛肉膏2.5g蛋白胨5.0g、NaCl2.5g、瓊脂10.0g、自來水500mL、pH7.2~7.4。（二）操作步驟：

1.取一個1000mL燒杯，裝500mL蒸餾水。2.按配方逐一正確稱取各種成份，依次加入水中溶解。注意：a.前一個成份溶解之后，才能加入下一個成份b.蛋白胨、肉膏可加熱促進(jìn)溶解c.加熱過程應(yīng)不停攪拌，以免糊底燒焦，并適當(dāng)補充因蒸發(fā)而損失水量。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第17頁

3.調(diào)pH值：用10％NaOH調(diào)pH至7.2~7.4，用精密pH試紙對照。

4.過濾

液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾，固體培養(yǎng)基可用4層紗布趁熱過濾，以利結(jié)果觀察。不過供普通使用培養(yǎng)基，該步可省略。

5.分裝：將培養(yǎng)基分裝于5支試管，其余全部倒入250mL錐形瓶中，分別塞上棉塞。分裝時可用漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上面造成污染(見圖2－3)。分裝量：固體培養(yǎng)基約為試管高度1／5，滅菌后制成斜面（圖2－4）。分裝入錐形瓶內(nèi)以不超出其容積3/5為宜。半固體培養(yǎng)基以試管高度1/3為宜．滅菌后垂直待凝。注意不要污染棉塞和瓶口。

6.包扎成捆，掛上標(biāo)簽，注明何種培養(yǎng)基。

7.滅菌備用：滅菌條件：1210C（相當(dāng)蒸汽壓力0.103MPa）培養(yǎng)基滅菌后必須在37℃下恒溫培養(yǎng)24h，確定無菌生長，方可使用。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第18頁

圖例

圖2－3培養(yǎng)基分裝圖2－4斜面制作環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第19頁三、稀釋水制備1.取一個250mL錐形瓶裝90(或99)mL蒸餾水，放30顆玻璃珠(用于打破活性污泥、菌塊或土壤顆粒)于錐形瓶內(nèi)，塞棉塞、包扎，待滅菌。2.另取5支18mm×180mm試管，分別裝9mL蒸餾水，塞棉塞、包扎，待滅菌。無菌稀釋水為微生物分離試驗中所需要材料。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第20頁四、滅菌加熱滅菌有干熱滅菌和濕熱滅菌。干熱滅菌法：電熱烘箱作為干熱滅菌器干熱滅菌操作方法a.將待滅菌物品放入恒溫箱，將溫度調(diào)整至160℃并維持2h；b.把恒溫箱調(diào)整旋鈕調(diào)回零處，待溫度降到50℃左右，才能將物品取出。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第21頁濕熱滅菌：高壓蒸氣滅菌法

高壓蒸氣滅菌法操作步驟以下：1.滅菌鍋內(nèi)加入一定量水。2.將待滅菌物品放入鍋內(nèi)，并關(guān)嚴(yán)鍋蓋。

注意：器物不能裝得太滿。3.接通電源，進(jìn)行加熱。4.排除高壓鍋內(nèi)冷空氣，可將排氣閥打開，待溫度計指示溫度為100℃時關(guān)閉排氣閥；或當(dāng)排出蒸氣相當(dāng)猛烈且微帶藍(lán)色時關(guān)閉排氣閥。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第22頁5.當(dāng)壓力達(dá)1.05kg/cm2(滅菌器內(nèi)溫度為121℃)即開始滅菌，使其維持15～30min。對熱不穩(wěn)定培養(yǎng)基如含有葡萄糖、氨基酸等物質(zhì)時，應(yīng)適當(dāng)降低壓力(0.56kg/cm2)，延長時間。6.滅菌時間一到，切斷電源，待壓力降至零時，才能打開排氣閥，然后打開滅菌器蓋，取出物品，排出鍋內(nèi)剩下水。7.待培養(yǎng)基冷卻后置于37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h，若無菌生長則放入冰箱或陰涼處保留備用。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第23頁間歇滅菌法：即常壓滅菌，用于一些受高溫而破壞培養(yǎng)基滅菌。操作方法：a.待滅菌物品放在滅菌器或蒸籠里，天天蒸煮1次，每次在100℃煮沸30～60min，連續(xù)3d重復(fù)進(jìn)行。b.在每兩次蒸煮之間，將物品（指培養(yǎng)基）放在37℃恒溫條件下培養(yǎng)24h，這么能夠使每次蒸煮后未殺死殘留芽孢萌發(fā)成營養(yǎng)體，方便下次蒸煮時殺滅。c.第三次蒸煮之后基礎(chǔ)無菌，但為了確保無菌仍要放在37℃恒溫條件下培養(yǎng)24h，確定無菌才能使用。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第24頁

過濾除菌法：

不能用加熱滅菌液體物質(zhì)（如維生素、血清），普通可用細(xì)菌過濾器進(jìn)行除菌。

用于除菌濾器：a.蔡氏濾器，b.注射器裝置濾器環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第25頁思索題1.配制培養(yǎng)基有哪幾個步驟?在操作過程中應(yīng)注意些什么問題?為何?2.培養(yǎng)基配制完成后，為何必須馬上滅菌?若不能及時滅菌應(yīng)怎樣處理？已滅菌培養(yǎng)基進(jìn)行無菌檢驗？3.高壓蒸汽滅菌中為何要把冷空氣排凈，為何在滅菌后不能驟然快速降壓，并要再放盡鍋內(nèi)蒸汽才能打開鍋蓋?

環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第26頁試驗三細(xì)菌純種分離、培養(yǎng)和接種技術(shù)環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第27頁試驗?zāi)繕?biāo)1.掌握從環(huán)境（土壤、水體、活性污泥、垃圾、堆肥等）中分離培養(yǎng)細(xì)菌方法，從而取得若干種細(xì)菌純培養(yǎng)技能。2.掌握幾個接種技術(shù)。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第28頁實驗器材

無菌培養(yǎng)皿(直徑90mm)10套、無菌移液管1mL2支、10mL1支。營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶，無菌稀釋水90mL1瓶、9mL5管。其它：接種環(huán)、酒精燈、恒溫箱。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第29頁實驗步驟一、細(xì)菌純種分離

環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第30頁(一)稀釋平板法1.取樣用無菌錐形瓶到現(xiàn)場取一定量湖水，快速帶回試驗室。2.稀釋水樣將1瓶90mL和5管9mL無菌水排列好，用記號筆依次編上10－1、10－2、10－3、10－4、10－5、10－6。在無菌操作條件下，用10mL無菌移液管吸收10mL水樣(或其它樣品)加入編號為10－1無菌水(內(nèi)含玻璃珠)中，將移液管吹洗三次，用手搖10min將顆粒狀樣品打散。即為10－1濃度菌液。用1mL無菌移液管吸收1mL10－1濃度菌液于編號為10－2無菌水中，將移液管吹洗三次，搖勻即為10－2濃度菌液。一樣方法，依次稀釋到10－6。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第31頁稀釋液制備10mL試樣90mL蒸餾水環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第32頁3.平板制作①取10套無菌培養(yǎng)皿編號，10－4、10－5、10－6各3個，另一個為空氣對照。②取1支1mL無菌移液管從濃度小菌液開始，以10－6、10－5、10－4為序分別吸收0.5mL菌液于對應(yīng)編號培養(yǎng)皿內(nèi)(每次吸收前，用移液管在菌液中吹泡使菌液充分混勻)。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第33頁③加熱培養(yǎng)基，當(dāng)其冷至45℃左右時，右手拿裝有培養(yǎng)基錐形瓶，左手拿培養(yǎng)皿，以中指、無名指和小指托住皿底，拇指和食指夾住皿蓋，靠近火焰，將皿蓋掀開，倒入培養(yǎng)基后將培養(yǎng)皿平放在桌上，順時針和逆時針往返轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基和菌液充分混勻，冷凝后即成平板，倒置于30℃培養(yǎng)24～48h，然后觀察結(jié)果。

a:皿法b:倒平板環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第34頁④取對照無菌培養(yǎng)皿，倒平板待凝固后，打開皿蓋10min后蓋上，倒置于30℃培養(yǎng)24～48h，然后觀察結(jié)果。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第35頁（二）平板劃線法1.平板制作：將融化并冷至約50℃肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基倒入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，使凝固成平板。2.劃線：用接種環(huán)挑取一環(huán)樣品，左手拿培養(yǎng)皿，中指、無名指和小指托住皿底，拇指和食指夾住皿蓋，將培養(yǎng)皿稍傾斜，左手拇指和食指將皿蓋掀半開，右手將接種環(huán)伸入培養(yǎng)皿內(nèi)，在平板上輕輕劃線(切勿劃破培養(yǎng)基)。劃線完成蓋好皿蓋，30℃培養(yǎng)24～48h后觀察結(jié)果。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第36頁平板劃線分離劃線方法

左：連續(xù)劃線法（1，2依次劃線起點）右：分區(qū)劃線法（1，2，3，4依次劃線起點）環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第37頁

二、細(xì)菌接種技術(shù)接種方法：常見有斜面接種法、平板接種法、液體接種法、試管深層固體培養(yǎng)基穿刺接種法。接種工具：常見有接種針、接種環(huán)、接種鉤、接種圈、接種鏟或接種鋤、玻璃涂棒等。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第38頁

（一）斜面接種法①左手平托兩支試管，拇指壓住兩支試管。外側(cè)是菌種試管，內(nèi)側(cè)是待接種空白斜面(兩支試管斜面同時向上)。右手將棉塞旋松，方便在接種時輕易拔出。②右手拿接種環(huán)，在火焰上先將環(huán)端燒紅滅菌，然后將有可能伸入試管其余部位也過火滅菌。③將兩支試管上端并齊，靠近火焰，用右手小指、無名指和手掌將兩支試管棉塞一并夾住拔出，棉塞仍夾在手中，然后讓試管口緩緩過火焰。123環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第39頁④將已灼燒過接種環(huán)伸入菌種試管內(nèi)。先冷卻，而后再用環(huán)挑取少許菌種，將接種環(huán)抽出并快速伸入待接種試管底部，在斜面上由底部向上劃線。抽出接種環(huán)，塞上棉塞將試管插在試管架上，最終再次燒紅接種環(huán)，則接種完成。45678環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第40頁

（二）液體接種和穿刺接種1.液體接種法(從斜面菌種接入培養(yǎng)液)：用接種環(huán)挑取斜面菌種送入培養(yǎng)液中，使環(huán)在液體表面與管壁接觸輕輕研磨，將環(huán)上菌種全部洗入培養(yǎng)液中，取出接種環(huán)塞上棉塞。將試管輕輕撞擊手掌使菌體在培養(yǎng)液中均勻分布。最終將接種環(huán)燒紅滅菌。2.穿刺接種法(從斜面菌種接入(半)固體培養(yǎng)基)：用接種針經(jīng)火焰滅菌后，挑取少許菌種，垂直地穿入試管固體培養(yǎng)基中心至底部，然后穿刺線遲緩將針抽出，塞上棉塞。燒紅接種針滅菌，則接種完成。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第41頁

（三）稀釋平板涂布法1.稀釋樣品：方法同稀釋平板分離法2.倒平板：將融化并冷至50℃左右培養(yǎng)基倒入無菌培養(yǎng)皿中，冷凝后即成平板3.用無菌移液管吸收一定量經(jīng)適當(dāng)稀釋標(biāo)志樣品液于平板上，換上無菌玻璃刮刀在平板上旋轉(zhuǎn)涂布均勻4.將培養(yǎng)皿正擺在恒溫箱中，調(diào)整一定溫度進(jìn)行培養(yǎng)。假如培養(yǎng)時間較長，次日把培養(yǎng)皿倒置繼續(xù)培養(yǎng)，直至長出菌落。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第42頁（四）液體培養(yǎng)基中菌種接入液體培養(yǎng)基接種工具：無菌移液管和無菌滴管移液管和滴管不能在火焰上燒，應(yīng)預(yù)先滅菌用無菌移液管自菌種管中吸收一定量菌液接到另一管液體培養(yǎng)基中，將試管塞好棉塞即可。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第43頁思索題1.斜面接種取菌前為何要將灼燒過接種針在無菌培養(yǎng)基上沾一下？2.用一根無菌移液管接種幾個濃度水樣時，應(yīng)從哪個濃度開始？為何？環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第44頁試驗四濾膜法測定總大腸菌群

本方法適合用于生活飲用水和低濁度水源水中總大腸菌群數(shù)測定。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第45頁試驗?zāi)繕?biāo)1.了解總大腸菌群數(shù)量指標(biāo)在環(huán)境領(lǐng)域主要性，掌握總大腸菌群檢驗方法。2.經(jīng)過檢驗過程，了解大腸菌群生化特征。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第46頁試驗原理用孔徑為0.45μm微孔濾膜過濾水樣，細(xì)菌被截留在濾膜上，將濾膜貼在選擇性培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后，計數(shù)生長在濾膜上經(jīng)典大腸菌群菌落數(shù)，算出每升水樣中含有總大腸菌群數(shù)。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第47頁試驗器材顯微鏡、錐形瓶、移液管、滅菌培養(yǎng)皿、小試管、試管（18mm×180mm）、吸管、接種環(huán)、試管架、過濾器、抽濾設(shè)備、無菌鑷子、濾膜

（孔徑為0.45μm）、培養(yǎng)箱:36±1℃、冰箱:0～4℃、天平。革蘭氏染色液一套：草酸銨結(jié)晶紫染液、革蘭氏碘液、體積分?jǐn)?shù)為95％乙醇、番紅染液。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第48頁品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基（乙）蛋白胨10g酵母浸膏5g牛肉膏5g乳糖10g瓊脂20g磷酸氫二鉀3.5g無水亞硫酸鈉5g左右堿性品紅乙醇溶液(50g/L)20mL蒸餾水1000mLpH：7.2~7.4滅菌條件：0.072Mpa（1150C，15~20min）環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第49頁乳糖蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨10g牛肉膏3g乳糖5g氯化鈉5g溴甲酚紫乙醇溶液(16g/L)1mL蒸餾水1000mLpH：7.2~7.4滅菌條件：0.072Mpa（1150C，20min）環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第50頁試驗步驟一、準(zhǔn)備工作1.濾膜滅菌:將濾膜放入燒杯中，加入蒸餾水，置于沸水浴中煮沸滅菌三次，每次15min。前兩次煮沸后需更換水洗滌2～3次，以除去殘留溶劑。2.濾器滅菌:用點燃酒精棉球，火焰滅菌。也可用121℃高壓滅菌20min。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第51頁二、過濾水樣用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣個別，將粗糙面向上，貼放在已滅菌濾床上、，固定好濾器，將333mL水樣(如水樣含菌數(shù)較多，可降低過濾水樣量，或?qū)⑺畼酉♂?注入濾器中，打開濾器閥門，在-500Pa壓力下抽濾。環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第52頁三、培養(yǎng)水樣濾完后，再抽氣約5s，關(guān)上濾器閥門，取下濾器，用滅菌鑷子夾取濾膜邊緣個別，移放在品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基平板上，濾膜截留細(xì)菌面向上，濾膜應(yīng)與培養(yǎng)基完全貼緊，二者間不得留有氣泡，然后將平皿倒置，放入37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)22～24h。

環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第53頁四、觀察結(jié)果挑出符合以下特征菌落進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢。

紫紅色，含有金屬光澤菌落。

深紅色，不帶或略帶金屬光澤菌落

淡紅色，中心色較深菌落。凡革蘭氏染色為陰性無芽胞桿菌，再接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)基液，于37℃培養(yǎng)24h，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者，則判定為總大腸菌群陽性。

環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第54頁五、試驗結(jié)果計算濾膜上生長總大腸菌群數(shù)

將自來水中總大腸菌群數(shù)量計算出來水中總大腸菌群數(shù)(個/L)＝濾膜生長菌落數(shù)×1000÷過濾水樣量(mL)

（濾膜上菌落數(shù)以20～60個/片為適宜）環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第55頁思索題1.檢驗飲用水中大腸菌群有何意義？2.試驗過程中有什么問題，你認(rèn)為原因何在，怎樣克服？環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第56頁試驗五空氣中微生物測定環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第57頁

了解不一樣環(huán)境條件下，空氣中微生物分布情況；學(xué)習(xí)并掌握檢測和計數(shù)空氣微生物基礎(chǔ)方法。試驗?zāi)繕?biāo)環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第58頁滅菌培養(yǎng)皿、天平、稱量紙、恒溫箱、培養(yǎng)基試驗器材環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第59頁(—)肉湯蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（培養(yǎng)細(xì)菌）牛肉膏5.0g蛋白胨10.0g、NaCl5.0g、瓊脂20.0g、自來水1000mL、pH7.2~7.4滅菌條件:0.103Mpa（1210C、15~20min）環(huán)境工程微生物學(xué)實驗顧彥第60頁（二）高氏一號瓊脂培養(yǎng)基（培養(yǎng)放線菌）可溶性淀粉20gKNO31.0gK2HPO40.5gMgSO4·7H2O0.5gNaCl0.5gFeSO4·7H2O0.5g瓊脂20g蒸餾水